NormaCS ~ Обсуждения ~ ГОСТ Р 2.106-2019. Единая система конструкторской документации. Текстовые документы
Согласно Федерального закона 184-ФЗ О техническом регулировании международный стандарт это стандарт, принятый международной организацией по стандартизации и доступный широкому кругу пользователей. К международным стандартам относятся стандарты ИСО, стандарты МЭК и стандарты ИСО/МЭК, которые являются совместными публикациями ИСО и МЭК. В международной стандартизации наряду со стандартами применяются также руководства ИСО (ISO Guide), руководства ИСО/ МЭК (ISO/IEC Guide), технические отчеты ИСО, обозначаемые индексом (префиксом) ИСО/ТО (ISO/TR), международные стандартизованные профили, обозначаемые индексом (префиксом) ИСО/ МЭК МСП (ISO/IEC ISP), оценки технологических направлений, обозначаемые индексом (префиксом) ИСО/ОТН (ISO/ TTA), рекомендации ИСО, обозначаемые индексом (префиксом) ИСО/Р (ISO/R), технические условия ИСО, обозначаемые индексом (префиксом) ИСО/ТУ (ISO/TS), общедоступные технические условия ИСО, обозначаемые индексом (префиксом) ИСО/ ОТУ (ISO/PAS), отраслевые технические соглашения, обозначаемые индексом (префиксом) ИСО/ОТС (ISO/ITA).
Согласно ГОСТ 1.1-2002 Межгосударственная система стандартизации. Термины и определения международный стандарт это стандарт, принятый международной организацией по стандартизации и доступный широкому кругу пользователей. со следующим примечанием:
1 К международным стандартам относятся стандарты ИСО, стандарты МЭК и стандарты ИСО/МЭК, которые являются совместными публикациями ИСО и МЭК.
2 В международной стандартизации наряду со стандартами применяются также руководства ИСО (ISO Guide), руководства ИСО/МЭК (ISO/IEC Guide), технические отчеты ИСО, обозначаемые индексом [префиксом] ИСО/ТО (ISO/TR), международные стандартизованные профили, обозначаемые индексом [префиксом] ИСО/МЭК МСП (ISO/IEC ISP), оценки технологических направлений, обозначаемые индексом [префиксом] ИСО/ОТН (ISO/TTA), рекомендации ИСО, обозначаемые индексом [префиксом] ИСО/Р (ISO/R), технические условия ИСО, обозначаемые индексом [префиксом] ИСО/ТУ [ISO/TS], общедоступные технические условия ИСО, обозначаемые индексом [префиксом] ИСО/ОТУ [ISO/PAS], отраслевые технические соглашения, обозначаемые индексом [префиксом] ИСО/ОТС [ISO/ITA]
«Межгосударственный» стандарт это документ по стандартизации, принятый уполномоченным межгосударственным органом или межгосударственной организацией по стандартизации, устанавливающий требования к продукции, а также процессам и иным объектам стандартизации, связанным с такой продукцией.
ГОСТ 10136-2019. Диэтиленгликоль. Технические условия.
7.1 Отбор проб
Точечные пробы для испытаний отбирают по ГОСТ 2517. При этом точечную пробу из железнодорожной или автомобильной цистерны отбирают переносным пробоотборником с уровня, расположенного на высоте 0,33 диаметра цистерны от нижней внутренней образующей.
Пробу из хранилища отбирают с любого уровня (нижнего, среднего, верхнего). Перед отбором пробы продукт в хранилище перемешивают.
Точечные пробы, отобранные из бочек, соединяют, перемешивают и объединенную пробу помещают в стеклянную емкость с пришлифованной пробкой или с завинчивающейся крышкой.
На стеклянную емкость с объединенной пробой из бочек или точечной пробы из цистерн наклеивают этикетку с указанием наименования продукта, его марки, обозначения настоящего стандарта, номера партии, даты отбора пробы, фамилии лица, отобравшего пробу.
Объем пробы для испытаний должен быть не менее 1 дм3.
7.2 Общие указания
Общие указания по проведению испытаний — по ГОСТ 27025.
Допускается применять другие средства измерений и оборудование, метрологические и технические характеристики которых не хуже, а также реактивы по качеству не ниже указанных в настоящем стандарте.
Результаты испытаний округляют с точностью до того десятичного знака, который приведен в таблице 1.
7.3 Определение плотности
Плотность диэтиленгликоля определяют по ГОСТ 18995.7 с помощью ареометра или пикнометра.
При разногласиях в оценке качества определение плотности проводят с помощью пикнометра.
7.4 Определение цвета в единицах Хазена
Цвет диэтиленгликоля в единицах Хазена определяют по ГОСТ 29131 (платно-кобальтовая шкала).
7.5 Определение массовой доли органических примесей и диэтиленгликоля
Массовую долю диэтиленгликоля и органических примесей определяют методом газожидкостной хроматографии в изотермическом режиме с использованием насадочной колонки I или колонки II и пламенно-ионизационного детектора. При определении в качестве внутреннего эталона используют дециловый спирт (колонка I) и бензиловый спирт (колонка II). Допускается проводить определение на капиллярных колонках VERTICAL VertiBond-1 с использованием вышеуказанных внутренних эталонов.
7.5.1 Аппаратура, реактивы
Хроматограф аналитический газовый лабораторный с пламенно-ионизационным детектором.
- Хроматограф аналитический газовый лабораторный с пламенно-ионизационным детектором.
- Колонка газохроматографическая насадочная стальная или стеклянная длиной 1 м внутренним диаметром З мм.
- Программно-аппаратный комплекс любого типа.
- Весы лабораторные классов точности II и III по ГОСТ 24104 с наибольшими пределами взвешивания 310 и 610 г соответственно.
- Микрошприц вместимостью 10 мм3.
- Термометр любого типа, обеспечивающий измерение температуры в интервале от 40 °С до 60 °С.
- Цилиндр по ГОСТ 1770.
- Стаканчик для взвешивания по ГОСТ 25336 типа СВ или виалы вместимостью от 5 до 10 см3.
- Стакан по ГОСТ 25336 типа В вместимостью 50 и 100 см3.
- Воронка типа ВФ или ВФО по ГОСТ 25336.
- Посуда лабораторная стеклянная по ГОСТ 25336.
- Чашка выпарительная по ГОСТ 9147 N9 4 или 5.
- Хроматон N-AW или инертон AW, или инертон «Супер» с частицами размером от 0,16 до 0,20 мм или от 0,25 до 0,31 мм.
- Полисорб-1 с частицами размером от 0,25 до 0,50 мм.
- Сито с номерами сеток 016, 025 и 05 по ГОСТ 6613.
- Полиэтиленгликоль с молекулярной массой 20000 (ПЭГ 20М).
- Стекловолокно или стекловата.
- Гелий газообразный.
- Азот газообразный технический по ГОСТ 9293.
- Водород технический марок А или Б по ГОСТ 3022 или водород от генератора водорода.
- Воздух сжатый по ГОСТ 17433 для питания контрольно-измерительных приборов
- Хлороформ очищенный по ГОСТ 20015.
- Вода дистиллированная по ГОСТ 6709 или вода эквивалентной чистоты.
- Спирт бензиловый квалификации ч. по ГОСТ 8751.
- Спирт дециловый квалификации ч.
- Спирт этиловый ректификованный технический высшего сорта по ГОСТ 18300.
- Этиленгликоль высшего сорта по ГОСТ 19710.
- Диэтиленгликоль марки А.
- Триэтиленгликоль с массовой долей основного вещества не менее 98 %.
- Ацетон по ГОСТ 2603.
7.5.2 Подготовка к испытанию
7.5.2.1 Подготовка насадки и заполнение колонок
Полисорб-1 просеивают, отбирают фракцию от 0,25 до 0,50 мм переносят ее на воронку типа ВФ или ВФО, промывают ацетоном, затем спиртом, взятыми в 3-5-кратном объеме от объема полисорба-1. Для удаления остатков ацетона и спирта воронку подсоединяют к водоструйному насосу. Затем полисорб-1 высыпают из воронки тонким слоем на фильтровальную бумагу и выдерживают в вытяжном шкафу при температуре окружающей среды до сыпучего состояния. Насадку готовят следующим образом: взвешивают полисорб (хроматон или инертон), затем взвешивают полиэтиленгликоль 20000 в количестве 5 % от массы полисорба-1 (насадка I) или 5 % от массы хроматона N-AW (или инертона AW, или инертона «Супер») (насадка II). Результаты взвешивания записывают в граммах с точностью до второго десятичного знака. Полиэтиленгликоль растворяют в хлороформе, объем которого достаточен для полного смачивания полисорба (хроматона или инертона) полученным раствором. Приготовленный раствор при непрерывном перемешивании приливают к полисорбу (хроматону или инертону), помещенному в выпарительную чашку. Затем выпарительную чашку помещают в вытяжной шкаф на водяную баню, нагретую до температуры (50±15) °С, и выпаривают хлороформ при постоянном перемешивании содержимого чашки. Хроматографическую колонку последовательно промывают водой, ацетоном и сушат в токе воздуха при температуре окружающей среды. Затем в колонку небольшими порциями вносят приготовленную насадку, уплотняют ее постукиванием или с помощью вибратора с применением вакуумирования (подсоединив противоположный от ввода насадки конец колонки с размещенным в нем тампоном из стекловолокна или стекловаты к водоструйному или вакуумному насосу). После заполнения колонки второй конец закрывают тампоном из стекловолокна или стекловаты. Заполненную колонку устанавливают в термостат хроматографа и, не присоединяя к детектору, продувают от 8 до 10 ч гелием (азотом), постепенно повышая температуру до 200 °С. и выдерживают при этой температуре от 18 до 20 ч. Монтаж, наладку и вывод хроматографа на рабочий режим проводят в соответствии с инструкцией изготовителя.
