76 39: СОН 76-39 по стандарту: Серия 3.407.1-157

СОН 76-39

Унифицированные железобетонные элементы подстанций стойки СОН 76-39 — это железобетонные изделия из тяжелого бетона, предназначенные для строительства и устройства открытых распределительных устройств (ОРУ), закрытых и открытых электроподстанций, которые используются при проведении воздушных высоковольтных линий электропередач (ЛЭП) для приема, преобразования и распределения электрической энергии в энергетических сетях напряжением 35–500 кВ. Также подстанции применяются в зданиях основного и вспомогательного назначения. Электрические подстанции состоят из трансформаторов, устройств управления, распределительных и вспомогательных устройств.

В компании ГК «БЛОК» вы можете купить железобетонные изделия стойки СОН 76-39 для строительства энергетических подстанций разных типов и размеров. Данные изделия относятся к группе унифицированных железобетонных элементов подстанций по серии 3.407.1-157. В нашей компании можно не только заказать железобетонные элементы подстанций, но и проконсультироваться с нашими специалистами, подобрать требуемые ЖБИ.

В нашем отделе продаж можно узнать заранее и уточнить цену элементов подстанций и рассчитать общую стоимость заказа. Купить жб изделия и проконсультироваться по общим вопросам покупки и доставки Вы можете, позвонив по телефонам компании ГК «БЛОК»: Санкт-Петербург: (812) 309-22-09, Москва: (495) 646-38-32, Краснодар: (861) 279-36-00. Режим работы компании: Пн-Пт с 9-00 до 18-00. Режим работы компании: Пн.-Сб. с 9-00 до 18-00. Компания ГК БЛОК осуществляет доставку элементов подстанций по всей России прямо к объекту заказчика или на строительную площадку, если позволяет инфраструктура.

Сборные железобетонные элементы подстанций стойки СОН 76-39 предназначены для применения в I, II, III и IV климатических районах с минимальной расчетной температурой наружного воздуха самой холодной пятидневки до -55°С.

Преимущества применения железобетона в качестве материала для изготовления элементов подстанций стойки СОН 76-39:

• железобетон на сегодняшний день является самым прочным материалом по сравнению с другими строительными материалами;
• бетон не подвержен деформации, несмотря на длительную и интенсивную эксплуатацию, даже в случаях использования бетонных изделий в зонах с агрессивной окружающей средой;
• железобетонные изделия сохраняют свои первоначальные физические характеристики в любых климатических условиях достаточно длительное время (минимум 70 лет) даже при эксплуатации в районах с максимально низкой температурой воздуха;
• поверхность бетонных конструкций не подвержена воздействию влаги и агрессивных химических веществ;
• экономическая целесообразность. Конструкции, бывшие в употреблении, можно применять неоднократно (например, при реконструкции энергетических объектов, установки временных распределительных устройств и т.д.).

Унифицированные железобетонные элементы подстанций стойки СОН 76-39 изготавливаются по чертежам серии 3.407.1-157 и ТУ 5863-003-00113371-2004 из тяжелого бетона классом прочности на сжатие от В15. В качестве заполнителя используется гранитный щебень. Марка бетона изделий по морозостойкости определяется в зависимости от расчетной температуры наружного воздуха в районе строительства: F100 — F200. Для конструкций, которые подвергаются в грунте воздействию агрессивной среды, марка бетона по водонепроницаемости должна быть не менее W6.

Значительные прочностные характеристики изделий стойки СОН 76-39 достигаются предварительным напряжением арматуры, что положительно влияет на сопротивление негативным природным факторам и обеспечивает как надежность, так и длительный срок службы конструкций без угрозы преждевременного разрушения.

В качестве арматуры для бетона элементов подстанций стойки СОН 76-39 применяется стержневая горячекатаная гладкая сталь класса А-I по ГОСТ 5781-82, стержневая горячекатаная сталь периодического профиля класса А-III и A-V по ГОСТ 5781-82, стержневая термически упрочненная сталь периодического профиля класса Ат-IV по ГОСТ 10884-81 и обыкновенная арматурная проволока гладкая класса В-1 по ГОСТ 6727-80. Монтажные петли изготавливаются из горячекатаной гладкой арматурной стали класса А-I, марок ВСт3 сп2 и ВСт3 пс2. Все детали армирования и закладные изделия в обязательном порядке предварительно обрабатываются средствами для защиты от коррозии.

Большая ответственность, которая стоит перед несущими элементами подстанций, предписывает соблюдать серьезные требования, которые предъявляют к унифицированным элементам подстанций стойки СОН 76-39. Прочность бетона элементов контролируется на всех стадиях изготовления изделий: на стадии приготовления смеси; при укладке смеси в опалубку.

Когда изделие готово, его проверяют ультразвуковым методом, который позволяет выявить даже незначительные погрешности.

Элементы подстанций стойки СОН 76-39 должны быть рассчитаны на значительные нагрузки в сложных условиях эксплуатации. Достигающие немалых величин ветровые нагрузки, температурные колебания, как сезонные, так и суточные, агрессивное воздействие ультрафиолетовых излучений, атмосферных осадков, выхлопных газов — для сопротивления этим внешним нагрузкам и воздействиям изделия должны иметь высокую несущую способность для длительной эксплуатации.

По вопросам монтажа изделий группы «Элементы подстанций» обращаться по телефону (812) 309-22-09.

СОН 76-39 по стандарту: Серия 3.407.1-157

Стойка опор предварительно напряженная СОН 76-39 — это высокопрочное изделие, созданное путем соединения бетона и стального каркаса в единый монолит. Конструкция представлена прямоугольной формы, с квадратным сечением в поперечном разрезе.

В целом, данная стойка разработана для применения ее при строительстве электрической подстанции 35-500 кВ, в которых она служит для установки электротехнического оборудования. К условиям для эксплуатации данных элементов относится расположенность строительной площадки в первом, втором, третьем или четвертом климатических районах с минимальной температурой наружного воздуха по самой холодной пятидневки до минус сорока градусов по Цельсию.

Расшифровка маркировки

Все железобетонные детали обладают универсальной маркой, благодаря которой можно быстро и легко распознать изделие в широком номенклатурном ряду. Маркировка состоит из буквенно-числового кода, который несет в себе смысловую нагрузку об основных характеристиках изделия. Так если рассматривать расшифровку

СОН 76-39, можно узнать следующую информацию:

1. СОН — название конструкции — стойка опор предварительно напряженная;

2. 76 — длина в дм;

3. 39 — несущая способность.

Все необходимые при эксплуатации сведенья, в том числе и маркировка, наносятся водостойкой контрастной краской на поверхности готового изделия.

Материалы и производство

Основным нормативом, в котором закреплены требования для изготовления стоек опор, является Серия 3.407.1-157. Технологический процесс складывается из нескольких последовательно выполняемых операций, каждая из которых сопровождается пооперационным контролем. Одним из основных материалов для выпуска

СОН 76-39 является тяжелый бетон класса В30. Входящие в его состав сульфатостойкий портландцемент, портландцемент, щебень, гравий и вода рационально подобраны и качественно уплотнены. Марка бетонной смеси по морозостойкости определяется в зависимости от расчетной температуры наружного воздуха в районе строительства и должна приниматься не ниже:

1. до -20 градусов по Цельсию — F100;

2. от -21 до -40 градусов по Цельсию — F150;

3. ниже -40 градусов по Цельсию — F200.

Марка бетона по водонепроницаемости назначается не ниже W6. Прочность бетона в момент отпуска с завода должна быть не ниже 100% в зимнее время и 75% — летом.

Наличие стального каркаса в стойке

обязательно, благодаря ему изделие приобретает большую прочность и надежность. Так армирование СОН 76-39 осуществляется с помощью напрягаемой и ненапрягаемой арматуры, из которой посредством контактно-точечной сварки составляется каркас. Применяемая здесь сталь — класса АтVI диаметром 12 миллиметров, с использованием обыкновенной арматурной гладкой проволоки класса В-I. Для упрощения погрузочно-разгрузочных процессов, в тело конструкции закладывается монтажная петля из гладкой стали класса А-I марок ВСт3сп2 и ВСт3пс2.

Приемка готовых стоек осуществляется партиями. Во время приемочного контроля проверяется соответствие геометрических параметров изделия заданным, состояние поверхности конструкций — они должны быть гладкие, без наплывов бетона и раковин, а также проверяются такие технические показатели как прочность, жесткость и трещиностойкость.

Хранение и транспортировка

Складское помещение для стоек должно быть обустроено таким образом, чтобы хранящиеся в нем изделия были полностью защищены от осадков и других воздействий окружающей среды. Данные длинномерные изделия хранятся в один ряд, с использованием деревянного инвентаря. Перевозятся СОН 76-39 специализированным транспортом, обладающим необходимой грузоподъемностью, с применением креплений, обеспечивающих надежную фиксацию продукции.

Уважаемые покупатели! Сайт носит информационный характер. Указанные на сайте информация не являются публичной офертой (ст.435 ГК РФ). Стоимость и наличие товара просьба уточнять в офисе продаж или по телефону 8 (800) 500-22-52

СОН 76-39 стойка Москва

Общая информация

Железобетонная стойка СОН 76-39 предназначена для монтировки электротехнического оборудования и открытых распределительных устройств.

Она представляет собой монолитный железобетонный стержень с сечением в виде квадрата, внутри которого имеются армирующие стальные стержни. На одном из концов стойки находится оголовок из горячекатаной стали.

Особенности железобетонных стоек СОН 76-39

К железобетонным стержням СОН предъявляются особые требования в связи с условиями их эксплуатации:

Высокий уровень влагостойкости.

— Способность выдерживать отрицательные температуры до -40С.
— Устойчивость к механическим повреждениям и образованию трещин.
— Сейсмоустойчивость (это особенно важно в сейсмоопасных регионах), стойки способны выдерживать землетрясения до 6 баллов.
— Повышенные показатели устойчивости перед электрокоррозией.

Параметры сечения стойки СОН 76-39 составляют 21 х 21 см. В высоту в зависимости от монтируемого на них электрооборудования размер стержня может составлять от 220 до 520 см. Вес несущей конструкции, который способна выдержать стойка, находится в прямой зависимости от ее высоты. Чем больше высота, тем выше несущая способность. Безусловно, не стоит ожидать, что размер будет соответствовать заявленному с точностью до миллиметра. Допустимые погрешности в поперечном сечении составляют до 8 мм, в высоту — 10 мм. 

Перед приемом партии железобетонных стоек каждая из них тщательно проверяется. Контролируют качество сварных швов, отсутствие трещин на поверхности, соответствие заявленным размерам. После детального контроля на каждую партию должен выписываться технический паспорт. Производитель дает гарантию на изделие не менее 1 года. Но при этом с момента изготовления до окончания гарантийного срока должно пройти не более 1,5 лет.

Как хранятся, транспортируются и устанавливаются стойки СОН

Хранить данный вид железобетонных изделий необходимо, укладывая их вдоль в один ряд. В противном случае петли или оголовок могут быть повреждены. Транспортировка возможна железнодорожным транспортом или с помощью специальных сверхгрузоподъемных автомобилей.

Установка железобетонных стоек СОН 76-39 довольна проста. Как правило, она не требует дополнительных затрат, достаточно пробурить скважину по размеру. Но на почвах, склонных к смыванию грунта приходится делать скатный фундамент. Это обеспечивает устойчивость конструкции.

Размеры и характеристики СОН 76-39 7600х210х210

Размеры и характеристики СОН 76-39 представлены в таблице ниже. По ГОСТ допускается отклонение размеров на более 4-6 мм.

• Длина: 7 600 мм.
• Ширина: 210 мм.
• Высота: 210 мм.
• Вес: 0,85 т.
• Объем: 0.340 м³
• ГОСТ: Серия 3.407.1-157

Опоры СОН 76-39 бетонные маркировка

Железобетонные опоры СОН 76-39 этой серии выпускаются в различных размерных и конструктивных вариациях, поэтому в производстве встречаются плиты с различной буквенно-цифровой маркировкой.

Буквы расшифровываются как (плиты аэродромные гладкие), цифры обозначают размер (толщину изделия).

Маркировка римскими цифрами показывает тип арматуры (напрягаемая стержневая, ненапрягаемая).