7.5.2.2 Режим градуировки и работы хроматографа приведен в таблице 2.
Параметр | Насадка I | Насадка II |
---|---|---|
Объемный расход гелия (азота), см3/мин | 30-50 | 30-50 |
Соотношение объемных расходов гелия (азота) и водорода | 1:1 | 1:1 |
Соотношение объемных расходов гелия (азота) и воздуха | 1:10 | 1:10 |
Температура термостата колонок, °C | 200 | 160-170 |
Температура испарителя, °C | 290 | 290-300 |
Температура детектора, °C | 290 | 290 |
Объем вводимой пробы, мм3 | 1 | 1 |
Типовые хроматограммы органических примесей и диэтиленгликоля при использовании насадок I и II приведены на рисунках 1 и 2 соответственно.
Типовая хроматограмма при работе на капиллярной колонке VERTICAL VertiBond-1 приведена на рисунке 3.
При разногласиях в оценке массовой доли органических примесей и массовой доли этиленгликоля анализ проводят с использованием насадки I.
В зависимости от модели применяемого хроматографа и типа адсорбента в условия режима работы хроматографа могут быть внесены некоторые изменения для достижения полного разделения примесей и контроля их содержания с погрешностью, указанной в настоящем стандарте.
7.5.2.3 Градуировка хроматографа
Массовую долю органических примесей и этиленгликоля определяют методом внутреннею эталона с учетом градуировочных коэффициентов. В качестве внутреннего эталона используют дециловый спирт при применении насадки I и бензиловый спирт при применении насадки II.
Градуировку хроматографа осуществляют по искусственным смесям.
1 — этиленгликоль; 2 — диэтиленгликоль; 3 — дециловый спирт; 4 — триэтиленгликоль
Рисунок 1 — Типовая хроматограмма органических примесей в диэтиленгликоле на колонке с насадкой I
1, 2, 3, 5, 6 — нендентифицированные примеси; 4 — этиленгликоль; 7 — бензиловый спирт; 8 — диэтиленгликоль; 9 — триэтиленгликоль
Рисунок 2 — Типовая хроматограмма органических примесей в диэтиленгликоле на колонке с насадкой II
1 — этиленгликоль; 2 — диэтиленгликоль; 3 — триэтиленгликоль; 4 — дециловый спирт
Рисунок 3 — Хроматограмма пробы товарного диэтиленгликоля на капиллярной колонке VERTICAL VertiBond-1
Искусственные смеси готовят следующим образом: в стаканчик для взвешивания помещают анализируемую примесь (этиленгликоль, триэтиленгликоль), внутренний эталон, диэтиленгликоль. Массовая доля анализируемых примесей и внутреннего эталона должна составлять от 0,05 % до 1,0 % от массы диэтиленгликоля, взятого в количестве от 4 до 5 г. Соотношение суммы анализируемых примесей и внутреннего эталона 1:1. Результаты всех взвешиваний записывают в граммах с точностью до четвертого десятичного знака. Для каждой концентрации анализируемой примеси готовят смесь с погрешностью не более 10 % от заданного значения при доверительной вероятности Р = 0,95. Приготовленную смесь тщательно перемешивают, отбирают микрошприцем необходимый объем анализируемого продукта и вводят в испаритель хроматографа. Среднеарифметическое значение градуировочного коэффициента для каждого компонента определяют по результатам трех-четырех параллельных определений для трех смесей. Для определения наличия примесей в исходном диэтиленгликоле, используемом для приготовления искусственной смеси, в испаритель хроматографа не менее двух раз вводят пробу диэтиленгликоля того же объема.
Площади пиков определяют с помощью системы сбора и обработки информации.
Градуировочный коэффициент Ki вычисляют по формуле
\(K_i = \frac{m_i \cdot S_{эт}}{m_{эт} \cdot S_i}, (1)\)
где
- mi — масса навески примеси, г;
- Sэт — площадь пика внутреннего эталона, мм2;
- mэт — масса навески внутреннего эталона, г;
- Si — площадь пика определяемой примеси, мм2.
За градуировочный коэффициент для каждой примеси принимают среднее арифметическое результатов всех определений, вычисленных с точностью до второго десятичного знака.
Градуировку хроматографа и кондиционирование колонок проводят после 400 определений, а также при смене колонки, изменении условий хроматографического определения, после ремонта хроматографа. Градуировочный коэффициент для неидентифицированной примеси в диэтиленгликоле принимают равным градуировочному коэффициенту этиленгликоля.
7.5.3 Проведение измерений
Взвешивают в стаканчике для взвешивания от 4 до 5 г диэтиленгликоля и добавляют внутренний эталон от 0,05 % до 1,0 % от массы анализируемого продукта. Результаты взвешиваний записывают в граммах с точностью до четвертого десятичного знака. Смесь тщательно перемешивают, отбирают микрошприцем необходимое количество анализируемого продукта и вводят в испаритель хроматографа. Смесь вводят не менее двух раз.
7.5.4 Обработка результатов
Массовую долю примеси Xi, %, вычисляют по формуле
\(X_i = \frac{K_i \cdot m_{эт} \cdot S_i \cdot 100}{m \cdot S_{эт}}, (2)\)
где
- Ki — градуировочный коэффициент определяемой примеси;
- mэт — масса навески внутреннего эталона, г;
- Si — площадь пика определяемой примеси, мм2;
- m — масса навески диэтиленгликоля, г;
- Sэт — площадь пика внутреннего эталона, мм2.
Массовую долю суммы органических примесей вычисляют суммированием измеренных массовых долей каждой примеси.
При соблюдении условий проведения измерений в соответствии с настоящим стандартом прецизионность определения этиленгликоля не превышает значений, приведенных в таблице 3.
Диапазон определения массовой доли этиленгликоля, % масс. | Граница абсолютной погрешности (при Р = 0,95) ±Δ, % масс. | Предел повторяемости (при Р = 0,95) r, % масс. | Предел воспроизводимости (при Р = 0,95) R, % масс. |
---|---|---|---|
От 0,010 до 0,030 включ. | 0,004 | 0,005 | 0,006 |
Св. 0,03 » 0,05 » | 0,01 | 0,006 | 0,01 |
» 0,05 » 0,08 » | 0,02 | 0,01 | 0,03 |
» 0,08 » 0,10 » | 0,03 | 0,02 | 0,04 |
» 0,10 » 0,15 » | 0,04 | 0,03 | 0,05 |
» 0,15 » 0,30 » | 0,06 | 0,04 | 0,07 |
» 0,30 » 0,50 » | 0,08 | 0,08 | 0,10 |
» 0,5 » 0,8 » | 0,2 | 0,1 | 0,3 |
» 0,8 » 1,0 » | 0,2 | 0,2 | 0,3 |
При соблюдении условий настоящего стандарта прецизионность определения массовой доли органических примесей не превышает значений, приведенных в таблице 4.
Диапазон определения массовой доли органических примесей, % масс. | Граница абсолютной погрешности (при Р = 0,95) ±Δ, % масс. | Предел повторяемости (при Р = 0,95) r, % масс. | Предел воспроизводимости (при Р = 0,95) R, % масс. |
---|---|---|---|
От 0,020 до 0,050 включ. | 0,012 | 0,016 | 0,017 |
Св. 0,05 » 0,20 » | 0,03 | 0,04 | 0,04 |
» 0,20 » 0,40 » | 0,06 | 0,04 | 0,07 |
» 0,40 » 0,60 » | 0,09 | 0,08 | 0,10 |
» 0,6 » 0,8 » | 0,2 | 0,1 | 0,3 |
» 0,8 » 1,8 » | 0,2 | 0,2 | 0,3 |
Массовую долю диэтиленгликоля X, %, вычисляют по формуле:
\(X = 100 — \left(\sum X_i — X_в\right), (3)\)
где
- ∑Xi — сумма массовых долей примесей, определенных хроматографически, % масс.;
- Xв — массовая доля воды, определенная по п. 7.6, % масс.
7.6 Определение массовой доли воды
Массовую долю воды определяют по ГОСТ 14870 реактивом Фишера визуальным или электрометрическим титрованием. При титровании используют бюретки вместимостью 3 или 10 см3 по ГОСТ 29251.
За результат испытания принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, абсолютное расхождение между которыми не превышает допускаемое расхождение. равное 0,005 % масс. Для продукта марки А и 0,02 % масс, для продукта марки Б.
Допускаемая абсолютная суммарная погрешность результата испытания ±0,005 % масс, для продукта марки А и ±0,02 % масс, для марки продукта Б при доверительной вероятности Р = 0,95. При возникновении разногласий в оценке качества продукта массовую долю воды определяют электрометрическим методом.
7.7 Определение массовой доли кислот в пересчете на уксусную кислоту
7.7.1 Аппаратура, реактивы, растворы
- Весы лабораторные класса точности III по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 610 г.
- Посуда лабораторная стеклянная по ГОСТ 25336.
- Секундомер.
- Цилиндр по ГОСТ 1770 вместимостью 50.
- Бюретка 1-1-2-2-0.01 или 1-1-2-5-0.1 по ГОСТ 29251.
- Фенолфталеин, спиртовой раствор с массовой долей 1 %; готовят по ГОСТ 4919.1.
- Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор с молярной концентрацией с (NaOH) = 0,05 моль/дм3: готовят по ГОСТ 25794.1.
- Спирт этиловый ректификованный технический высшего сорта по ГОСТ 18300.
- Вода дистиллированная по ГОСТ 6709 или вода эквивалентной чистоты, не содержащая углекислоты; готовят по ГОСТ 4517.
7.7.2 Проведение испытаний
В конической колбе взвешивают от 49.50 до 50,50 г анализируемого продукта, записывают результат взвешивания в граммах с точностью до второго десятичного знака, добавляют 50 см3 воды, не содержащей диоксида углерода. Содержимое колбы перемешивают, затем прибавляют 8-10 капель раствора фенолфталеина, снова перемешивают, после чего титруют раствором гидроокиси натрия до появления розового окрашивания, устойчивого в течение 30 с.
В тех же условиях проводят контрольное титрование с 50 см3 дистиллированной воды.
7.7.3 Обработка результатов
Массовую долю кислот в пересчете на уксусную кислоту Хк, %, вычисляют по формуле
\(X_k = \frac{\left(V-V_1\right)\cdot0,003\cdot100}{m}, (4)\)
где
- V — объем раствора гидроокиси натрия концентрации точно 0,05 моль/дм3, израсходованный на титрование анализируемого раствора, см3;
- V1 — объем раствора гидроокиси натрия концентрации точно 0,05 моль/дм3, израсходованный на контрольное титрование, см3;
- 0,003 — масса уксусной кислоты, соответствующая 1 см3 раствора гидроокиси натрия с молярной концентрацией точно 0,05 моль/дм3, г/см3;
- m — масса навески, г.
При соблюдении условий проведения испытаний в соответствии с настоящим стандартом прецизионность определения массовой доли кислот в пересчете на уксусную кислоту не превышает значений, приведенных в таблице 5.
Диапазон определения массовой доли кислот в пересчете на уксусную кислоту, % масс | Граница абсолютной погрешности (при Р = 0,95) ±Δ, % масс. | Предел повторяемости (при Р = 0,95) r, % масс. | Предел воспроизводимости (при Р = 0,95) R, % масс. |
---|---|---|---|
От 0,0010 до 0,0050 включ. | 0,0004 | 0,0005 | 0,0006 |
Св. 0,005 до 0,010 включ. | 0,001 | 0,002 | 0,002 |
7.8 Определение числа омыления
7.8.1 Аппаратура, реактивы и растворы
- Весы лабораторные класса точности III по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 610 г.
- Секундомер.
- Цилиндр по ГОСТ 1770 вместимостью 25 или 50 см3 100 см3.
- Бюретка 1-1-2-50-0,2 по ГОСТ 29251.
- Пипетка 2-2-25 или 3-2-25 по ГОСТ 29169.
- Посуда лабораторная стеклянная по ГОСТ 25336.
- Калия гидроокись по ГОСТ 24363, спиртовой раствор с молярной концентрацией с (KOH) = 0,1 моль/дм3; готовят по ГОСТ 25794.3.
- Фенолфталеин, спиртовой раствор с массовой долей 1 %; готовят по ГОСТ 4919.1.
- Кислота серная, раствор с молярной концентрацией с (1/2H2SO4) — 0.1 моль/дм3; готовят по ГОСТ 25794.1
- Спирт этиловый ректификованный технический высшего сорта по ГОСТ 18300.
- Известь натронная.
- Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
7.8.2 Проведение испытаний
Навеску от 99,50 до 100.50 г анализируемого продукта марки А или от 49.50 до 50,50 г продукта марки Б взвешивают в конической колбе, результаты взвешивания в граммах записывают с точностью до второго десятичного знака. В колбу добавляют 25 см3 раствора гидроокиси калия. Колбу с содержимым присоединяют к холодильнику, снабженному трубкой с натронной известью (если нагревание проводят вне вытяжного шкафа), и нагревают 1 ч на кипящей водяной бане. Затем охлаждают колбу с содержимым до температуры окружающей среды, промывают холодильник через верх от 10 до 20 см3 дистиллированной воды. Удаляют холодильник, добавляют в колбу от трех до пяти капель раствора фенолфталеина и титруют раствором серной кислоты до обесцвечивания.
В тех же условиях проводят контрольное титрование с 50 см3 дистиллированной воды.
7.8.3 Обработка результатов
Число омыления Х1, мг гидроокиси калия на 1 г диэтиленгликоля, вычисляют по формуле
\(X_1 = \frac{\left(V-V_1\right)\cdot5,6}{m}, (5)\)
где
- V — объем раствора серной кислоты концентрации точно 0,1 моль/дм3, израсходованный на контрольное титрование, см3;
- V1 — объем раствора серной кислоты концентрации точно 0,1 моль/дм3, израсходованный на титрование анализируемого раствора, см3;
- 5,6 — масса калия гидроокиси, соответствующая 1 см3 спиртового раствора гидроокиси калия с молярной концентрацией точно 0,1 моль/дм3, мг;
- m — масса навески диэтиленгликоля, г.
За результат испытания принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не превышают 0,01 мг гидроокиси калия на 1 г диэтиленгликоля при доверительной вероятности Р = 0,95.
При соблюдении условий проведения испытаний по настоящему стандарту прецизионность определения числа омыления не превышает значений, приведенных в таблице 6.
Диапазон определения числа омыления, мг KOH на 1 г продукта | Граница абсолютной погрешности (при Р = 0,95), мг KOH на 1 г продукта | Предел повторяемости (при Р = 0,95) r, мг KOH на 1 г продукта | Предел воспроизводимости (при Р = 0,95) R, мг KOH на 1 г продукта |
---|---|---|---|
От 0,010 до 0,100 включ. | 0,006 | 0,007 | 0,008 |
Св. 0,10 до 0,30 включ. | 0,03 | 0,04 | 0,04 |
7.9 Определение температурных пределов перегонки
Определение температурных пределов перегонки проводят по разделу 2 ГОСТ 18995.7. За температуру конца перегонки принимают значение температуры, при которой отгоняется 98 % по объему продукта для марки А и 96 % — для продукта марки Б.
Допускаемая абсолютная суммарная погрешность результата испытаний ±1 % при доверительной вероятности Р = 0,95.
Вопросы метрологической аттестации и соответствия счетчика СМТ-Смарт требованиям новой редакции ГОСТ Р 8.741-2019.
Требования к методикам измерений регламентированы Федеральным законом N 102 «Об обеспечении единства измерений», п.1 статья 5:
«Измерения, относящиеся к сфере государственного регулирования обеспечения единства измерений, должны выполняться по аттестованным методикам (методам) измерений, за исключением методик (методов) измерений, предназначенных для выполнения прямых измерений, с применением средств измерений утвержденного типа, прошедших поверку».
Далее, п.2 статьи 5 Федерального закона уточняет особенности аттестации методик измерений применительно к процедуре прямых измерений: «Методики (методы) измерений, предназначенные для выполнения прямых измерений, вносятся в эксплуатационную документацию на средства измерений. Подтверждение соответствия этих методик (методов) измерений обязательным метрологическим требованиям к измерениям осуществляется в процессе утверждения типов данных средств измерений».
Что следует относить к прямым измерениям? Формулировка приведена в п.19 статьи 2 Федерального закона: «Прямое измерение — измерение, при котором искомое значение величины получают непосредственно от средства измерений».