Доставка СОН 76-39

Доставка СОН 76-39 осуществляется собственным транспортом в г. Москва, области и другим областям России! Расчет доставки можно заказать в разделе Доставка.

При доставке СОН 76-39 необходимо соблюдать меры предосторожности. Транспортировать тяжеловесный груз согласно ГОСТ Серия 3.407.1-157 разрешено только в горизонтальном положении в спецтранспорте. При погрузке/разгрузке запрещено перемещать стойки по нескольку штук, только по одной плите. Исключение: такелажные работы специальными устройствами, где допускается подъем нескольких стоек одновременно.

При складировании на открытом грунте в основание штабеля кладется прокладка толщиной не менее 10 см, необходим сток для воды.

СОН 76-39 цена в Москве

Стойка СОН 76-39 цена за штуку и зависит от их размера, толщины, наличия/отсутствия укрепляющих добавок, армирования. Чтобы не переплачивать за товар, целесообразно заказать стойки напрямую от производителя завод ООО ПСК Перспектива. Так вы получите сертифицированные железобетонные изделия с лабораторным заключением и по оптимальной стоимости.

Наша компания может предложить вам оптимальный баланс между качеством и стоимостью стоек.

Наш прайс можно запросить оформив заказ в интересующем Вас разделе сайта.

Купить СОН 76-39 на заводе ЖБИ

Выгодно купить СОН 76-39 в Москве без посредников на заводе ЖБИ Перспектива. Новые СОН 76-39 всегда есть в наличии на наших складах. Сейчас мы наращиваем производственную мощность и ищем новых надежных партнеров. 

Аналоги написания ЖБИ на заводе жбк и дск СОН 76.39, СОН76-39

Стойка СОН 76-39 серия 3.407.1-157 ВЫПУСК 1

Стойка СОН 76-39 серия 3.407.1-157 ВЫПУСК 1

При обустройстве линий электропередач используются ЖБИ стойки опор. Специализация данного изделия узконаправленна. Стойки используют для строительства ЛЭП с напряжением 0,38 — 10 кВ. Они могут работать в газовой среде, в районах с сейсмической активностью до 9 баллов и в агрессивной среде.

ЖБИ стойки вибрированные используют для опор ЛЭП анкерно-углового и промежуточного типа — чтобы подвешивать несколько проводов воздушных линий, проводного вещания в районах с сильным ветром и в районах с гололедом.

Опора на основе ЖБИ стоек производится из прочного тяжелого бетона с применением вибрирования в соответствии с необходимыми требованиями тех. условий. В качестве арматуры для напряжения применяется сталь диаметром 12 мм класса At-V.

Стойки выбираются в зависимости от расположения стройки и ее климатических условий.

ЖБИ стойки опор, предназначенные для воздушных ЛЭП, полностью соответствуют техническим и регламентным требованиям по следующим показателям: надежность и прочность материала, расстояние от бетона до арматуры, показатель антикоррозийной устойчивости, водонепроницаемость изделия, морозоустойчивость, жесткость стоек, трещиностойкость, соответствие каркасов арматуры чертежам, точные геометрические параметры готового изделия.

Стойки ЖБИ для опор ЛЭП делятся на следующие типы: С — имеющие проволочную арматуру; СВ — с проволочной арматурой и (в нижней части изделия) с обратной конусностью, для обустройства в котлованы; СО — имеющие в фундаментальной части стержневую либо проволочную арматуру; СВО — такие же, но в нижней части с обратной конусностью.

Маркировка данного изделия состоит из одной, двух, либо трех разделенных дефисом буквенно-цифровых групп. Первая группа начинается буквенным обозначением наименования стойки, например, СВ (стойка вибрированная), далее идет длина изделия в дециметрах. Затем следует группа цифр, которая называет несущую способность стойки опоры. Таким образом, СВ 110 — 3,5 нужно прочитать так: стойка вибрированная, длиной 11 м, ее изгибающий момент — 3,5 тс на метр.

Подшипник задней ступицы 42х76х39 52710-26530/52710-26510/0K552-33047/51720-FL047/0K56B-33047 DIRECT PARTS

Цена

от

до

Название:

Артикул:

Текст:

Выберите категорию: Все Запчасти для корейских автомобилей » Запчасти Hyundai Kia »» Расходные материалы »»» Задние колодки »»» Передние колодки »»» Свечи »»» Фильтры АКПП »»» Фильтры воздуха »»» Фильтры масла »»» Фильтры салонные »»» Фильтры топлива »»» Приводные ремни »» Двигатель »» Подвеска »» Трансмиссия »» Рулевое управление »» Кузов, экстерьер »» Тормозная система »» Система зажигания »» Система охлаждения »» Кондиционер »» Электрооборудование »» Топливная система »» Впускная выпускная система » Запчасти ЗАЗ ШАНС 1. 3 » Запчасти Daewoo Chevrolet »» Расходные материалы »»» Задние колодки »»» Передние колодки »»» Свечи »»» Фильтры АКПП »»» Фильтры воздуха »»» Фильтры масла »»» Фильтры салонные »»» Фильтры топлива »» Двигатель »» Подвеска »» Трансмиссия »» Рулевое управление »» Кузов, экстерьер »» Электрооборудование »» Тормозная система »» Система зажигания »» Система охлаждения »» Кондиционер »» Топливная система »» Впускная выпускная система » ЗАПЧАСТИ PORTER » Запчасти Ssang Yong » Масла Смазки »» Моторные масла »»» Mobil »»» Castrol »»» HYUNDAI-KIA »»» General Motors »»» GB »»» Shell »»» TOTAL »»» ZIK »»» NISSAN »»» FORD »»» TOYOTA »»» VAG »» Трансмиссионные масла »» Охлаждающие жидкости »» Тормозные жидкости »» Герметик » Щетки стеклоочистителя » Автолампы » Автокрепеж » Гофры Глушителя » Гайки, Болты и Секретки »» Гайки »» Болты »» Секретки »» Шпильки » Предохранители » Кунги для пикапов Запчасти для европейских авто » Запчасти Opel »» Двигатель »»» Система выпуска »»» Топливная система »» Кузов »» Расходные материалы »» Подвеска »» Тормозная система »» Рулевое управление »» Система охлаждения »» Трансмиссия »» Электрооборудование »»» Стеклоочистка » Запчасти Ford »» Двигатель »»» Топливная система »»» Система выпуска »» Подвеска »» Расходные материалы »» Тормозная система »» Рулевое управление »» Кузов »» Система охлажения »» Электрооборудование »» Трансмиссия » Автомасла и спецжидкости »» Оригинальные автомасла »» MOTUL »» HECK »» CASTROL »» ЛУКОЙЛ »» ZIC »» ELF »» MOBIL »» SHELL »» VISCO BP »» TOTAL »» Liqui Moly »» Антифриз »» Трансмиссионное масло »» Тормозная жидкость »» Смазки »» Дистиллированная вода »» Автохимия »» Омывающая жидкость » Запчасти VAG » Запчасти Peugeot » Лампы » Щетки стеклоочистителя »» Оригинальные щетки »» BOSCH » Запчасти на заказ

Производитель: Все1NEW3M555ABabroACDelcoACHIMADADDAX-QADRIAUTOAEAFAAGATEKAIM-ONEAirtexajusaALCOAlkarAllied NipponALPHA (Тайланд)ALTONIKAAMDANJUNAPIAPRARALARIRANGAsamAshikaASINASVAATCAteATEKATIHOAUTOKLAKSONautoplusAUTOPLUSAUTOTOPAUTOWELTAVAAVILINEAWMB-SYSTEMBASBUGberuBesf1stBESF1TSBilsteinBINGOBIOLIGHTBlue PrintBMWBogeBOSCHBOSCH BelgiumBPBRCBremboBremiBRSCAR-DEXCARBONCastrolCHERYCIFAMCitroen/PeugeotCLEAN FILTCLIMAIRCONSTRUCTCONTINENTContitechCortecoCTRCXDACDaedongDAEJINDaelimDAEWOODAKARDASHIDAYCODEFENDDelloDelphiDENSODensoDEPODIRECT PARTSDOLZdominantDONE DEALDONGILDOO HAPDOOWONDP GROUPDUNLOPDYCEcolineEDEXELFELF TOTALElringEPSERAERTEUEUROLOCKEX-TRIMExedyFAEFAGFEBESTFEBIFELIXFENOXFIATFILTER MASTERFILTRONFLAMMAFORCHFORDFORD EUFORD NAFORMIKAFORMPARTFortechFortluftFRAMfrecciaFRENKITFTEGARANTGATESGeneral MotorsGeneral RicambiGHGKNGlaserGMGM/DAEWOOGMBGMPGOLD ROTORGoodFilGORIZONTGrafGrand PrixGREENCOOLGSPGTGTRGUNKHangilHans PriesHANWOOHANYANGHCCHDKHECKHellaHENKELHEPUHerzogHI GEARHI-GEARHSBHSCHUCOHYUNDAIHYUNDAI/KIAI-M-GICERILJINImpergomINAINFACINTROIRIMOISTJANMORJapan CarsJAPAN PARTSJB GERMAN OILJB GERMANOILJHFJMJJp GroupJS AsakashiJUNSITEJurid/BendixKAPKARAKURTKashiyamaKAYABAKBCKCWKERRYKFMKFZKGCKIXXKlariusKlokkerholmKMK GLASSKnecht (Mahle Filter)KolbenschmidtKonsteinKORTEXKOSKrafttechKRAMCOKSLAEBROLemforderLESJOFORSLEXLIQUI MOLYLIQUIMOLYLoctiteLoebroLonghoLPRLukLUZARLynxMABITEKMAGNETI MARELLIMANDOMannMann/LindeMAPCOmasumaMAZDAMECARMMEDMercedesMeyleMICHELINMITSUBISHIMitsuboshiMOBILMOBISMONROEMOOGMOTORCRAFTMOTULMr. TwisterMS TWISTERMSGMTAMTFMXMY DEANN.B.NNAC/FORTECHNARVANAVIPILOTNEOLUXnesensNGNGKNiBKNINGBONippartsNissanNISSENSNKNO NAMENOKIANNOMACONNord YADANORDENNORPLASTNOVANOVLINENPRNTOCAPOIL RIGHTONECOONNURIOPELOSRAMOSSCAPANDORAPARKCITYPARKMASTERPARROTParts-MallPatronPAYENPermatexPeugeotPHPHANTOMPhilipsPilengaPingoPIRELLIPMCPOLCARPOMAXPOSPRASCOPrestoPRIMPRO SEALQMLRAONRAVENOLREALSTONREBUILTReinzRemsaRENAULTReplicaRHEE JINROLFRTSRUVILLES.HSachsSakuraSamsungSangsin/HI-QSATSCHER-KHANSCTSeinsaSeinsa-AutofrenSEKURITShellSHINHANSHO-MESICsidemSINTECSINTOILSJautoSKFSKYSKYFILSNRSPIDANSSANG YONGSsangYongSTSTARLINESTDWSTELLOXSuzukiSWAGT7TaeYuongTamaTCICTermalTerosonTESLATEXTARTIGARTONG YANG GROUPTORQUETOTALTOYOToyotaTransmasterTRI ABCTRIALLITRWTSNTWTXTYCUAZUFIUkor-FenghuaVAGValeoVALVOLINEVeneporteVENWELLVEPVERNETVICHURAVICTOR REINZVMPAutoWahlerWALKERWELLTEXWINGSTERWOLFWURTHWynn’sWYYN’SX2X2-HUBYATOYES-QYOKOHAMAYONGJINZICZZVFАВС-ДИЗАЙНАСТРОХИМБеларуссияБельгияВД-40 Компани Лтд.ВеликобританияГАЗПРОМГерманияДанияДЖИН ХУДзержинскХимпромСервисДИАЛУЧЕвропаЗАО «Гелена-Химавто»ЗАО «Неозон»ЗАО «Сант-Сервис»ИспанияИталияКАЛИПСОКитайКИТАЙКореяКрепеж колесЛУКОЙЛМАНУФАКТУРМАЯКМТАНидерландыНИЖНЕКАМСКНЕФТЕОРГСИНТЕЗООО «Тектрон»Органик-СинтезПЕРСТИЛЬПольшаРОСНЕФТЬРоссияСИБУР-НЕФТЕХИМСловенияСМRСтрана изготовленияСТРЭТСОНТайваньТЕХНОФОРМТНКТосол СинтезТРИТОН (3TON)УКРАИНАФобосФОРМИКАФранцияЭстонияЯпония

Новинка: Вседанет

Спецпредложение: Вседанет

Результатов на странице: 5203550658095

Найти

Изменение № 1 к СП 84.

13330.2016 «СНиП III-39-76 Трамвайные пути»

Перед направлением электронного обращения в Минстрой России, пожалуйста, ознакомьтесь с изложенными ниже правилами работы данного интерактивного сервиса.

1. К рассмотрению принимаются электронные обращения в сфере компетенции Минстроя России, заполненные в соответствии с прилагаемой формой.

2. В электронном обращении может содержаться заявление, жалоба, предложение или запрос.

3. Электронные обращения, направленные через официальный Интернет-портал Минстроя России, поступают на рассмотрение в отдел по работе с обращениями граждан. Министерство обеспечивает объективное, всестороннее и своевременное рассмотрение обращений. Рассмотрение электронных обращений осуществляется бесплатно.

4. В соответствии с Федеральным законом от 02. 05.2006 г. N 59-ФЗ «О порядке рассмотрения обращений граждан Российской Федерации» электронные обращения регистрируются в течение трёх дней и направляются в зависимости от содержания в структурные подразделения Министерства. Обращение рассматривается в течение 30 дней со дня регистрации. Электронное обращение, содержащее вопросы, решение которых не входит в компетенцию Минстроя России, направляется в течение семи дней со дня регистрации в соответствующий орган или соответствующему должностному лицу, в компетенцию которых входит решение поставленных в обращении вопросов, с уведомлением об этом гражданина, направившего обращение.

5. Электронное обращение не рассматривается при:
— отсутствии фамилии и имени заявителя;
— указании неполного или недостоверного почтового адреса;
— наличии в тексте нецензурных или оскорбительных выражений;
— наличии в тексте угрозы жизни, здоровью и имуществу должностного лица, а также членов его семьи;
— использовании при наборе текста некириллической раскладки клавиатуры или только заглавных букв;
— отсутствии в тексте знаков препинания, наличии непонятных сокращений;
— наличии в тексте вопроса, на который заявителю уже давался письменный ответ по существу в связи с ранее направленными обращениями.

6. Ответ заявителю обращения направляется по почтовому адресу, указанному при заполнении формы.

7. При рассмотрении обращения не допускается разглашение сведений, содержащихся в обращении, а также сведений, касающихся частной жизни гражданина, без его согласия. Информация о персональных данных заявителей хранится и обрабатывается с соблюдением требований российского законодательства о персональных данных.

8. Обращения, поступившие через сайт, обобщаются и представляются руководству Министерства для информации. На наиболее часто задаваемые вопросы периодически публикуются ответы в разделах «для жителей» и «для специалистов»

Что такое 76% от 39?

Что составляет 76 процентов от 39? Сколько 76% от 39?

Результаты поблизости

76% от	Результат
39,00	29,6400
39,01	29,6476
39,02	29. 6552
39,03	29,6628
39,04	29,6704
39,05	29,6780
39,06	29,6856
39,07	29,6932
39,08	29.7008
39.09	29,7084
39,10	29,7160
39,11	29,7236
39.12	29,7312
39,13	29,7388
39,14	29,7464
39,15	29,7540
39,16	29,7616
39,17	29,7692
39,18	29,7768
39,19	29,7844
39,20	29,7920
39,21	29.7996
39,22	29.8072
39,23	29,8148
39,24	29,8224
39,25	29,8300

76% от	Результат
39,26	29,8376
39,27	29,8452
39. 28	29,8528
39,29	29,8604
39,30	29,8680
39,31	29,8756
39,32	29,8832
39,33	29,8908
39,34	29,8984
39,35	29,9060
39,36	29,9136
39,37	29.9212
39,38	29,9288
39,39	29,9364
39,40	29,9440
39,41	29,9516
39,42	29,9592
39,43	29,9668
39,44	29,9744
39,45	29,9820
39,46	29,9896
39.47	29,9972
39,48	30,0048
39,49	30,0124
39,50	30,0200
39,51	30,0276

76% от	Результат
39,52	30,0352
39,53	30. 0428
39,54	30,0504
39,55	30,0580
39,56	30,0656
39,57	30,0732
39,58	30,0808
39,59	30,0884
39,60	30,0960
39,61	30,1036
39,62	30,1112
39.63	30,1188
39,64	30,1264
39,65	30,1340
39,66	30,1416
39,67	30,1492
39,68	30,1568
39,69	30,1644
39,70	30,1720
39,71	30,1796
39,72	30.1872
39,73	30,1948
39,74	30,2024
39,75	30,2100
39,76	30,2176
39,77	30,2252

76% от	Результат
39,78	30,2328
39. 79	30,2404
39,80	30,2480
39,81	30,2556
39,82	30,2632
39,83	30,2708
39,84	30,2784
39,85	30,2860
39,86	30,2936
39,87	30,3012
39,88	30.3088
39,89	30,3164
39,90	30,3240
39,91	30,3316
39,92	30,3392
39,93	30,3468
39,94	30,3544
39,95	30,3620
39,96	30,3696
39,97	30,3772
39.98	30,3848
39,99	30,3924
40,00	30,4000

1127 Промышленный бункерный шкаф — цельносварная сталь 14 калибра

Описание

Промышленный шкаф для мусора 1127 — это шкаф для мусора шириной 39 дюймов со съемными контейнерами, который идеально подходит для ваших нужд хранения. Эти сверхмощные промышленные шкафы идеально подходят как для вашего склада, так и для производственного объекта.Наши сверхпрочные сварные шкафы калибра 14 являются самыми прочными шкафами для мусорных баков, которые мы производим. Вы найдете шкафы для хранения мусорных ведер Lyon в таких местах, как сервисные центры автосалонов или на полу механических цехов. Поскольку мы спроектировали их так, чтобы в них поместилось так много вещей, использование этих прочных шкафов для мусора безгранично. Если вам нужен прочный шкаф, не соглашайтесь ни на что меньшее, чем на Lyon.

Конструируем цельносварной шкаф мусорный промышленный 1127 из стали марки 14. Стальные двери для тяжелых условий эксплуатации оснащены петлями по всей длине, приваренными к каждой двери.У каждой двери также есть заклинание из твердой композиции. Петли и ролики позволят легко открывать и закрывать двери, а также помогают поддерживать выравнивание двери. Двери также оснащены надежной 3-точечной системой запирания. Эта система запирания включает в себя как стержень защелки 3/8 дюйма, так и пластину защелки 3/16 дюйма. Это поможет обеспечить надежное закрытие дверей. Прочная литая алюминиевая ручка также имеет засов толщиной 3/8 дюйма. Добавьте свой собственный замок, чтобы закрепить эти сверхпрочные сварные стальные шкафы 14-го калибра.

Lyon приваривает ножки высотой 4 дюйма к основанию каждого сверхпрочного стального шкафа. Это создает основу для вилочного погрузчика под промышленным шкафом для мусора 1127. Поскольку наши сверхмощные стальные шкафы для хранения много весят, это позволит вам легко перемещать их по вашему складу или объекту. 4-дюймовая основа обеспечивает дополнительное пространство для ног под прочным сварным стальным шкафом, когда двери открыты. Это также поможет поднять предметы на нижней полке, чтобы вам не приходилось тянуться так далеко, чтобы их схватить.

Регулируемые полки шкафа

Промышленный шкаф для мусора 1127 с 4 прочными стальными полками. Эти полки предлагают полезную нагрузку 1450 фунтов на полку. Полки Lyon могут вместить самые тяжелые предметы. Храните тяжелое оборудование, такое как двигатели и насосы, а также другие тяжелые инструменты. Полки можно быстро закрепить болтами в сварных пазах. Вы также можете легко переставить полки по центру на 3 дюйма. Каждая дверь имеет 3 регулируемые полки. Они регулируются по центру 5-1 / 2 дюйма.Дверные полки могут выдерживать до 75 фунтов. Регулируемые полки шкафа позволяют легко менять место хранения, когда ваши потребности меняются.

Съемные пластиковые контейнеры с опрокидыванием

Промышленный ящик для мусора 1127 также оснащен 12 пластиковыми наклонными контейнерами. Наша уникальная откидная корзина откидывается вперед, обеспечивая полный доступ к содержимому. Этот шкаф для хранения мусорных ведер с полками имеет откидные корзины на обеих дверцах. Съемные ящики легко прикрепляются к дверям и снимаются с них. Размер каждого наклонного бункера составляет 15 дюймов (ширина) x 5 дюймов (глубина) x 5-1 / 2 дюйма (высота).Пластиковый откидной контейнер устойчив к коррозии и не пропускает большинство растворителей. Каждая маленькая корзина имеет вес 40 фунтов. Вы можете еще больше увеличить вместимость ваших шкафов для гаек и болтов, добавив разделители для ящиков. В ящиках можно разместить до 3-х разделителей, чтобы разделить ящик на 4 отделения. Пластиковые ящики отлично подходят для хранения мелких деталей или оборудования, например гаек и болтов.

Lyon предлагает промышленный шкаф для мусора 1127 с порошковым покрытием Dove Grey.Также доступны варианты Putty, Wedgewood Blue и Vulcan Black. Покрытие порошковой краской поможет защитить ваши промышленные металлические шкафы для хранения от повседневного использования. Мы производим наши промышленные шкафы для хранения в США. Они также имеют сертификат GREENGUARD. Лион отправляет эти промышленные металлические шкафы в собранном виде. Все, что вам нужно сделать, это поставить полки и ящики там, где вы хотите, и вы готовы приступить к работе.

Посмотреть больше Промышленные шкафы для хранения со съемными ящиками от Lyon

---

Только вошедшие в систему клиенты, которые приобрели этот продукт, могут оставлять отзывы.

IJMS | Бесплатный полнотекстовый | Сахарный диабет, митохондриальная дисфункция и Ca2 + -зависимая переходная проницаемость пор