Казалось бы, данное определение исключает саму возможность какого-либо толкования формулировки Закона, однако на практике часто приходится сталкиваться с попытками дать собственную интерпретацию определения прямого метода измерений.
Попробуем пояснить, почему в счетчике СМТ-Смарт используется именно прямой метод измерения, так сказать, от противного – используя определение для косвенного метода измерений, к которому вопросов никогда не возникает. Итак, косвенное измерение – это измерение, при котором значение искомой величины определяется пересчетом результатов прямых измерений величин, связанных с искомой величиной известной нам зависимостью.
В соответствии с данным определением в счетчике СМТ-Смарт не используется косвенный метод измерения, т.к. искомая измеряемая величина – объем газа, приведенный к стандартным условиям, получается непосредственно от данного средства измерения, без привлечения результатов других прямых измерений – внутренних или внешних.
Наконец, официальная позиция Федерального Агенства по Техническому Регулированию и Метрологии (Росстандарт РФ) по этому и другим вопросам содержится в письме за подписью Начальника управления метрологии Д.В.Гоголева (н.вх.N 22831-ДГ/04 от 06.12.2019г.), а также в ответе Государственного научного метрологического центра ФГУП «ВНИИР» за подписью Первого заместителя директора по научной работе В.А.Фафурина (н.вх.N 160/02-13 от 15.01.2020г.).
В указанных документах констатируется, что в счетчике СМТ-Смарт, в соответствии с п.19 статьи 2 Федерального закона от 26.06.2008 N102-ФЗ «Об обеспечении единства измерений» используется прямой метод измерения объема природного газа, приведенного к стандартным условиям. Указанный тип счетчика является средством измерений утвержденного типа и, в связи с этим, может применяться в сфере государственного регулирования обеспечения единства измерений.
Так как Госстандарт РФ является высшей инстанцией в вопросах метрологии, считаем, что разъяснения, содержащиеся в полученном официальном ответе, закрывают дискуссию относительно применения прямого метода измерений в счетчике СМТ Смарт.
Основной вопрос, возникающий на этапе метрологической аттестации проектов по установке счетчиков СМТ Смарт, – каким образом для данного счетчика должен производиться расчет величины расширенной неопределенности измерений. Содержание данного понятия раскрывает ГОСТ Р 54500.3.1 «Неопределенность измерения. Руководство по выражению неопределенности измерения», в котором описывается процедура расчета относительной расширенной неопределенности измерения при выбранном коэффициенте охвата.
Рассмотрим пример расчета относительной расширенной неопределенности на примере диафрагменного счетчика с электронным устройством, осуществляющим, на основе измерения давления и температуры газа, приведение объема газа к стандартным условиям. Согласно данному выше определению в таком счетчике реализуется метод косвенных измерений. Результатами используемых при этом прямых измерений будут измеренный объем газа при рабочих условиях, температура и абсолютное давление газа. Для каждого из перечисленных измеряемых параметров, исходя из заявленных пределов допускаемой относительной погрешности измерений δi рассчитывается соответствующая относительная стандартная неопределенность измерений ui %:
Ui = 0,5 δi;
Далее производится расчет относительной суммарной стандартной неопределенности измерений объема газа, приведенного к стандартным условиям, %:
uс = √ ∑ ui²,
и, наконец, с учетом выбранного коэффициента охвата 2, вычисляется значение относительной расширенной неопределенности измерений объема газа, приведенного к стандартным условиям, % :
Uc = 2uс
Как известно, с 01.11.2019г. вступила в силу новая редакция ГОСТ Р 8.741 – 2019 «Объем природного газа. Общие требования к методикам измерений», в которой внесены важные изменения. Так, в разделе 7.7 «Оценка показателей точности» введена оценка относительной погрешности измерения объема газа, приведенного к стандартным условиям с учетом дополнительной погрешности средства измерения при наибольших отклонениях внешних влияющих величин от нормальных значений, а также дополнительных погрешностей от принятия величин за условно-постоянный параметр и погрешностей, приписанных уравнениям расчета плотности или коэффициента сжимаемости газов. И далее, в разделе 7.7 «Оценка показателей точности» — см. п 7.7.6 впервые введено требование: «Численное значение относительной расширенной неопределенности не должно превышать предела допускаемой относительной погрешности измерений объема газа, приведенного к стандартным условиям». При этом для средств измерений объема газа, приведенного к стандартным условиям, для максимального значения объемного расхода газа, приведенного к стандартным условиям менее 150м 3/ч величина допускаемой относительной погрешности измерений должна быть не более ±4%.
Для счетчика СМТ-Смарт, в котором реализован принцип прямого измерения, где искомое значение измеряемой величины не содержит результатов других прямых измерений, относительная расширенная неопределенность измерений будет зависеть от относительной стандартной неопределенности измерения, определяемой пределом допускаемой относительной погрешности измерений объема газа δv, приведенного к стандартным условиям и относительной стандартной неопределенности измерения, определяемой величиной дополнительной погрешности от изменения температуры измеряемого газа при максимальных отклонениях от границы для нормальных условий δt:
Uc = 2 √ ( 0,5δv ) 2+ ( 0,5 δt)2
Подставляя значения относительных погрешностей измерения для счетчика СМТ-Смарт получаем численное значение относительной расширенной неопределенности измерений Uc = 3.4%, что соответствует требованиям п.7.7.6 ГОСТ Р 8.741 – 2019.
Таким образом, в случае метода прямого измерения, требование п 7.7.6 ГОСТ Р 8.741-2019 выполняется по определению, в то время, как при использовании метода косвенного измерения с применением условно-постоянных величин, выполнение данного требования весьма проблематично, т.к. на этапе первичной сертификации изделия, в котором используется метод косвенного измерения, соответствие данного средства измерения требованиям п. 7.7.6 ГОСТ Р 8.741-2019 также должно обеспечиваться для всего диапазона изменения условно постоянных величин, приведенного в технических условиях на данное средство измерения.
Как известно, приведение объема газа к стандартным условиям (при использовании значения абсолютного давления как условно-постоянной величины) производится по формуле:
Vст = Vраб (Рабс.подст x Тст/ Рст xТизм х К), где
Рабс.подст – соответственно подстановочное значение давления газа;
Тизм – измеренное значение температуры газа;
Рст, Тст — стандартные значения давления и температуры газа по ГОСТ 2939;
К – коэффициент относительный сжимаемости газа.
Исходя из приведенной формулы очевидно, что погрешность приведения объема к стандартным условиям при косвенном способе измерения в равной мере зависит и от температуры газа и от его абсолютного давления. Использование подстановочного значения давления взамен измеренного приводит к расхождению объемов газа переданных поставщиком и измеренных потребителем. Так, при избыточном давлении газа в трубе 2 кПа и вариациях атмосферного давления в диапазоне 84 – 106,7 кПа предельное значение дополнительной погрешности вычисления объема, приведенного к стандартным условиям при использовании подстановочных значений давления может составлять ± 5%. Поэтому, единственно приемлемое в данном случае решение – взамен корректировки условно-постоянного значения абсолютного давления производителю данного типа счетчиков необходимо ввести в техническую документацию параметр – «Дополнительная относительная погрешность, вызванная отклонением абсолютного давления измеряемого газа», по аналогии с тем, как это сделано в ГОСТ Р 8.915-2016 «Счетчики объемные диафрагменные. Общие технические требования, методика измерений и поверки» — см.п.6.2.2 параметр «Дополнительная относительная погрешность, вызванная отклонением температуры измеряемого газа».
Однако на практике производители счетчиков идут иным путем. Например, в Инструкции «Объем газа. Методика измерений счетчиками газа объемными диафрагменными ВК-G4 ЕТе, ВК-G6 ЕТе с электронным индексом» (Регистрацион-ный номер Методики измерений ФР.1.29.2-16.24754) – см. п.11.5:
Условно-постоянное значение абсолютного давления измеряемого газа корректируют, если отклонение абсолютного давления газа от значения, принятого условно-постоянным, выходит за пределы ±3%, при требовании к относительной расширенной неопределенности измерений объема газа, приведенного к стандартным условиям ±4%.
Это означает, что производитель данного средства измерения не гарантирует соответствия его точностных характеристик во всем диапазоне изменений условий эксплуатации, а потребитель (поставщик газа), если хочет получать результаты измерений с необходимой точностью, должен постоянно контролировать величину отклонения абсолютного давления газа в месте установки средства измерения от принятого условно — постоянного значения и, при необходимости, оперативно производить его корректировку таким образом, чтобы средство измерения, установленное в данном месте и параметрах газа, измеренных непосредственно в условиях эксплуатации, обеспечивало соответствие параметров точности, заявленных производителем данного средства измерения на этапе его первичной сертификации!