3.1. Митохондриальный Ca

²⁺ Транспорт при диабете Ca ²⁺ — универсальный регулятор многих внутриклеточных процессов. Появление Ca ²⁺ в цитозоле β-клеток поджелудочной железы является одним из важных этапов механизма секреции инсулина и регуляции метаболизма глюкозы у человека и животных [147].С другой стороны, более высокий уровень внутриклеточного Ca ²⁺ был обнаружен в первичных адипоцитах, гепатоцитах и ​​кардиомиоцитах, выделенных от тучных людей с инсулинорезистентностью, а также от животных с диабетом [148, 149, 150]. В связи с этим поддержание низкой концентрации Ca ²⁺ внутри клеток является важной функцией ряда структур, включая митохондрии. Активация митохондриального захвата Ca ²⁺ происходит при достаточно высокой концентрации ионов в цитозоле. Митохондрии обладают способностью быстро переносить и хранить высокие концентрации Ca ²⁺ в матриксе, что чрезвычайно важно для регуляции гомеостаза кальция в стрессовых условиях. Митохондриальный матрикс Ca ²⁺ регулирует довольно широкий спектр белков цикла трикарбоновых кислот (в частности, пируватдегидрогеназу, цитратдегидрогеназу и α-кетоглутаратдегидрогеназу), комплексы дыхательной цепи, способствующие поддержанию энергетического метаболизма клеток, и Генерация АТФ.Следует также отметить, что чрезмерное накопление Ca ²⁺ в митохондриях приводит к открытию поры MPT во внутренней мембране и инициации гибели клеток [84,151]. Ca ²⁺ попадает в митохондрии через потенциал-зависимый анион. канал (VDAC), расположенный на внешней мембране митохондрий. VDAC является одним из компонентов контактов MAM (митохондриально-ассоциированная мембрана), который позволяет Ca ²⁺ , высвобождаемый из эндоплазматического ретикулума, немедленно перенаправляться через рецепторы IP ₃ в митохондрии. Основным компонентом, ответственным за обработку митохондриального Ca ²⁺ , является унипортер Ca ²⁺ внутренней митохондриальной мембраны. Унипортер имеет удивительно высокое сродство к Ca ²⁺ , поскольку другие двухвалентные катионы транспортируются внутри митохондрий намного медленнее и, кроме того, ингибируют поглощение Ca ²⁺ . Ингибируется поликатионным красителем рутениевым красным и его аналогами. В настоящее время признано, что митохондриальный унипортер кальция представляет собой многокомпонентную систему — поровый канал образован интегральными мембранными белками MCU (есть также неактивный паралог MCU — MCUb), захват Ca ²⁺ регулируется MICU (MICU1–3. ) воротные белки, а также регуляторные белки EMRE и MCUR1.Важно отметить, что уровень этих белков варьируется в разных тканях, а соотношение регуляторных и канальных субъединиц определяет способность митохондрий конкретной ткани поглощать ионы кальция. Наряду с митохондриальным унипортером, другие структуры рассматриваются как возможные механизмы захвата Ca ²⁺ : быстрый режим захвата или RaM, митохондриальный рианодиновый рецептор и Ca ²⁺ / H ⁺ обменник Letm1. Однако их вклад в митохондриальный захват Ca ²⁺ не так значителен по сравнению с унипортером Ca ²⁺ .Структуры, ответственные за высвобождение Ca ²⁺ из митохондрий, включают обмены Na ⁺ / Ca ²⁺ и H ⁺ / Ca ²⁺ . Предполагается, что эти системы функционируют в разных тканях: обмен Na ⁺ / Ca ²⁺ происходит в возбудимых тканях, а обмен H ⁺ / Ca ²⁺ происходит в невозбудимых тканях. Было показано, что это системы медленного высвобождения Ca ²⁺ из митохондрий, скорость переноса ионов через них намного ниже скорости входа Ca ²⁺ через унипортер Ca ²⁺ .Носитель, ответственный за обмен Na ⁺ / Ca ²⁺ , является антипортером внутренней митохондриальной мембраны, способным высвобождать Ca ²⁺ в обмен на Na ⁺ или Li ⁺ (NCLX — Na ^{). +} / Li ⁺ / Ca ²⁺ обменник). Предполагается, что Letm1 функционирует как обменник Ca ²⁺ / 2H ⁺ . В дополнение к этим системам медленного высвобождения Ca ²⁺ из митохондрий, резкое быстрое высвобождение митохондрий из Ca ²⁺ происходит за счет открытия неспецифических Ca ²⁺ -зависимых митохондриальных пор.Баланс между входом и высвобождением кальция из митохондрий отвечает за поддержание внутриклеточного гомеостаза Ca ²⁺ в нормальных и патологических условиях. Более подробно о митохондриальных транспортных системах Ca ²⁺ можно прочитать в обзорах [84,133,151,152]. Показано, что внутримитохондриальный Ca ²⁺ участвует в регуляции секреции инсулина β-клетками поджелудочной железы в нормальных условиях [147]. Поступление глюкозы в β-клетки приводит к накоплению Ca ²⁺ в митохондриях, увеличению концентрации АТФ в клетках и секреции инсулина.Действительно, мыши с нокаутом MCU обнаруживают ингибирование первой фазы секреции инсулина [153]. Также следует отметить, что глюколипотоксичность связана с подавлением транспорта Ca ²⁺ в митохондриях β-клеток и повышением уровня АТФ в цитозоле. Однако экспрессия MCU и NCLX не изменилась. Авторы предположили, что нарушение регуляции транспорта Ca ²⁺ в митохондриях β-клеток при глюколипотоксичности связано с изменением ультраструктуры органелл [154].В то же время пальмитиновая кислота увеличивала экспрессию белка MCU в клональных β-клетках мыши MIN6 в условиях нормальной глюкозы, но не среды с высоким содержанием глюкозы. Авторы предположили, что высокий уровень глюкозы ослабляет компенсаторный механизм с участием MCU в цитотоксичности, вызванной пальмитатом, и вызывает дополнительные серьезные последствия, связанные с перегрузкой Ca ²⁺ липотоксичности β-клеток [155]. Одно из патологических изменений β-клеток, связанных с диабетом. клеток является развитием стресса ER [156]. Наряду с подавлением транспорта Ca ²⁺ в митохондриях, это вызывает увеличение свободного Ca ²⁺ в цитоплазме, что, в свою очередь, может привести к дисбалансу различных сигнальных путей, зависящих от Ca ²⁺ . .Кроме того, индукция митохондриальной дисфункции и стресса ЭР в поджелудочной железе может в конечном итоге привести к гибели β-клеток и увеличению частоты диабетических осложнений. Данные о функционировании унипортера кальция в тканях при диабете весьма противоречивы (Рисунок 2). . Снижение скорости транспорта Ca ²⁺ наблюдалось в митохондриях сердца у крыс с индуцированным стрептозотоцином СД1 и у мышей ob / ob с СД2, а также в клетках поджелудочной железы [154, 157, 158, 159]. Митохондрии сердца также показали снижение экспрессии MCU на мышиной модели индуцированного стрептозотоцином СД1, что сопровождалось подавлением митохондриального захвата Ca ²⁺ [160].Ожидается, что повышенный уровень доминантно-отрицательной субъединицы MCUb унипортера также вносит вклад в эту картину. Действительно, нормализация уровня MCU в сердце восстановила обработку митохондрий Ca ²⁺ , повысила активность пируватдегидрогеназы и перепрограммировала метаболизм в сторону нормального окисления глюкозы [160, 161]. Кроме того, сердце мышей db / db показало сниженную экспрессию белка MiCU1 периферической мембраны, действующего как привратник. Восстановление MiCU1 в диабетических сердцах значительно ингибировало развитие диабетической кардиомиопатии за счет увеличения митохондриального захвата Ca ²⁺ и последующей активации антиоксидантной системы [162].С другой стороны, есть данные о том, что развитие диабета сопровождается активацией унипортера кальция. Действительно, еще в 70-х годах было показано, что индукция аллоксанового диабета стимулирует поступление Ca ²⁺ в митохондрии печени [163]. Недавно мы также продемонстрировали, что через две недели после введения стрептозотоцина крысам Sprague-Dawley скорость поглощения Ca ²⁺ митохондриями печени значительно увеличилась. Анализ показал, что увеличение скорости транспорта Ca ²⁺ было связано со снижением экспрессии доминантно-отрицательной субъединицы MCUb унипортера [41].Митохондрии жировой ткани также демонстрируют увеличение обработки Ca ²⁺ . Было показано, что митохондриальный захват Ca ²⁺ увеличился, а компоненты MCU (MCU и MICU1) были активированы в инсулинорезистентных адипоцитах. Аналогичные результаты наблюдались у мышей (db / db и ob / ob) и висцеральной жировой ткани человека во время прогрессирования ожирения и диабета [164]. Развитие сахарного диабета изменяет не только активность и экспрессию унипортера Ca ²⁺ . , но также и NCLX.Действительно, эндотелий крыс с СД1, индуцированным стрептозотоцином, продемонстрировал увеличение экспрессии NCLX. В этом случае подавление экспрессии NCLX увеличивает генерацию ROS и активацию воспаления NLRP3 [165]. Инсулинорезистентность и T2DM вызывают нарушение структуры контактов MAM [157, 166, 167, 168]. Противодиабетические препараты метформин и розиглитазон восстанавливают структуру контактов МАМ у диабетических животных [168]. Следует отметить, что сахарный диабет связан с избыточной экспрессией VDAC1 в определенных тканях (β-клетках поджелудочной железы, эндотелиальных клетках сосудов) [169, 170, 171]. Параллельно в митохондриях накапливается повышенное количество Ca ²⁺ , что в конечном итоге приводит к активации апоптоза. Ингибирование сверхэкспрессии VDAC1 приводит к подавлению апоптоза в эндотелиальных клетках и улучшает секрецию инсулина островками [170, 171].

Противоречия, наблюдаемые при изучении митохондриального транспорта Ca ²⁺ при сахарном диабете, трудно объяснить. Не исключено, что развитие диабета проявляет тканеспецифичность. Как упоминалось выше, клетки печени по-разному реагируют на диабет.В частности, этот орган демонстрирует сверхэкспрессию PGC1-1α и стимуляцию биогенеза. Стоит отметить, что аналогичные адаптивные изменения могут происходить в других тканях на ранних стадиях диабета. Несколько исследований по индукции диабета показали увеличение концентрации Ca ²⁺ в цитозоле и митохондриях. В связи с этим можно предположить, что в этих условиях наблюдаемая активация систем захвата и высвобождения Ca ²⁺ из митохондрий приведет к рециклизации Ca ²⁺ через митохондриальную мембрану (бесполезный цикл) и уменьшению ΔΨ. Подобно экспрессии UCP, эта адаптивная реакция подавляет окислительный стресс, по крайней мере, на начальных этапах развития болезни. Ожидается, что такой бесполезный цикл, вызывающий небольшую деполяризацию, будет стимулировать митофагию. Наряду с усилением биогенеза это вызовет обновление митохондриальной популяции в клетке. Между тем, чрезмерное накопление Ca ²⁺ в митохондриях, несомненно, вызовет открытие поры MPT и инициацию гибели клеток.