Однако такой подход прямо противоречит п. 6.2.3 ГОСТ Р 8.883-2015» Программное обеспечение средств измерений. Алгоритмы обработки, хранения защиты и передачи измерительной информации. Методы испытаний», в котором сказано:
После испытаний программного обеспечения (ПО) метрологически значимая часть ПО средства измерения (СИ) не должна изменяться. Любая модификация метрологически значимой части ПО СИ приводит к изменению его идентификационных данных и к необходимости проведения повторных испытаний с целью утверждения типа СИ.
Действительно, если произведенная корректировка подстановочных условно-постоянных величин (абсолютного давления газа) приводит к изменению погрешности измерения объема газа, приведенного к стандартным условиям, то подобные действия равносильны модификации метрологической части ПО средства измерения. Фактически нет никакой разницы в том, менять ли калибровочную характеристику счетчика газа или вводить новое подстановочное значение абсолютного давления – и то и другое приведет к изменению величины относительной погрешности измерения объема газа, приведенного к стандартным условиям. Такие действия прямо нарушают требование неизменности метрологически значимой части ПО – а именно той его части, которая может оказывать влияние на метрологические характеристики средства измерения – см. ГОСТ Р 8.654-2009
Для допуска к эксплуатации средства измерения необходимо выполнить процедуру метрологическую аттестацию проекта согласно п.3 статьи 5 Федерального закона от 26.06.2008 N 102 «Об обеспечении единства измерений»: «Аттестация методик (методов) измерений, относящихся к сфере государственного регулирования обеспечения единства измерений, проводят аккредитованные в соответствии с законом Российской Федерации об аккредитации в национальной системе аккредитации юридические лица и индивидуальные предприниматели».
При аттестации проекта для расчета относительной расширенной неопределенности измерений и проверки соответствия требованиям нормативной документации применяется стандартный Программный комплекс «Расходомер ИСО» модуль ГОСТ Р 8.740-2011. Входными для данной программы параметрами являются значения объемного расхода при рабочих условиях, погрешности измерения, минимальные и максимальные давление и температура измеряемого газа а также условия эксплуатации — диапазон изменения температуры и давления окружающей среды, а также диапазон измерения расхода газа в рабочих условиях. После внесения всех необходимых данных программа осуществляет их проверку на полноту и достоверность. В случае, когда какой-либо параметр некорректен, выходит за допустимый диапазон применения или не соответствует положениям ГОСТ Р 8.740-2011, программа выдает сообщение об ошибке с ее кратким описанием. Если рассчитанная программой неопределенность превышает неопределенность, соответствующую заданному уровню точности измерений, то результат расчета не выводится до соответствующего изменения входных параметров. Например, применительно к комплексу для измерения количества газа СГ-ТК модификации СГ-ТК-Д приемлемая величина относительной расширенной неопределенности измерения объемного расхода газа, приведенного к стандартным условиям, равная 4% может быть получена только для диапазона изменения условно-постоянной величины абсолютного давления газа от 100,254кПа до 105,396 кПа, что соответствует диапазону изменения атмосферного давления от 100,104 кПа до 105,246 кПа. При этом рабочий диапазон атмосферного давления, приведенный в МП на комплекс СГ-СК модификация СГ-ТК-Д раздел» Условия эксплуатации» — от 84 кПа до 106,7 кПа.
С формальной точки зрения процедура метрологической аттестации проекта при этом выполнена успешно, однако вопрос – что должен делать потребитель (поставщик газа), когда текущее значение атмосферного давления выходит за пределы, определенные с помощью программного средства» Расходомер ИСО» модуль ГОСТ Р 8.740-2011, в данном случае остается без ответа.
Заключение
1. Официальное заключение Федерального Агенства по Техническому Регулированию и Метрологии (Росстандарт РФ) ставит точку в затянувшейся дискуссии о применении метода прямого измерения в счетчике СМТ-Смарт.
2. Несмотря на то, что сертификация счетчика СМТ-Смарт была произведена до вступления в силу новой редакции ГОСТ Р 8.741-2019, метрологические характеристики счетчика, включая значение относительной расширенной неопределенности измерений, полностью соответствуют требованиям нового ГОСТа.
3. С учетом данных выше разъяснений, расчет величины относительной расширенной неопределенности измерений для счетчика СМТ-Смарт,- вручную или с помощью Программного средства «Расходомер ИСО» модуль ГОСТ Р 8.740-2011, не должно вызывать затруднений.
Круг, проволока Лист, Плита, Лента (полоса), Шина Шестигранник Квадрат Труба круглая, втулка Труба профильная Уголок Швеллер Тавр Двутавр | -Выберите-АлюминийМедьЛатуньБронзаОловоСвинецЦинкНикелевые сплавыМедно-никелевые сплавыНихромНержавеющие сталиСталь А5, А5Е, А6, А7, АД0, АД00 Д16 АМц, АМцС, ММ АД31 АД1 АМг6 АМг5 АМг3 АМг2 М1, М2, М3 Л90 Л85 Л80 Л70 ЛС59-1 Л68 Л63 БрОЦ4-3 БрОФ7-0,2 БрОФ6,5-0,15 БрАЖН10-4-4 БрХ1 БрБ2 БрКМц3-1 БрАМц9-2 БрАЖМц10-3-1,5 БрОЦС5-5-5 БрАЖ9-4 О1 С0, С1, С2 Ц0, Ц1 НМц2,5 НМц5 НК0,2 Алюмель НМцАК2-2-1 Монель НМЖМц28-2,5-1,5 Хромель Т НХ9,5 Куниаль Б МНА6-1,5 Нейзильбер МНЦ15-20 Куниаль А МНА6-1,5 Константан МНМц40-1,5 Копель МНМц43-0,5 Мельхиор МН19 Манганин МНМц3-12 МНЖ5-1 Х15Н60 Х20Н80 12Х18Н10Т, 12Х18Н12Т, 12Х18Н9 04Х18Н10Т, 08Х18Н12Б 08Х13, 08Х17Т, 08Х20Н14С2 08Х22Н6Т, 15Х25Т 08Х18Н10, 08Х18Н10Т 08Х18Н12Т 10Х17Н13М2Т 10Х23Н18 12Х13, 12Х17 Ст3, Ст5, Ст10, Ст20 | Длина (м) b — Диаметр (мм) Длина (м) b — Ширина (мм) c — Толщина (мм) Длина (м) b — Сечение (мм) Длина (м) b — Сечение (мм) Длина (м) b — Толщина стенки (мм) c — Диаметр (мм) Длина (м) b — Толщина стенки (мм) c — Ширина (мм) d — Высота (мм) Длина (м) b — Толщина стенки (мм) c — Высота полки1 (мм) d — Высота полки2 (мм) Длина (м) b — Толщина стенки (мм) c — Ширина (мм) d — Высота (мм) Длина (м) b — Толщина стенки (мм) c — Ширина (мм) d — Высота (мм) e — Толщина перемычки (мм) Длина (м) b — Толщина стенки (мм) c — Ширина (мм) d — Высота (мм) e — Толщина перемычки (мм) |
АЛГОРИТМ СОЗДАНИЯ АВТОМАТИЗИРОВАННЫХ СИСТЕМ В ЗАЩИЩЕННОМ ИСПОЛНЕНИИ | Каднова
1. ГОСТ Р 53114-2008 Защита информации. Обеспечение информационной безопасности в организации. Основные термины и определения.
URL: http://docs.cntd.ru/document/1200075565 (дата обращения: 23.11.2019).
2. ГОСТ Р 50922-2006. Защита информации. Основные термины и определения.
URL: http://docs.cntd.ru/document/gost-r-50922-2006 (дата обращения: 23.11.2019).
3. Каднова А.М. Система показателей качества функционирования при создании системы информационной безопасности на объекте информатизации ОВД / О.И. Бокова, А.М. Каднова, Е.А. Рогозин, А.С. Серпилин // Приборы и системы, управление, контроль, диагностика. 2019. № 1. С. 26–33.
4. Гаскаров В.Д. Концептуальное проектирование защищенных автоматизированных информационных систем / В.Д. Гаскаров // Водные пути и гидротехнические сооружения, информационные технологии, портовая техника и электромеханика, судостроение и судоремонт, гуманитарные вопросы, экономика и финансы, юриспруденция : сб. науч. тр. – Санкт-Петербург, 2008. С. 91–96.
5. Лойко В.И. Проектирование автоматизированных систем в защищенном исполнении военного назначения / В.И. Лойко, Ф.Г. Хисамов, Р.С. Шерстобитов // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. 2017. № 126. С. 519–532.
6. Хисамов Ф.Г. Математическая модель оценки защищенности информации от несанкционированного доступа при проектировании автоматизированных систем в защищенном исполнении / Ф.Г. Хисамов, А.С. Жук, Р.С. Шерстобитов // Известия ЮФУ. Технические науки. 2017. № 9 (194). С. 91–102.