3.2. Пора перехода митохондриальной проницаемости

Известно, что чрезмерное накопление Ca ²⁺ в матриксе митохондрий приводит к резкому увеличению неспецифической проницаемости внутренней митохондриальной мембраны (называемой порой перехода митохондриальной проницаемости (MPT)) для различных пор. ионы и гидрофильные соединения с молекулярной массой до 1,5 кДа. Это приводит к набуханию митохондрий, уравновешиванию ионных градиентов на внутренней мембране, снижению потенциала митохондриальной мембраны и нарушению синтеза АТФ. Конечным следствием открытия поры MPT является гибель клеток. Ca ²⁺ -зависимая проницаемость внутренней митохондриальной мембраны является одним из ключевых элементов процесса гибели клеток во время гипоксии и последующей реоксигенации. Более того, за годы накопились убедительные доказательства, подтверждающие важную роль открытия пор MPT ​​в развитии сердечно-сосудистых заболеваний, нейродегенеративных процессов, вирусных заболеваний, мышечных дистрофий и т. Д. [84, 172, 173, 174, 175].К середине 90-х годов прошлого века большинство модуляторов поры MPT были выяснены. Об этом подробно рассказывается в обзоре Зоратти и Сабо. Ca ²⁺ , возможно, является основным активатором пор. Помимо Ca ²⁺ , неорганический фосфат (и полифосфаты), SH-окислители, окислительный стресс, разобщители, уменьшение содержания митохондриальных нуклеотидов аденина и другие факторы стимулируют открытие пор MPT. Ингибиторами митохондриальной поры являются циклоспорины (наиболее эффективен циклоспорин А), адениновые нуклеотиды, SH-восстановители, восстановленные пиридиновые нуклеотиды и т. Д.[175]. Несмотря на значительный прогресс в изучении индукции и регуляции пор MPT, его молекулярная структура и белковый состав все еще обсуждаются (Рисунок 3). Анализ литературных данных позволяет предположить, что пора MPT представляет собой неселективный мегаканал с высокой проводимостью, состоящий из белков внутренней и внешней мембран митохондрий. Однако на сегодняшний день циклофилин D является единственным точно установленным компонентом этой структуры; это фармакологическая мишень циклоспорина А и его аналогов, которые могут специфически блокировать открытие пор [176, 177].Циклофилин D считается регуляторным белком, который в присутствии Ca ²⁺ стимулирует перестройку белков, ответственных за формирование порового канала MPT. Нокаут циклофилина D или его связывание с ингибитором приводит к значительному увеличению пороговой концентрации Ca ²⁺ , необходимой для открытия пор. В 2015 г. с помощью скрининга на основе RNAi было высказано предположение, что наряду с циклофилином D важным регуляторным компонентом MPT является спастическая параплегия 7 (SPG7) [176]. Однако недавно было показано, что SPG7 не является основным компонентом MPT, а вместо этого регулирует активность путем снижения базальных митохондриальных уровней Ca ²⁺ посредством регуляции сборки унипортеров MCUR1 и Ca ²⁺ [178]. Модели MPT были предложены в течение последних 40 лет. Действительно, только циклофилин D является неотъемлемым компонентом поры. В этом случае белки внешней мембраны и межмембранного пространства (VDAC, TSPO, HK и CrK) являются вспомогательными в сборке порового комплекса в интактных митохондриях [179].Однако вопрос о том, какой белок является основным поровым компонентом внутренней митохондриальной мембраны, до сих пор не решен. До середины 2000-х гг. Преобладала гипотеза, что такой поровый белок внутренней митохондрии, образующий канал, является транслокатором адениновых нуклеотидов. Это предположение было связано с тем, что ингибиторы транслокаторов адениновых нуклеотидов, атрактилозид и карбоксиатрактилоид, стимулировали открытие пор, а бонгкрековая кислота проявляла ингибирующий эффект. Нуклеотиды аденина, переносимые транслокатором в нормальных условиях, также подавляли открытие пор [175].Кроме того, было показано, что ANT способен связываться с VDAC и гексокиназой, а также с циклофилином D, образуя каналы в липосомах, свойства которых напоминают MPT [180,181,182]. Однако открытие того, что открытие поры MPT также происходит в митохондриях ANT1 и ANT2 нулевых мышей, привело к отказу от этой модели [183]. После этого была рассмотрена идея фосфатного носителя как канального компонента поры MPT [184]. По данным последнего десятилетия, митохондриальная АТФ-синтаза считается основным кандидатом на роль каналообразующего компонента поры MPT, субъединицы которых и, в частности, OSCP, способны объединяться с циклофилином D, что, как и ожидалось, приводит к открытию пор [84, 172, 173, 174].Кроме того, было показано, что субъединица OSCP АТФ-синтазы содержит уникальный pH-чувствительный гистидин (h212), который оказывает значительное модулирующее действие на открытие поры MPT [185]. Было сделано несколько предположений относительно того, как АТФ-синтаза может формировать поровый канал MPT. Можно выделить две основные гипотезы: (1) «димер» и (2) «c-кольцо» [174]. Согласно первому, димеры АТФ-синтазы, но не мономеры, проводят токи при вставке в плоские липидные бислои, которые активируются Ca ²⁺ и окислителями и закрываются ADP / Mg ²⁺ (установленные десенсибилизаторы пор MPT) [186].Кроме того, было показано, что токи были сильно ослаблены у дрожжевых мутантов, у которых отсутствовали субъединицы e и g АТФ-синтазы, необходимые для образования димеров [187]. Действительно, образование каналов димерами АТФ-синтазы было показано на митохондриях эволюционно далеких видов (S. cerevisiae и D. Melanogaster), что делает эту гипотезу достаточно убедительной [187,188,189]. В то же время было обнаружено, что мономера АТФ-синтазы достаточно, а образование димера не требуется для активности пор MPT ​​[190].Согласно альтернативной гипотезе «c-кольца», c-субъединица АТФ-синтазы, локализованная во внутренней мембране органелл, может действовать как канальный компонент поры MPT [191, 192]. В этом случае предполагается, что Са ²⁺ и (или) АФК-индуцированная диссоциация сектора F1 АТФ-синтазы приводит к конформационным изменениям в с-кольце сектора Fo, что делает возможным образование поры MPT. канал. Однако эта гипотеза наталкивается на ряд противоречий. Ведь в этом случае процесс диссоциации должен быть быстрым и обратимым.Во-первых, должно происходить быстрое отделение сектора F1, а во-вторых, канал с-образного кольца должен быть опорожнен и гидратирован, что делает эту гипотезу маловероятной [174,193]. Более того, данные модельных экспериментов предполагают, что гипотетическая пора MPT на основе c-кольца будет иметь значительно более низкую проводимость, чем показанная для MPT [194]. Эти данные подтверждаются результатами измерений патч-кламп. Наконец, недавно было показано, что митохондрии мутантных клеток с нарушенными c-субъединицами АТФ-синтазы по-прежнему обнаруживают вызванное циклоспорином А Ca ²⁺ -индуцированное открытие пор MPT ​​и, более того, в некоторых случаях демонстрируют повышенную чувствительность к индукции этого процесса [195]. Последние данные снова возвращают нас к вопросу об ANT как структурном элементе поры MPT. Действительно, недавно было показано, что поры MPT в митохондриях с дефицитом c-субъединицы чувствительны к циклоспорину A, ADP и бонгкрековой кислоте [195]. Наконец, нокаут генов трех изоформ ANT (а не двух, как в 2005 г.) значительно повысил устойчивость митохондрий к индукции MPT, а кальциевая емкость органелл, тем не менее, не предотвратила этого [196]. Эти противоречия привели к появлению модели совместного участия ANT и АТФ-синтазы в открытии поры MPT.Предполагается, что в зависимости от пороговой концентрации Ca ²⁺ эти белки будут формировать каналы различных токов, которые обеспечивают разные режимы функционирования MPT [197] и способствуют как быстрому высвобождению Ca ²⁺ , так и метаболитов. и поддержание функционирования упомянутых выше бесполезных циклов. Следует также отметить, что поиск модуляторов MPT позволил создать условия, при которых митохондриальный Ca ²⁺ -зависимый набухание было нечувствительным к циклоспорину A. Этот тип проницаемости включает липидные поры, индуцированные насыщенными жирными кислотами и Ca ²⁺ . В наших предыдущих работах мы описали этот тип проницаемости митохондриальной мембраны достаточно подробно [84,198,199]. Мы обнаружили, что открытие этой поры происходит по механизму хемотропного фазового перехода в липидном бислое. Действительно, пальмитиновая кислота в присутствии Ca ²⁺ способна проникать как в естественные, так и в искусственные мембраны. Также описано физиологическое значение этой поры [200].Более подробно особенности образования и физиологическое значение липидной поры, нечувствительной к циклоспорину А, представлены в нашем предыдущем обзоре [84].

3,4. MPT-поры как мишень для лечения диабета

Проблема MPT-пор как мишени при лечении сахарного диабета довольно сложна. Согласно широкому спектру исследований, циклоспорин А и другие ингибиторы пор MPT ​​способствуют подавлению митохондриальной дисфункции и улучшают качество жизни животных [217, 219, 232]. Было показано, что введение высоких доз циклоспорина А вызывает ремиссию сахарного диабета 1 типа [240]. С другой стороны, тот же циклоспорин вызывает подавление митохондриального биогенеза в клетках печени [220]. У мышей с делецией циклофилина D наблюдается развитие гипергликемии, инсулинорезистентности и непереносимости глюкозы, хотя они и устойчивы к ожирению, вызванному диетой [241]. Однако следует отметить, что интерпретация in vivo эффектов циклоспорина А как ингибитора MPT не всегда может быть правильной.Циклоспорин A является хорошо известным иммунным супрессором, и его действие может быть связано не только с подавлением MPT, но также с влиянием на различные сигнальные пути у людей и животных. Синтетические и природные противодиабетические соединения оказывают двунаправленное действие на Открытие пор MPT. Примечательно, что метформин ингибирует открытие пор MPT ​​в митохондриях, усиливает биогенез и предотвращает гибель клеток [61, 242, 243]. Однако есть доказательства того, что метформин стимулирует МФТ в митохондриях печени крыс [244]. Класс тиазолидиндионов противодиабетических средств также демонстрирует аналогичное стимулирующее действие на поры MPT [245]. Более того, троглитазон усиливал индукцию пор MPT ​​в печени диабетических крыс Zucker (fa / fa) [246]. Натуральное полифенольное соединение лютеолин снижает смертность от заболеваний коронарной артерии, включая диабет [107]. Было показано, что он ингибирует открытие пор MPT ​​[247]. С другой стороны, растительный алкалоид берберин, используемый в традиционной китайской медицине и обладающий противодиабетическими свойствами [248], вызывает ингибирование митохондриального дыхания и снижение нагрузочной способности Ca ²⁺ за счет индукции перехода митохондриальной проницаемости [249]. .Все это говорит о том, что необходимо внимательно подходить к вопросу терапии сахарного диабета через модуляцию поровой активности МФТ.

Атлас одноклеточного транскриптома и ландшафт доступности хроматина показывают траектории дифференцировки в корне риса

Растительный материал и условия роста

Проростки O. sativa (Zh21) дикого типа использовали для экспериментов с scRNA-seq корня. Семена высевали на фильтровальную бумагу, пропитанную водой в чашках Петри.Через 5 дней при 30 ° C кончики корней проростков собирали для эксперимента scRNA-seq. Для промоторных репортерных линий Venus-N7 растения риса выращивали в камере для выращивания при 29 ° C в течение долгих дней (16 часов света / 8 часов темноты).

Конструкции

Олигонуклеотидные праймеры приведены в дополнительных данных 8. Промоторные репортеры Venus-N7 были получены методом молекулярного клонирования. Вкратце, геномные ДНК проростков дикого типа экстрагировали с помощью набора EasyPure Plant Genomic DNA (Transgen, Cat No./ ID: EE111-02). Регуляторные фрагменты, включая промотор и 3’-нижнюю последовательность, амплифицировали с помощью ПЦР и клонировали в JW1696 с использованием набора для одностадийного клонирования ClonExpress II (Vazyme Biotech, каталожный номер / ID: C112). Для синтеза зонда для гибридизации in situ кодирующие области генов-кандидатов амплифицировали с помощью ПЦР и клонировали в LH95.

Трансформация растений

Репортерные плазмиды Venus-N7 были введены в штамм EHA105 Agrobacterium tumefaciens . Трансформацию риса проводили, как описано ранее ⁷³ .Вкратце, стерилизованные семена проращивали на среде N6D и инкубировали при 29,5 ° C в течение 3-4 недель. Каллусы пересевали на свежую среду N6D при 29,5 ° C в течение 3 дней. После инфицирования суспензиями клеток A. tumefaciens каллусы промывали стерильной водой, переносили в среду N6D-S и инкубировали при 29,5 ° C. Через 3-4 недели устойчивые каллусы переносили в среду MS-NK для регенерации побегов.

Идентификация мутанта корня риса

Мутант GATA6 CRISPR-Cas9 риса (KO # 1) был создан Центром редактирования генома Biogle ⁷⁴ .Мутант GATA6 CRISPR-Cas9 (KO # 2) был создан W.-H.L. лаборатория (неопубликованные данные). Гомозиготный мутант OsGATA6 был идентифицирован генотипированием на основе ПЦР и подтвержден секвенированием продуктов ПЦР по Сэнгеру. Праймеры для генотипирования были перечислены в дополнительных данных 8.

Приготовление образцов корня для scRNA-seq

Единичные клетки корня риса получали, как описано ранее, с модификациями ¹⁹ . Вкратце, области кончиков (длиной 1,0 см от кончика корня) корешков риса собирали и переваривали в растворе фермента, не содержащего РНКаз (4% целлюлазы R10, 1.5% мацерозима R10, 0,4 M маннита, 0,1 M 4-морфолинэтансульфоновой кислоты, 10 мМ KCl, 10 мМ CaCl ₂ и 0,1% BSA) в течение 2 часов при комнатной температуре. Протопласты фильтровали 3–4 раза через сетчатые фильтры для клеток (диаметром 40 мкм, Falcon, каталожный номер / ID: 352340), концентрировали и промывали 3–4 раза 8% маннитом при комнатной температуре. Жизнеспособность протопластов определяли окрашиванием трипановым синим. Отношение жизнеспособных клеток к общему количеству клеток для каждого образца было> 85%. Концентрацию протопластов подсчитывали гемоцитометром и, наконец, доводили до 1500–2000 клеток / мкл.

Конструирование библиотеки scRNA-seq и секвенирование

Вкратце, одноклеточные суспензии корневого корешка загружали в Chromium Single Cell Instrument (10 × Genomics, Pleasanton, CA) для создания одноклеточных GEM. Библиотека scRNA-seq была создана с помощью набора Chromium Single Cell 3 ‘Gel Bead and Library Kit v3 (10 × Genomics, каталожный номер / ID: P / N 1000075 и 1000073) в соответствии с руководством пользователя (Chromium Single Cell 3ʹ Reagent Kits v3, CG000183 Ред. A). Качественный анализ библиотек ДНК проводился с помощью Agilent 2100 Bioanalyzer.Библиотеки секвенировали секвенатором Illumina NovaSeq (Genergy Biotechnology Shanghai Co., Ltd) с использованием двух наборов с парными концами по 150 пар оснований. Необработанный набор данных scRNA-seq состоял из 28 п.н. Read1, 150 п.н. Read2 и 8 п.н. чтения индекса i7.