7. Гудков С.Н. Основные этапы и задачи проектирования программных систем защиты информации в автоматизированных системах /С.Н. Гудков, Д.И. Коробкин, Е.А. Рогозин // Вестник Воронежского государственного технического университета. 2009. Т. 5. № 10. С. 139–142.
8. Львович Я.Е. Оптимизация проектирования систем защиты информации в автоматизированных информационных систем промышленных предприятий / Я.Е. Львович, Д.С. Яковлев // Вестник ВГУИТ. 2014. №2. С. 90–94.
9. Каднова А.М. Имитационная модель функционирования системы защиты информации от несанкционированного доступа «Страж NT» в программной среде «CPN Tools» с целью исследования ее временных характеристик / А.М. Каднова, Е.А. Рогозин, Ю.С. Лунёв, А.Д. Попов // Охрана, безопасность, связь – 2018 : материалы международной научно-практической конференции. Т 3.
№ 4(4). Воронеж: ВИ МВД России, 2019. С. 78–81
10. Дровникова И.Г. Методика проектирования систем информационной безопасности в автоматизированных системах / И.Г. Дровникова, Е.А. Рогозин, А.А. Никитин // Интернет-журнал «Технологии техносферной безопасности». 2016. №4 (68). С. 17–25.
11. Методы и средства оценки эффективности подсистемы защиты конфиденциального информационного ресурса при её проектировании в системах электронного документооборота : монография / И.Г. Дровникова [и др.]. Воронеж: Воронеж. гос. техн. ун-т, 2015.– 106 с.
12. ГОСТ Р 51583-2014 Защита информации. Порядок создания автоматизированных систем в защищенном исполнении. Общие положения. URL: http://docs.cntd.ru/document/1200108858 (дата обращения: 23.11.2019).
13. ГОСТ 34.601-90 Информационная технология. Комплекс стандартов на автоматизированные системы. Автоматизированные системы. Стадии создания. URL: http://docs.cntd.ru/document/1200006921.
(дата обращения: 23.11.2019).
14. Рогозин Е.А. Проектирование систем защиты информации от несанкционированного доступа в автоматизированных системах органов внутренних дел / Е.А. Рогозин, А.Д. Попов, Т.В. Шагиров // Вестник Воронежского института МВД России. 2016. № 2. С. 174–183.
15. ФСТЭК РФ. Руководящий документ. Автоматизированные системы. Защита от несанкционированного доступа к информации. Классификация автоматизированных систем и требования по защите информации. – Москва: Воениздат, 1992.
16. ГОСТ 34.602-89 Информационная технология. Комплекс стандартов на автоматизированные системы. Техническое задание на создание автоматизированной системы.
URL: http://docs.cntd.ru/document/1200006924 (дата обращения: 23.11.2019).
17. ФСТЭК РФ. Руководящий документ. Концепция защиты средств вычислительной техники и автоматизированных систем от несанкционированного доступа к информации. Москва: Воениздат, 1992.
Состояние водных ресурсов и качество питьевых вод: данные отчета Минприроды за 2019 год
30 октября 2020 года в Минприроды России состоялось заседание Общественного совета, в ходе которого был принят проект государственного доклада «О состоянии и об охране окружающей среды Российской Федерации в 2019 году». Проект доклада был размещен 10 сентября текущего года на официальном сайте Минприроды России для общественного обсуждения сроком на 30 дней.
В докладе опубликованы данные, касающиеся сферы водоснабжения в РФ, за 2019 год, приводится динамика в сравнении с 2018 годом и за период с 2010 года.
Забор и использование воды, сброс сточных вод
Согласно данным Росводресурсов, объем забора воды из природных источников в 2019 году находился на уровне 68298,54 млн м3, что выше на 0,39% в сравнении с 2018 годом. С 2010 года объем забора сократился на 13,49%.
При оценке потерь воды при транспортировке заметна тенденция на снижение, в 2019 году они составили 6878,75 млн м3, что на 2,02% меньше, чем в 2018 году. За период 2010-2019 годов потери воды сократились на 10,52%.
Использование пресной воды, забранной для всех нужд, то есть потребление воды с прямотоком, включая использование пресной воды, в 2019 году составило 51163,48 млн м3, что меньше в сравнении с 2018 годом на 3,40%. В течение десяти лет наблюдается стабильное снижение, в целом данный показатель сократился на 13,95%.
Как и в 2018 году, свежая вода в основном расходуется на промышленные, питьевые и бытовые нужды, орошение и сельскохозяйственное водоснабжение. Основным направлением использования свежей воды является промышленное водоснабжение. В 2019 году его объем составил 26615,78 млн м3, сократившись на 9,19% с 2018 года. Значение промышленного водопотребления соответствует 55,3% от общего объема потребления свежей воды в стране. Для показателя питьевых и бытовых нужд также произошло сокращение в 2019 году до 7540,17 млн м3, это на 14,4% в сравнении с 2018 годом. Показатель использования свежей воды на орошение равен 7182,63 млн м3 в 2019 году, по сравнению с 2018 годом произошел рост на 8,53%. Показатель сельскохозяйственного водоснабжения сократился на 22,06% в 2019 году в сравнении с 2018 годом и был равен 310,97 млн м3.
За 2010-2019 годы произошло значительное снижение потребления воды в системах питьевого и бытового водоснабжения, а именно с 9587,43 млн м3 до 7 540,17 млн м3, или на 21,35%. Расход воды на производственные нужды снизился с 36429,17 млн м3 до 26615,78 млн м3, или на 26,94%. Потребление поливной воды снизилось на 8,59 %, то есть с 7858,12 млн м3 до 7182,63 млн м3.
В разрезе видов экономической деятельности наибольшие объемы промышленного водоснабжения отмечаются по виду экономической деятельности «обеспечение электроэнергией, газом и паром; кондиционирование воздуха» и равны 20903,09 млн м3 в 2019 году, в сравнении с 2018 годом произошло сокращение на 10,91%. Данный показатель составляет примерно 80,0% от общего объема использования воды на производственные нужды. Объемы питьевого и бытового водоснабжения по видам экономической деятельности «Водоснабжение, водоотведение, организация сбора и утилизации отходов, мероприятия по ликвидации загрязнения» в 2019 году составляли 5816,34 млн м3, в сравнении с 2018 годом произошло сокращение на 1,59%. Данный показатель примерно соответствует 77,4% от общего водопотребления для нужд питьевого водоснабжения и бытового водоснабжения. Объемы орошения по видам экономической деятельности «Сельское, лесное, охотничье, рыболовное и рыбоводческое хозяйство» составляют 6710,21 млн м3 в 2019 г. (93,6% от общего объема водопользования для орошения).
Доля общей площади жилищ, оборудованных системой водоснабжения, увеличилась с 78% до примерно 82-83% с 2010 по 2019 годах.
По данным Росводресурсов, объем сточных вод, сбрасываемых в природные поверхностные воды Российской Федерации, в 2019 году составил 37666,22 млн м3, сократившись с 2018 года на 5,97%. За десятилетний период сокращение сброса произошло на 115252,11 млн м3 или на 23,43%.
В разрезе видов экономической деятельности в 2019 году наибольший объем сброса сточных вод в водоемы регистрируется по виду деятельности «Обеспечение электроэнергией, газом и паром; кондиционирование» – 54,7% от общего объема сброса сточных вод в РФ. Второе место по объему сброса сточных вод занимает вид деятельности «Водоснабжение, санитария, сбор и удаление отходов, мероприятия по ликвидации загрязнения» – 23,5% от общего объема сточных вод. Значительные объемы водоотведения зафиксированы в «Сельском хозяйстве, лесном хозяйстве, охоте и рыболовстве» (4406,9 млн м3 в 2019 году). В целом заметна тенденция к снижению объемов сброса сточных вод.
В структуре общего показателя сброса сточных вод по Российской Федерации в 2019 году наибольшую долю занимала нормативно чистая вода – 62,1%. Доля загрязненных сточных вод составила 32,8%, из этого количества было сброшено без очистки 18,0% всех загрязненных сточных вод, остальной объем сброса приходится на недостаточно очищенные загрязненные сточные воды). Сброс очищенных сточных вод составил 5,1% от общего показателя сброса всех сточных вод в природные поверхностные воды.
Анализ данных о сбросе загрязняющих веществ в сточных водах в поверхностные природные водоемы за 2010-2019 годы показал значительное снижение сброса подавляющего числа загрязняющих веществ в последние годы. В частности, за последние девять лет выбросы, учитываемые для фосфатов, сократились более чем в 11 раз, для аммонийного азота – почти в 6 раз, для ванадия – более чем в 3 раза и проч. В то же время произошло некоторое увеличение сброса ряда загрязняющих веществ: в частности, сброс для калия увеличился в 2,8 раз, для кальция – в 2 раза, для натрия – в 1,6 раза, для хлоридов – в 1,2 раза и проч.