Эксперимент ATAC-seq

ATAC-seq были выполнены в соответствии с опубликованным протоколом ⁷⁵ . Вкратце, ткани MZ и EZ собирали и разрезали на мелкие кусочки в буфере для лизиса. Суспензию фильтровали и ресуспендировали в буфере для лизиса. Неочищенные ядра окрашивали 4,6-диамидино-2-фенилиндолом и загружали в проточный цитометр (BD biosciences, FACSAria III).Ядра сортировали и один раз промывали буфером Tris-Mg. Очищенные ядра метили транспозомой Tn5 (Vazyme Biotech, каталожный номер / ID: 501-02). Полученные ДНК очищали с использованием набора для очистки ПЦР Qiagen MinElute (Qiagen, каталожный номер / ID: 28004) и амплифицировали с использованием 2х смеси NEBNext High fidelity PCR (New England Biolabs, каталожный номер / ID: M0541L). Амплифицированные библиотеки очищали с помощью гранул AMPure (Beckman Coulter, каталожный номер / ID: A63880) и секвенировали на секвенаторе Illumina NovaSeq по стратегии PE150.Были выполнены две биологические повторы.

Анализы гибридизации in situ

Для синтеза зонда транскрипцию in vitro проводили с РНК-полимеразой Т3 или Т7 (ThermoFisher, каталожный номер / ID: EP0101 / EP0111), в которые добавляли линеаризованные векторы в качестве матриц. Гибридизацию РНК in situ проводили, как описано ⁷⁶ . Вкратце, ткани корня собирали и фиксировали формальдегидом. Залитые в парафин образцы разделяли (7-9 мкм) с помощью скользящего микротома Lecia (RM2265).Срезы депарафинизировали, расщепляли протеиназой K (Roche, каталожный номер / ID: 03115828001), дегидратировали градиентным этанолом, гибридизовали с соответствующими зондами и инкубировали с Fab-фрагментами анти-дигоксигенин-AP (Roche, каталожный номер / ID: 11093274910). ). После промывки сигналы детектировали с помощью маточного раствора NBT / BCIP (Roche, каталожный номер / ID: 11681451001).,

Микроскопия

Радиклы окрашивали FM4-64 (1,0 мкг / мл). Сигнал флуоресценции наблюдали под прямым конфокальным микроскопом Zeiss 880.Для возбуждения использовался лазер с длиной волны 514 нм. Для Венеры были обнаружены длины волн испускаемого света от 519 до 573 нм; для FM4-64 эмиссия составляла 698–759 нм.

Предварительная обработка необработанных данных scRNA-seq

Необработанные файлы были проанализированы с помощью Cell Ranger 3. 0.1 (10x Genomics). Файлы аннотаций генома риса и GTF, исключающие геномы органелл, были загружены с веб-сайта базы данных проекта аннотаций риса (RAP-DB) (https://rapdb.dna.affrc.go.jp/index.html). Чтобы рассчитать процент митохондриальных генов в каждой клетке, митохондриальный геном был объединен с ядерным геномом.Для создания ссылки использовалась функция «cellranger mkref» с аргументами «—genome, —fasta и —genes». «Счетчик Cellranger» с аргументами «—id, —transcriptome, —fastqs, —sample и —r2-length = 98» был выполнен для генерации подсчета генов одной клетки. Более 90% считываний во всех образцах были сопоставлены с эталонным геномом Nipponbare (IRGSP 1.0) с помощью выравнивателя STAR (v.2.5.1b) ⁷⁷ . Отношение количества считываний фракций в ячейках к общему количеству считываний для каждого образца было> 77%.Подробные отчеты Cell Ranger были приведены в дополнительных данных 1. Матрицы ген-клетки (названные «filter_gene_bc_matrices» по 10 × Genomics) использовались как обработанные необработанные данные для дальнейшего анализа.

Обнаружение дублетов

Мы идентифицировали дублеты с помощью DoubletFinder (v.2.0.2) ⁷⁸ . Три входных параметра, а именно количество ожидаемых реальных дублетов (nExp), количество искусственных дублетов (pN) и размер окрестности (pK), были определены следующим образом: Для nExp стандартный конвейер обработки Сёра выполнялся до этап кластеризации с низким разрешением числа кластеров ячеек (разрешение = 0.5). Кластерные метки клеток использовали в качестве данных «аннотаций» для моделирования доли гомотипических дублетов. Коэффициент дублета оценивался по N /100000 ( N , номера ячеек). Значение nExp корректировали в соответствии с долей гомотипических дублетов и соотношением дублетов. pN, коэффициент для определения количества сгенерированных искусственных дублетов на основе общего количества клеток, был установлен на 0,25. Мы обнаружили, что увеличение значения pN не повлияло на результаты DoubletFinder. Чтобы определить оптимальное значение pK, предварительно обработанные данные Сера были загружены в функцию «paramSweep_v3 (PCs = 1:15)», а затем переданы в «summarizeSweep» и «find». pK ». В качестве оптимального параметра pK был выбран единый и легко различимый максимум значения pK.

Дублеты были окончательно предсказаны с помощью предварительно обработанных данных Сера с использованием функции «doubletFinder_V3» и определенных значений nExp, pN и pK, как определено выше. Была вычислена доля искусственных ближайших соседей (pANN) для каждой ячейки. Порог дублета pANN был определен в соответствии с nExp для генерации окончательных предсказаний дублета. Полученные клетки, помеченные как синглеты, использовали для последующих анализов.

Интеграция, кластеризация и аннотации данных

Последующий анализ в основном выполнялся с помощью пакета Seurat (v.3.1.1), как описано ранее ¹⁹ . Вкратце, мы выполнили процедуры контроля качества, отфильтровав некачественные клетки и гены и нормализовав данные с помощью функции «NormalizeData» (метод LogNormalize, масштабный коэффициент 10 000). Затем мы обнаружили вариабельные гены с помощью функции «FindVariableGenes» (метод vst, 2000 функций), масштабировали данные с помощью функции «ScaleData», выполнили анализ PCA с помощью функции «RunPCA» (100 основных компонентов), определили статистическую значимость оценок PCA с помощью «JackStraw» функция, построил график SNN, сгруппировал ячейки на основе Лувена («FindNeighbors» и «FindClusters») и визуализировал данные с помощью алгоритмов нелинейного размерного уменьшения («RunTSNE» и «RunUMAP»).

Клетки и гены низкого качества были отфильтрованы в соответствии со следующими четырьмя критериями: (1) мы рассматривали только клетки с количеством экспрессированных генов от 500 до 6000; (2) мы проигнорировали клетки с уникальными молекулярными идентификаторами (UMI) выше 40 000 или ниже 500; (3) мы отфильтровали гены, которые экспрессировались менее чем в трех клетках; (4) процент митохондриальных UMI не превышал 10%. Мы скорректировали пакетные эффекты между семплами с помощью функции «RunHarmony» ²⁷ .Полученные интегрированные данные были сгруппированы и визуализированы на основе уменьшения размерности гармонии.

Чтобы смягчить влияние гетерогенности клеточного цикла на кластеризацию клеток, оценка клеточного цикла каждой отдельной клетки была рассчитана с использованием функции «CellCycleScoring» с циклическими ортологическими генами Arabidopsis. Затем эти эффекты клеточного цикла были регрессированы функцией «ScaleData» с использованием «vars.to.regress».

Чтобы оценить влияние генов протопластинга на кластеризацию клеток, была рассчитана и нанесена на график пропорция генов протопласта, которая была идентифицирована лабораторией Qian (Дополнительные данные 2) ²⁶ .Доля генов протопласта в каждом кластере клеток была ниже 1%.

Гены, обогащенные кластером, вычисляли с помощью функции «FindAllMarkers» в Сёра с использованием следующих параметров: критерий суммы рангов Вилкоксона; более 1,5-кратная разница (logfc.threshold = 0,58) между двумя группами ячеек; проверить гены, чтобы минимальная фракция была не менее 0,1. Мы назначили кластеры клеток по результирующим обогащенным кластерами генам с известными функциями и паттерном экспрессии (дополнительные данные 2; дополнительные данные 3).Для идентификации кластер-специфичных маркерных генов применяли следующие параметры: log2-кратное изменение генов было> 0,25, а доля маркерных генов, экспрессируемых в клетках, среди всех других кластеров (PCT2) была <10%.

Вывод траекторий дифференциации

Для анализа псевдовременности Palantir (Рис. 2b – e; Рис. 3c, d, f; Дополнительный Рис. S3b, c) мы читаем слот необработанных данных объекта Seurat (кластеры 1, 4, и 9 для эпидермиса; кластеры 0, 3, 6 и 11 для наземных тканей) в Palantir (v.0.2.2) ³¹ . Процедуры предварительной обработки данных включали анализ главных компонентов, анализ карт распространения и условное исчисление MAGIC. Перед запуском Palantir была указана начальная ячейка, определенная на основе предыдущей и проверенной информации, а также соответствующая позиция координат на карте t -SNE. Терминальные состояния клеток определялись автоматически. Каждой ячейке вдоль псевдовремени и вероятности перехода к конечным состояниям был назначен Palantir. Тенденции экспрессии генов вдоль псевдодействия Palantir или различных линий были смоделированы на основе обобщенных аддитивных моделей, предоставленных Palantir.

Встраивание ForceAtlas2 и карта распространения были выполнены в SCANPY (рис. 3g; дополнительный рис. S3d, e). Вкратце, подмножество объекта Seurat (кластеры 0, 3, 6 и 11) было загружено в SCANPY (v. 1.4.5.1) ⁷⁹ . Мы выполнили последующий анализ согласно руководству пользователя: нормализация данных (метод scanpy.pp.normalize_per_cell, коэффициент масштабирования 10000), преобразование журнала (scanpy.pp.log1p), пакетная коррекция (scanpy.pp.combat), выбор вариабельного гена ( scanpy.pp.highly_variable_genes), масштабирование данных (scanpy.pp.regress_out), анализ главных компонентов (scanpy.pp.pca), вычисление графанда окрестности (sc.pp.neighbours) и визуализация с помощью ForceAtlas2 и Diffusion maps (sc.tl.diffmap, sc.pl.diffmap, sc. tl.draw_graph и sc.pl.draw_graph). Метке кластера каждой ячейки был присвоен номер кластера ее подкластера. Для анализа псевдовремени DPT использовалась та же стартовая ячейка в Palantir.

Анализ скорости РНК

Мы оценили скорость РНК с помощью пакета velocyto ³³ .Матрица экспрессии несплайсированных и сплайсированных мРНК в каждом образце была создана с помощью Velocyto CLI (v.0.17.17) в соответствии с руководством пользователя (velocyto run10x). Выходные файлы ткацких станков рисового корня №1 и №2 были объединены с помощью «ткацкого станка». Полученный объединенный файл ткацкого станка был прочитан в velocyto.R (v.0.6). Было извлечено количество клеток без сплайсинга и сплайсинга из кластера 0, 3, 6 и 11. Мы обнаружили, что считывания, которые уверенно отображаются на интронные области, были <1% у риса, что намного меньше 35% у человека.Нормализация данных и обнаружение вариабельных генов были выполнены для фильтрации генов с низкой вариабельностью. Полученные 5000 переменных генов были дополнительно отфильтрованы с использованием функции «filter.genes.by.cluster.expression» (emat: min.max.cluster. Average = 0,1; nmat: min.max.cluster. Average = 0,01). Последние 1459 генов использовали для оценки скорости РНК с помощью функции «gene.relative.velocity.estimates» (kCells = 20). Для построения скоростей отдельных клеток были экспортированы вложения UMAP в Сёра (рис. 3b).

GO анализ

Все дифференциально экспрессируемые гены, включая гены, обогащенные кластерами, генные модули, относящиеся к псевдовременному анализу, и связанные с генами дифференциальные пики со статистической значимостью были отправлены в AgriGO v2. 0 для анализа обогащения ГО ⁸⁰ . В качестве фона использовались полные наборы генов. Были представлены 20 основных терминов GO с -log ₁₀ значений FDR (Дополнительные данные 4; Дополнительные данные 6).

Анализ данных ATAC-seq

Анализ данных ATAC-seq проводился согласно опубликованным методам с некоторыми модификациями ^75,81,82 . Вкратце, необработанные чтения секвенирования сначала были обрезаны с помощью fastp (v.0.20.0) с последовательностью адаптера «CTGTCTCTTATACACATCT» для получения чистых файлов fastq.Чистые считывания были сопоставлены с эталонным геномом Nipponbare (IRGSP 1.0) с Bowtie2 (v.2.3.4.3) ⁸³ . Используя Samtools (v.1.9), файлы SAM были преобразованы в индексированные файлы BAM ⁸⁴ . Дублированные чтения были отмечены и удалены с помощью sambamba (v.0.6.7) и bedtools (v.2.25.0) ⁸⁵ . Биологические реплики были объединены Samtools. Для визуализации и сравнительного анализа отдельные или объединенные наборы данных были преобразованы в важные форматы с помощью bamCoverage, предоставляемого deepTools (v. 3.1.2) с размером ячейки 10 бит / с и нормализованной по ячейке на миллион отображенных чтений (BPM). Полученные важные файлы были загружены в Integrative Genomics Viewer (IGV, v.2.4.14) для визуализации. Узкие пики были обнаружены программой «callpeak» в MACS2 (v.2.1.2) с размером генома 3.6e8. Дифференциально доступные области были проанализированы с помощью DiffBind (v.2.14.0) с параметром minOverlap = 1 ⁸⁶ . Для аннотации пиков объект TxDb риса, содержащий аннотации транскриптов, был создан с помощью «makeTxDbFromGFF», предоставленного GenomicFeatures (v.1.38.0) ⁸⁷ . Дифференциальные пики аннотировали идентичностями генов с помощью ChIPseeker (v.1.22.0) ⁸⁸ . Значительно доступные гены были идентифицированы со следующими отсечками: кратное изменение средней доступной разницы ≥ 1,5 (log ₂ FC ≥ 0,58) и FDR <0,05.

Чтобы идентифицировать мотивы связывания обогащенных факторов транскрипции в пределах доступных пиков, значительно доступные области сканировали с использованием функции findMotifsGenome. pl, предоставленной HOMER (v.4.10) с параметром «-установить заводы» ⁴⁶ .

Для интегративного анализа ATAC-seq и scRNA-seq была извлечена и определена доступность маркерных генов, специфичных для кластера клеток. Для каждого кластера клеток была рассчитана корреляция между доступностью (пик ATAC Log ₂ FC) и уровнем экспрессии (log ₂ FC, специфичный для кластера scRNA) каждого гена и визуализирована на графике вулкана (дополнительный рисунок S6). Гены с положительными значениями доступности и уровня экспрессии обозначают положительную корреляцию (красный).И наоборот, это указывает на отрицательную корреляцию (синий). Затем рассчитывали количество и долю кластер-специфичных генов с положительной или отрицательной корреляцией (рис. 4f).

Идентификация однозначных ортологов

Для идентификации ортологичных генов белковые последовательности риса и арабидопсиса были загружены с сайтов TAIR и Phytozome. Алгоритм OrthoMCL был использован для кластеризации аналогичных белковых последовательностей между рисом и арабидопсисом с помощью стратегии «все против всех» с BLASTP (значение е: 1-е5). Результаты кластеризации можно сгруппировать в три подкатегории: ортологи «один к одному», группы «один ко многим» и группы «многие ко многим». Поскольку дублированные гены обычно подвергаются неофункционализации, группы «один ко многим» или «многие ко многим» не могут считаться функционально эквивалентными. По этой причине для межвидового анализа scRNA-seq затем использовали только ортологи один к одному. Список генов для ортологов один-к-одному приведен в дополнительных данных 7.

Сравнение данных межвидовой scRNA-seq

Для межвидового анализа были приняты две независимые стратегии.Во-первых, учитывая тот факт, что атласы клеток риса и арабидопсиса хорошо аннотированы, мы рассчитали межвидовую парную корреляцию между типами клеток, используя уравнение «индекса специфичности гена» (рис. 5a). Этот метод был использован для анализа консервативных типов клеток черепах, ящериц и млекопитающих ⁸⁹ . Вкратце, средний уровень экспрессии гена каждого типа клеток был рассчитан с использованием функции «AverageExpression» в Seurat. Перед вычислением парных корреляций типов клеток матрицы экспрессии генов были преобразованы в матрицы специфичности генов на основе уравнения «индекса специфичности гена».Полученные в результате матрицы специфичности генов использовали для расчета попарных корреляций ранговых порядков Спирмена. Для анализа значимости коэффициентов корреляции значения экспрессии генов перетасовывались 1000 раз по типам клеток. Полученный в результате коэффициент корреляции Спирмена был рассчитан и назван перетасованным значением rho. Значение p было вычислено как часть абсолютного значения перемешанных значений, которые были больше или равны абсолютному значению rho для данных без перемешивания.Значимые значения ( p <0,05) указывают на то, что вычисленные корреляции между типами клеток не генерировались случайным образом (рис. 5a).

Вторая стратегия, которую мы использовали, — это прямое объединение наборов данных scRNA-seq риса и Arabidopsis. С этой целью мы сначала построили интегрированный атлас корневых клеток арабидопсиса, объединив три опубликованных набора данных корневых scRNA-seq (PRJNA517021, GSE123013 и GSE123818) из нашей лаборатории ¹⁹ , лаборатории Schiefelbein ²⁰ и лаборатории Тиммерманса ²² соответственно. Файлы fastq обрабатывались программой Cell Ranger 3.0.1. После контроля качества было отобрано в общей сложности 23 561 клетка из трех наборов данных scRNA-seq, и 1788 генов с высокой степенью вариабельности были использованы для последующего анализа. Рабочий процесс Сёра с аналогичными параметрами выполнялся, как указано выше. После кластеризации было выявлено 22 кластера клеток (от R0 до R21), которые покрывают основные типы клеток корня Arabidopsis (дополнительный рис. S7a). Клеточные кластеры были аннотированы проверенными маркерными генами (дополнительный рисунок S7e; дополнительные данные 3).Пакетные вклады в каждый кластер ячеек показаны на дополнительном рисунке S7c, d.

Затем наборы данных scRNA-seq арабидопсиса и корня риса были объединены с помощью канонического корреляционного анализа (CCA) в Сёра. Эффекты партии между видами были удалены после интеграции (дополнительный рис. S8a). После кластеризации было обнаружено 30 кластеров суперячеек (дополнительный рис. S8b). Сопоставимая доля клеток риса и арабидопсиса в данном типе клеток указывает на сохранение типа клеток у разных видов (например,g., RH, P и X на рис. 5c). Чтобы идентифицировать основные регуляторы для консервативных типов клеток, включая RH (I10), P (I21) и X (I22), мы использовали функцию FindConservedMarkers в Seurat. Наиболее дифференциально экспрессируемые гены были объединены в кластеры ( k -means = 4, Fig. 5d-f).

Примечание добавлено в качестве доказательства: пока эта работа находилась на пересмотре, аналогичное исследование Liu et al. было опубликовано в другом месте ⁹⁰ .

Сводка отчетов

Дополнительная информация о дизайне исследований доступна в Сводке отчетов по исследованиям природы, связанной с этой статьей.

Азиатская женщина, 76 лет, оставила окровавленного мужчину на носилках после того, как он напал на нее на улице Сан-Франциско

Пожилая азиатская женщина сопротивлялась мужчине, который случайно напал на нее в Сан-Франциско, и отправил его в больницу, покрытого кровью на улице Сан-Франциско. каталка.

76-летняя Сяо Чжэнь Се рассказала KPIX 5 из Сан-Франциско, что в среду стояла на перекрестке на Маркет-стрит, когда 39-летний мужчина ударил ее по лицу.

Се сказала, что нашла поблизости палку, чтобы защитить себя, и начала его бить.

Когда Се получил травму глаза, неизвестного человека увезли на носилках с порезанным лицом.

Затем Се снова попыталась схватить нападавшего, когда его везли в машину скорой помощи, и полиция остановила его.

Она показывает на него деревянную доску и кричит: «Ты бомж, зачем ты меня запугал?» и «Он ударил меня, он ударил меня!» на кантонском диалекте.

Инцидент произошел на фоне всплеска преступлений на почве ненависти, направленных против американцев азиатского происхождения и выходцев из Азии, проживающих в Соединенных Штатах.

Сяо Чжэнь Се, 76 лет, отбивалась от нападавшего в Сан-Франциско, оставив гораздо более молодого человека с травмами, потребовавшими поездки в больницу

Офицеры заявили, что 39-летний мужчина находится под следствием по делу о нападении на Се, а также еще одно нападение в среду на 83-летнего мужчину азиатского происхождения

Нападение произошло через несколько часов после того, как Роберт Аарон Лонг выстрелил и убил шесть азиатских женщин в массажных салонах Джорджии.

Последствия инцидента в Сан-Франциско были сняты на камеру спортивным директором KPIX Деннисом О’Доннеллом, который обнаружил место происшествия во время утренней пробежки.

Из своего дома престарелых Се, которая прожила в Сан-Франциско 26 лет, рассказала о нападении. Ее дочь Донг-Мей Ли помогала переводить.

Они сказали KPIX 5, что Се была «очень травмирована» и «очень напугана» после инцидента, и что один из ее глаз все еще кровоточит.

Ли также сказала, что ее мать не видит левым глазом и не может есть.

Джон Чен, внук Се, сказал KPIX 5, что его бабушка «очень напугана» и боится выходить из дома.

Семья создала страницу GoFundMe, чтобы помочь Се покрыть медицинские расходы. По состоянию на полдень четверга на странице было собрано 67 643 доллара, что превысило его цель в 50 000 долларов.

Се сказала, что в среду стояла на транспортном переходе на Маркет-стрит, когда мужчина ударил ее по лицу в результате явно неспровоцированного нападения

Се (справа) сказала, что нашла поблизости палку, чтобы защитить себя, и начала избивать нападавшего.

В то время как Се получил травмы глаза, которые потребовали лечения в больнице, неопознанного мужчину увезли на носилках.

«Я поражен ее храбростью», — написал Чен о своей бабушке на странице GoFundMe.

‘Именно она защищалась от этого неспровоцированного нападения. Но теперь у нее два серьезных черных глаза и один, который непрестанно кровоточит. Ее запястье также опухло. Она серьезно пострадала умственно, физически и эмоционально. Она также заявила, что теперь боится выходить из дома. Это травмирующее событие оставило у нее посттравматическое стрессовое расстройство ».

Полиция Сан-Франциско заявила, что расследует нападение при отягчающих обстоятельствах, которое произошло на Маркет-стрит и Чарльз Дж.Brenham Place около 10:30 в среду.

На видео, загруженном О’Доннелл в Twitter, можно увидеть Се, держащую пакет со льдом к лицу, кричащую и плачущую.

«Женщина сказала, что ее сбили», — сказал О’Доннелл. Она атаковала в ответ. Насколько я мог видеть, она хотела, чтобы парень на носилках побольше, а полиция сдерживала ее ».

Полиция сообщила, что Се и мужчина были доставлены в больницу для лечения.

KPIX 5 сообщил, что, по словам полицейских, в отношении 39-летнего мужчины ведется расследование по делу о нападении на Се, а также о другом нападении в среду на 83-летнего азиатского мужчины.

«Мы должны делать свою работу, и мы должны расследовать эти дела со всеми задействованными ресурсами, и нам нужно произвести аресты, и мы это сделали», — сказал начальник полиции Сан-Франциско Билл Скотт.

Скотт и мэр Лондона Брид пообещали более целенаправленное патрулирование после увеличения числа нападений на американцев азиатского происхождения в городе.

«Нам нужно понимать не только то, что происходит, но и почему происходят эти атаки. Потому что в некоторых случаях они не включали грабеж или кражу », — сказал Брид.

Из своего дома престарелых Се, которая прожила в Сан-Франциско 26 лет, рассказала о нападении. Ее дочь, Донг-Мей Ли, помогла перевести и сказала, что ее мама была «очень травмирована» и «очень напугана» после инцидента, и что один из ее глаз все еще кровоточит

Нападение Се произошло на фоне роста числа преступлений на почве ненависти, направленных против азиатских Американцы и азиаты, проживающие в США. На фото: бдение в память о жертвах стрельбы в Атланте, штат Джорджия, проходит в Джексон-Хайтс, Квинс, в среду

Активисты установили связь между неоднократным использованием бывшим президентом Дональдом Трампом фразы «китайский вирус» для описания Covid-19 и все более открытая неприязнь к американцам азиатского происхождения.На фото: участники митинга в Филадельфии в знак солидарности с азиатско-американским сообществом в среду

Нападение стало вторым, затронувшим азиатского человека на Маркет-стрит только на этой неделе после того, как в понедельник был жестоко избит 59-летний Дэнни Ю Чанг.