В 2019 году доля всех источников централизованного питьевого водоснабжения, несоответствующих санитарно-эпидемиологическим требованиям, составила 14,93%, что на 5,3% ниже уровня 2012 года и на 2,4% выше уровня 2018 года. В 2019 году в список субъектов с источниками централизованного питьевого водоснабжения, соответствующими всем санитарно-эпидемиологическим требованиям, вошли: Санкт-Петербург и Севастополь, Воронежская и Астраханская области, республики Марий Эл и Алтай. Неблагоприятная санитарная обстановка в разрезе источников централизованного питьевого водоснабжения в 2019 г. зафиксирована в Чеченской Республике, где 99,1% источников не отвечают санитарно-эпидемиологическим требованиям, Республике Дагестан – 96,7%, Республике Карелия – 82,9%, Республике Калмыкия – 78,3%, Карачаево-Черкесской Республике – 65,5%.
Одной из основных причин неблагоприятной ситуации по качеству источников централизованного питьевого водоснабжения, как и в предыдущие годы, остается отсутствие установленных зон санитарной охраны. В 2019 году доля источников централизованного водоснабжения, у которых отсутствуют зоны санитарной охраны, составила 10,8%, сократившись на 1,1% и 0,4% по сравнению с 2012 г. и 2018 г. соответственно.
Водопроводная и распределительная сети
Данные контроля состояния водопроводов демонстрируют общее улучшение ситуации. Доля некачественных водопроводов в 2019 году составила 15,81%, оказавшись ниже уровня 2013 года на 2,0%, но выше показателя 2018 года на 0,5%. Основной причиной несоответствия водопроводов санитарно-эпидемиологическим требованиям является отсутствие необходимого комплекса очистных сооружений. За последние три года данная ситуация практически не изменилась.
Санитарно-эпидемиологическим требованиям в 2019 году полностью соответствовали все пробы воды водопроводов, эксплуатируемых на территориях городов Москвы, Санкт-Петербурга и Севастополя, Липецкой, Калужской и Томской областей, Камчатского края и Республики Хакасия. В 2019 году в число регионов с наиболее низкими показателями качества воды водопроводов по микробиологическим показателям вошли Чеченская Республика (50,0% отобранных проб не соответствовали гигиеническим нормативам), Республика Тыва (18,2%), Еврейская автономная область (17,1%), Республика Калмыкия (15,9%), Карачаево-Черкесская Республика (15,5%) и Республика Ингушетия (14,8%).
В 2019 году все пробы воды, отобранные из водопроводов в г. Севастополе, Республике Марий Эл, Карачаево-Черкесской Республике и Камчатском крае, соответствовали санитарным требованиям по санитарно-химическим показателям. При этом низкий уровень качества питьевой воды водопроводов по санитарно-химическим показателям наблюдался в 2019 году на территориях республик Мордовия (87,5%), Калмыкия (71,4%), Дагестан (51,8%), Еврейской автономной области (50,6%), Чеченской Республики (50,0%) и Ненецкого автономного округа (47,7%).
В 2019 году приоритетными загрязняющими веществами в субъектах Российской Федерации являлись:
- кремний (по Si) – Томская область, Тюменская область, Московская область;
- литий – Свердловская и Калужская области, Чувашская республика;
- хлор – Кемеровская и Московская области, Республика Дагестан;
- натрий – Свердловская область, Республика Калмыкия, Ростовская область;
- хлороформ – Волгоградская область, Псковская область, Республика Карелия;
- магний – Ростовская область, Иркутская область, Самарская область;
- бор – Курганская область, Московская область, Пензенская область;
- марганец – Ненецкий автономный округ, Еврейская автономная область и Новосибирская область;
- стронций – Калужская область, Орловская область, Тульская область;
- сульфиды и сероводород (по h3S) – Ростовская область, Краснодарский край, Нижегородская область.
В 2019 году количество населения Российской Федерации, обеспеченного нецентрализованным питьевым водоснабжением, достигло 8,421 млн чел, что на 181,7 тыс. человек меньше, чем в 2018 г. – при этом большая часть (свыше 6,641 млн чел.) проживает в сельских поселениях. За период 2012-2019 годы численность населения, обеспеченного питьевой водой из систем нецентрализованного водоснабжения, увеличилась более чем на 3,181 млн чел., а число источников нецентрализованного водоснабжения, несоответствующих санитарно-эпидемиологическим требованиям, снизилось за тот же период на 7,588 тыс. единиц. Доля источников нецентрализованного водоснабжения, которые не отвечают санитарно-эпидемиологическим требованиям, снизилась за 2012-2019 г. на 2,39%, в том числе в сельских поселениях – на 2,42%.
В период 2013-2019 гг. отмечена устойчивая тенденция к улучшению качества воды нецентрализованного водоснабжения как по санитарно-химическим, так и по микробиологическим показателям. Уменьшилась доля проб воды нецентрализованного питьевого водоснабжения с превышением гигиенических нормативов по санитарно-химическим показателям на 1,11%, по микробиологическим – на 1,95%, при этом по паразитологическим она увеличилась на 0,07%.
Благоприятная ситуация относительно качества питьевой воды по санитарно-химическим показателям в 2019 г. сложилась на территориях г. Санкт-Петербурга, Карачаево-Черкесской Республики и Республики Ингушетия, Ставропольского и Камчатского краев. Менее 5% проб воды нецентрализованного водоснабжения, несоответствующих санитарным требованиям по санитарно-химическим показателям, было отобрано в 2019 г. в Кемеровской области (3,03%), Республике Крым (3,64%), Оренбургской области (3,77%), Республике Марий Эл (4,35%), Республике Алтай (4,46%) и Сахалинской области (4,76%). Максимальный уровень по этому показателю был зафиксирован в Чеченской Республике (100% проб с превышениями), городе Москве (71,72%), Новосибирской области (68,52%), Республике Коми (67,24%) и Самарской области (64,35%).
Наиболее благополучная обстановка в разрезе качества питьевой воды нецентрализованного водоснабжения по микробиологическим показателям в 2019 г. Была отмечена на территориях г. Санкт-Петербурга, Камчатского и Ставропольского краев, менее благополучная – в Оренбургской области (0,21% проб воды с превышением гигиенических нормативов по микробиологическим показателям), Тюменской (2,38%) и Кемеровской (2,86%) областях. Наиболее высокий уровень данного показателя зафиксирован на территориях следующих регионов:
- в Еврейской автономной области 69,51% проб питьевой воды нецентрализованного водоснабжения не соответствовали санитарно-эпидемиологическим требованиям по микробиологическим показателям;
- в Карачаево-Черкесской Республике – 68,0%;
- в Смоленской области – 47,26%;
- в Тверской области – 46,77%.
В 2019 году количество дополнительных случаев заболеваемости, связанных с загрязнением питьевой воды, снизилось на 0,62% и 22,10% по сравнению с 2018 годом и 2012 годом соответственно. В целом по Российской Федерации число дополнительных случаев смерти от всех причин, связанных с неудовлетворительным качеством воды систем централизованного питьевого водоснабжения, по оценкам составило 8,52 случая на 100 тыс. населения – 0,7% от количества всех смертей.
В целом по Российской Федерации число дополнительных случаев заболеваний, связанных с загрязнением питьевой воды, вероятностно составило в 2019 году 1149,3 случаев на 100 тыс. всего населения и 2031,9 случаев на 100 тыс. детского населения, что составляет соответственно 1,47% и 1,23% от показателя общей заболеваемости населения соответствующего возраста.
Наибольший вклад в формирование дополнительных случаев заболеваемости, ассоциированной с качеством воды системы централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения по санитарно-химическим показателям, вносят превышения гигиенических нормативов содержания в питьевой воде мышьяка и никеля, хлора, хлороформа, а также микробиологическое загрязнение воды.
С полным текстом доклада можно ознакомиться на сайте Минприроды РФ: https://www.mnr.gov.ru/
Выбор партнера и сигнатуры экспрессии генов, связанные с адаптацией к питанию у средиземноморской мухи (Ceratitis capitata)
Schluter, D. Экология адаптивной радиации . (Издательство Оксфордского университета, 2000).
Рандл, Х. Д. и Носил, П. Экологическое видообразование. Ecol. Lett. 8 , 336–352 (2005).
Артикул Google Scholar
Койн, Дж.А. и Орр, Х. А. Видообразование . (Sinauer Associates, 2004).
Федер, Дж. Л. и др. . Верность хозяину — это эффективный барьер для преждевременного спаривания между симпатрическими расами яблочной мухи личинки. Proc. Natl. Акад. Sci. США 91 , 7990–4 (1994).
ADS CAS PubMed Статья Google Scholar
Пауэлл, Т. Х. К., Форбс, А. А., Худ, Г. Р., Федер, Дж.L. Экологическая адаптация и репродуктивная изоляция симпатрии: генетические и фенотипические данные для местных рас-хозяев Rhagoletis pomonella. Мол. Ecol. 23 , 688–704 (2014).