Роберт Аарон Лонг, 21 год, застрелил шестерых азиатских женщин в массажных салонах Атланты, штат Джорджия, во вторник вечером.

Лонг сообщил полиции, что его буйство было вызвано его «сексуальной зависимостью», но для многих это было целенаправленное нападение на американцев азиатского происхождения.

Капитан полиции чероки Джей Бейкер также вызвал возмущение, когда сказал, что Лонг начал свои перестрелки в конце «действительно плохого для него дня».

Позже выяснилось, что Бейкер опубликовал изображение расистских футболок на Facebook в апреле прошлого года.

На снимке были видны крышки с этикетками пива Corona, на которых было написано: «Covid 19, ИМПОРТИРОВАННЫЙ ВИРУС ИЗ CHY-NA». Бейкер написал: «Люблю мою рубашку. Получите свой, пока они есть.

Расистские инциденты, направленные против американцев азиатского происхождения, резко возросли в прошлом году.

StopAAPIHate, коалиция, направленная на борьбу с антиазиатской ненавистью в условиях пандемии, заявила, что она получила 3795 сообщений об инцидентах на почве антиазиатской ненависти в период с 19 марта 2020 года по 28 февраля 2021 года.

Согласно данным из отчета группы, Большинство происшествий произошло в местах ведения бизнеса, вторым по распространенности являются общественные улицы.

Шестьдесят восемь процентов заявленных инцидентов были связаны с словесными оскорблениями, при этом также были зарегистрированы случаи кашля / плевания, физического нападения, домогательств в Интернете и уклонения от них.

Инциденты были зарегистрированы во всех 50 штатах и ​​затронули людей различных рас и национальностей, большинство из которых были китайского происхождения.

StopAAPIHate, коалиция по борьбе с антиазиатской ненавистью в условиях пандемии, заявила, что получила 3795 сообщений об инцидентах на почве ненависти к Азии в период с 19 марта 2020 года по 28 февраля 2021 года. стрельба в Атланте, штат Джорджия, состоится в Джексон-Хайтс, Квинс, в среду

Депутат парламента от демократов Дэвид Чуи сказал, что около 1600 инцидентов, о которых было сообщено StopAAPIHate, произошли в Калифорнии, и что фактическое количество нападений, вероятно, будет выше, поскольку о некоторых не сообщается .

В январе 91-летний мужчина был сброшен на землю в китайском квартале Окленда. Позже в том же месяце 94-летний Вичар Ратанапакди был убит в результате нападения на улице Сан-Франциско.

На прошлой неделе 75-летний Пак Хо умер в результате нападения и ограбления в Окленде.

Чиу и другие предложили создать горячую линию по всему штату для расследования преступлений на почве ненависти и призвали губернатора Гэвина Ньюсома назначить генерального прокурора из сообщества американцев азиатского происхождения и жителей островов Тихого океана.

Активисты установили связь между неоднократным использованием бывшим президентом Дональдом Трампом фразы «китайский вирус» для описания Covid-19 и все более открытой враждебностью к американцам азиатского происхождения.

В среду пресс-секретарь Белого дома Джен Псаки заявила, что «нет никаких сомнений» в том, что «разрушительная риторика» со стороны администрации Трампа привела к «неточному, несправедливому и нечестному восприятию азиатско-американского сообщества. против

американцев азиатского происхождения. В среду пресс-секретарь Белого дома Джен Псаки повторила это, заявив, что «нет никаких сомнений» в том, что «разрушительная риторика» со стороны администрации Трампа привела к «неточному восприятию азиатско-американского сообщества. несправедливо [и] усилил угрозы в адрес американцев азиатского происхождения.«

« Вот почему мы наблюдаем это по всей стране », — сказала она, имея в виду рост числа зарегистрированных преступлений на почве ненависти с участием американцев азиатского происхождения.

Комментарии Псаки последовали за стрельбой в трех азиатских спа-салонах в Атланте, штат Джорджия, в среду, в результате которой погибли восемь человек.

Шесть из убитых были американками азиатского происхождения, что вызывает опасения, что белый стрелок преднамеренно нацелился на эту группу.

Стрельба вызвала волну страха и гнева со стороны американцев азиатского происхождения и других людей в социальных сетях, которые уже пошатнулись от роста преступлений на почве ненависти и говорят, что расизм против их сообщества не воспринимается всерьез.

Гнев только усилился после того, как заместитель шерифа сказал на пресс-конференции, что у стрелка был «действительно плохой день».

«Он был в значительной степени сытым по горло, и у него был конец веревки», — заявил в среду капитан Джей Бейкер из офиса шерифа округа Чероки.

«Вчера был для него действительно плохой день, и вот что он сделал».

Фокальная эпилепсия с иктальной болью в животе: описание случая | Italian Journal of Pediatrics

Ощущения в эпигастрии — частые симптомы у пациентов с парциальной эпилепсией, которые могут включать боль в животе, тошноту, рвоту и голод. Сообщалось, что они являются наиболее частой аурой при височной эпилепсии [3–5].Болезненные эпилептические ауры были зарегистрированы у 4,1% из 25 пациентов с фокальной эпилепсией Nair et al. [6]. Боль в животе присутствовала в 5% всех аур брюшной полости при височной эпилепсии и в 50% при лобной эпилепсии [6]. Однако жалобы со стороны желудочно-кишечного тракта, в частности боли в животе, могут быть единственным проявлением эпилептической активности [1, 3, 4, 7]. Необъяснимые приступообразные желудочно-кишечные жалобы, нарушение сознания и очаговые аномалии ЭЭГ являются основными критериями для постановки диагноза фокальной эпилепсии с иктальной болью в животе, но не все критерии должны присутствовать в каждом случае [2, 3, 6]. Кроме того, с болью во время приступов могут быть связаны различные мигренеподобные расстройства, такие как тошнота, головная боль, головокружение и зрительные галлюцинации [4] . При наличии мигренеподобных симптомов часто трудно отличить фокальную эпилепсию с иктальной болью в животе от мигрени или других неврологических расстройств, таких как синдром Панайотопулоса. Внезапное начало, спонтанное разрешение и относительно короткая продолжительность эпизодов могут быть полезны для правильной и ранней диагностики фокальной эпилепсии с иктальной болью в животе.Другой полезной отличительной чертой эпилепсии с сильной болью в животе может быть локализация иктальной боли, которая чаще всего бывает околопупочной или верхней части живота и редко распространяется на другие части тела, как у нашего пациента [1–4].

Нарушения ЭЭГ были зарегистрированы у большинства пациентов с фокальной эпилепсией и иктальной болью в животе [1, 4]. В нескольких сообщениях описывались иктальные ЭЭГ: во время приступа на ЭЭГ часто наблюдались серии медленных волн высокого напряжения и генерализованные спайковые и волновые разряды [2–4, 8]. У нашего пациента 24-часовая ЭЭГ предполагала очаговое начало, как в двух отчетах, которые показали четкие очаговые изменения ЭЭГ в левом полушарии во время эпизода боли в животе [9, 10]. В таблице 1 показаны клинические характеристики нашего пациента и предыдущие педиатрические случаи, описанные в литературе (таблица 1) [1–5, 7–13].

Таблица 1 Клиническая характеристика зарегистрированных случаев абдоминальной эпилепсии в педиатрической популяции и у нашего пациента

Патофизиология фокальной эпилепсии с иктальной болью в животе остается неизвестной.Ощущения в животе, воспроизводимые за счет стимуляции островка и сильвиевой щели, предполагают, что эти области могут играть важную роль в объяснении происхождения фокальной эпилепсии с иктальной болью в животе [3]. Phan et al. [14] сообщили о необычном случае иктальной боли в животе, возникающей на фоне кровотечения из теменной доли, и предположили возможную роль соматосенсорной области в восприятии боли. Дополнительная моторная зона рассматривалась как еще одно возможное место возникновения боли в животе. Иногда фокальная эпилепсия с иктальной болью в животе связана с опухолями головного мозга и заболеваниями головного мозга [2, 8].Предыдущие сообщения об иктальной боли в животе показали правую теменно-затылочную энцефаломаляцию, бипариетальную атрофию и двустороннюю перисильвиевую полимикрогирию [9].

В заключение наш пациент показал повторяющиеся приступы сильной боли в животе как единственное проявление эпилептического припадка. Фокальная эпилепсия с иктальной болью в животе — редкое эпилептическое явление, которое следует подозревать у пациентов с необъяснимой приступообразной болью в животе и симптомами, напоминающими мигрень. Может быть трудно установить правильный диагноз с самого начала; в этих случаях следует рассмотреть возможность длительной записи ЭЭГ с 24-часовым мониторингом для облегчения клинического диагноза.

Отзывы о белом тигре — Metacritic

Белый тигр открывается письмом Балрама китайскому руководству, в котором подробно описывается его путь к богатству. Он предупреждает, что это повышение чревато злыми делами, но определяет его как настоящего предпринимателя, в отличие от многих его государственных деятелей из числа бедняков. Балрам, чтобы спастись от жизни Белый тигр начинается с письма Балрама китайскому руководству, в котором подробно описывается его восхождение к богатству.Он предупреждает, что это повышение чревато злыми делами, но определяет его как настоящего предпринимателя, в отличие от многих его государственных деятелей из числа бедняков. Балрам, чтобы избежать безнадежной жизни, браков по договоренности и бедности, решил стать водителем одной из богатых и влиятельных семей Индии. Он любит водить молодую пару и даже дружит с ними, но вскоре понимает, что сердце слуги не выведет его из бедности. Фактически, несмотря на случайную милосердие со стороны тех, кому он служит, его в конечном итоге ненавидят те, кто слишком далеко выше его статуса, чтобы считать его человеком.Ошибочный шаг хозяев доводит его до бедственного положения, и Балрам обнаруживает, что Белому Тигру пора следовать своей природе. «Белый тигр» был написан и снят Рамином Бахрани (451 градус по Фаренгейту) на основе одноименной книги, написанной Аравиндом Адигой. Адарш Гоурав играет Бальрама, бедного предприимчивого индийского водителя, который пытается избежать мрачного будущего, которое обещает его станция. Богатую пару, которую он обслуживает, играют Раджкуммар Рао в роли Ашока и его жена Пинки, которую играет Приянка Чопра (Спасатели Малибу, Академия Мстителей Marvel в роли Камалы Хан).Властную бабушку Балрама играет Камлеш Гилл, а богатых патриархов — Махеш Манджрекар (Миллионер из трущоб) в роли аиста, и правдоподобно гангстерское выступление Виджая Маурьи в роли семейного полицейского, Мангуста. Белый тигр следует за Бальрамом как еще одним из бедняков Индии. Но он знает, что он другой, он обречен на большее, если только он сможет воспользоваться подходящей возможностью. Ему удается быть обнаруженным богатой, но также политически вовлеченной и опасной семьей в качестве водителя для новобрачных сына и его жены. Им нравится Балрам, дружить с ним и давать ему возможности, которых у него никогда не было, заставляя его поверить, что он открыл жизнь, о которой мечтал. Но принадлежность к более низкой касте также делает вас расходным материалом, как обнаруживает Балрам, когда его просят взять на себя вину за аварию, вызванную Пинки. Поскольку Балрам считает, что его отношение к своему нынешнему положению быстро ухудшается, он считает Белого Тигра редким, один для поколения, опасным, каким он мог бы быть. Я рекомендую этот фильм как великолепно снятый документальный фильм о многих аспектах Индии и о силе Бальрама.Хотя в фильме много ярких представлений, именно плавность Балрама Адарша Гоурава, кроткого и сильного, слуги и злодея, используется «Белым тигром» для усиления своих грандиозных этических тем. Фильм и сценарист, возможно, найдут в Академии некоторую любовь в этом году, но именно Гурав заслуживает наибольшего признания и, возможно, кивки «Оскар». На основании сюжета и его выступления я даю Белому тигру 3,5 / 5 звезд… Развернуть

.