PubMed Статья Google Scholar
Nosil, P. et al. . Геномные последствия множественных процессов видообразования у палочника. Proc. R. Soc. В 279 , 5058–65 (2012).
PubMed Статья Google Scholar
Сориа-Карраско, В. и др. . Геномы палочников показывают роль естественного отбора в параллельном видообразовании. Наука 344 , 738–42 (2014).
ADS CAS PubMed Статья Google Scholar
Linn, C. et al. . Распознавание запаха фруктов и формирование симпатрической расы хозяев у Rhagoletis. Proc. Natl. Акад. Sci. США 100 , 11490–11493 (2003).
ADS CAS PubMed Статья Google Scholar
Etges, W. J. Без границ: геномы, организмы и экологические взаимодействия, ответственные за дивергенцию и репродуктивную изоляцию. J. Hered. 105 , 756–770 (2014).
PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Peccoud, J. & Simon, J.-C.Комплекс гороховой тли как модель экологического видообразования. Ecol. Энтомол. 35 , 119–130 (2010).
Артикул Google Scholar
Peccoud, J., Ollivier, A., Plantegenest, M. & Simon, J.-C. Континуум генетической дивергенции от симпатрических рас хозяев к видам в комплексе гороховой тли. Proc. Natl. Акад. Sci. США 106 , 7495–7500 (2009).
ADS CAS PubMed Статья Google Scholar
Дамброски, Х. Р. и Федер, Дж. Л. Растение-хозяин и изменение диапаузы в зависимости от широты у Rhagoletis pomonella: тест на многогранную адаптацию жизненного цикла на разных этапах развития диапаузы. J. Evol. Биол. 20 , 2101–2112 (2007).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Носил П. Адаптация дивергентных растений-хозяев и репродуктивная изоляция между экотипами трости Timema cristinae. г. Nat. 169 , 151–62 (2007).
PubMed Статья Google Scholar
Панхуис Т. М., Бутлин Р., Зук М. и Трегенза Т. Половой отбор и видообразование. Trends Ecol. Evol. 16 , 364–371 (2001).
PubMed Статья Google Scholar
Бутлин Р. и др. . Что нам нужно знать о видообразовании? Trends Ecol.Evol. 27 , 27–39 (2012).
PubMed Статья Google Scholar
Сафран, Р. Дж., Скордато, Э. С. С., Саймс, Л. Б., Родригес, Р. Л. и Мендельсон, Т. К. Вклад естественного и полового отбора в эволюцию репродуктивной изоляции беременных: программа исследований. Trends Ecol. Evol. 28 , 643–650 (2013).
PubMed Статья Google Scholar
Маан М. Э. и Зеехаузен О. Экология, половой отбор и видообразование. Ecol. Lett. 14 , 591–602 (2011).
PubMed Статья Google Scholar
Зеехаузен, О. и др. . Геномика и происхождение видов. Nat. Преподобный Жене. 15 , 176–192 (2014).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Элмер, К. Р. и Мейер, А. Адаптация в эпоху экологической геномики: понимание параллелизма и конвергенции. Trends Ecol. Evol. 26 , 298–306 (2011).
PubMed Статья Google Scholar
Саволайнен О., Ласку М. и Мерила Дж. Экологическая геномика локальной адаптации. Nat. Преподобный Жене. 14 , 807–820 (2013).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Носил, П. Экологическая спецификация . (Издательство Оксфордского университета, 2012 г.).
Райс, W. R. & Hostert, E. E. Лабораторные эксперименты по видообразованию: что мы узнали за 40 лет? Evolution. 47 , 1637 (1993).
PubMed Статья Google Scholar
Kawecki, T. J. et al. . Экспериментальная эволюция. Trends Ecol. Evol. 27 , 547–560 (2012).
PubMed Статья Google Scholar
Шлёттерер, К., Кофлер, Р., Версаче, Э., Тоблер, Р. и Франссен, С. У. Сочетание экспериментальной эволюции с секвенированием следующего поколения: мощный инструмент для изучения адаптации на основе постоянной генетической изменчивости. Наследственность. 114 , 431–440 (2015).
PubMed Статья Google Scholar
Ремолина, С. К., Чанг, П. Л., Лейпс, Дж., Нуждин, С. В. и Хьюз, К. А. Геномные основы старения и эволюции жизненного цикла у Drosophila melanogaster. Evolution. 66 , 3390–3403 (2012).
PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Пейви, С. А., Коллин, Х., Носил, П. и Роджерс, С. М. Роль экспрессии генов в экологическом видообразовании. Ann. Акад. Sci. 1206 , 110–129 (2010).
ADS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Etges, W. J., De Oliveira, C. C., Ritchie, M. G. & Noor, M. A. F. Генетика зарождающегося видообразования у Drosophila mojavensis: II. растения-хозяева и статус спаривания влияют на экспрессию кутикулярных углеводородов qtl и взаимодействия g × e. Evolution. 63 , 1712–1730 (2009).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Etges, W. J. et al. . Генетика зарождающегося видообразования у Drosophila mojavensis. I. Брачная песня самца, успех спаривания и взаимодействие генотипа X с окружающей средой. Evolution. 61 , 1106–1119 (2007).
PubMed Статья Google Scholar
Мацкин, Л.М. Популяционная транскриптомика сдвигов кактусов-хозяев у Drosophila mojavensis. Мол. Ecol. 21 , 2428–2439 (2012).
PubMed Статья Google Scholar
Rajpurohit, S., Oliveira, C. C., Etges, W. J. & Gibbs, A. G. Функциональные геномные и фенотипические реакции на высыхание в естественных популяциях пустынных дрозофилидов. Мол. Ecol. 22 , 2698–2715 (2013).
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Etges, W.J. и др. . Расшифровка транскриптомов истории жизни в различных средах. Мол. Ecol. 24 , 151–179 (2015).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Левинсон, Х. З., Левинсон, А. Р. и Мюллер, К. Влияние некоторых обонятельных и оптических свойств плодов на местоположение хозяина средиземноморской плодовой мухой (Ceratitis capitata, Wied.). J. Appl. Энтомол. 109 , 44–54 (1990).
Артикул Google Scholar
Yuval, B. & Hendrichs, J. In Плодовые мухи (Tephritidae): филогения и эволюция поведения (редакторы Aluja, M. & Norrbom, AL) 137, 429–457 (CRC Press LLC, 2000).
Прокопи, Р. Р. Дж., Макдональд, П. Т. и Вонг, Т. Т. Y. Межпопуляционная изменчивость среди мух Ceratitis capitata в характере принятия хозяина. Энтомол. Exp. Прил. 35 , 65–69 (1984).
Артикул Google Scholar
Крайнакер Д. А., Кэри Дж. Р. и Варгас Р. И. Влияние личиночного хозяина на характеристики жизненного цикла средиземноморской плодовой мухи, Ceratitis capitata. Oecologia 73 , 583–590 (1987).
ADS CAS PubMed Статья Google Scholar
Кэри, Дж. Р. Демографические исследования конкретных хозяев средиземноморской плодовой мухи Ceratitis capitata. Ecol. Энтомол. 9 , 261–270 (1984).
Артикул Google Scholar
Zucoloto, F. S. Адаптация популяции Ceratitis capitata Diptera, Tephritidae к диете на основе животного белка. Энтомол. Exp. Прил. 67 , 119–127 (1993).
Артикул Google Scholar
Нэш, У. Дж. И Чепмен, Т. Влияние пищевых компонентов на характеристики жизненного цикла личинок средиземноморской мухи (Ceratitis capitata: Diptera, Tephritidae). PLoS One 9 , e86029 (2014).
ADS PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar
Ликвидо, Н. Дж., Шинода, Л. А. и Каннингем, Р. Т. Растения-хозяева средиземноморской плодовой мухи (Diptera: Tephritidae): аннотированный мировой обзор . (Энтомологическое общество Америки, 1991).
Nyamukondiwa, C., Kleynhans, E. & Terblanche, J.S. Фенотипическая пластичность термостойкости способствует инвазии средиземноморских плодовых мух (Ceratitis capitata). Ecol. Энтомол. 35 , 565–575 (2010).
Артикул Google Scholar
Gasperi, G. et al. . Генетическая дифференциация, поток генов и происхождение заражений средиземноморской мухой, Ceratitis capitata. Genetica 116 , 125–135 (2002).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Малакрида, А. Р. и др. . Глобализация и вторжение и распространение плодовых мух: парадигма средиземноморской мухи. Genetica 131 , 1–9 (2007).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Diamantidis, A. D., Papadopoulos, N. T. & Carey, J. R. Популяции средиземноморских мух различаются по толщине и возрастным паттернам сексуальных сигналов. Энтомол. Exp. Прил. 128 , 389–397 (2008).
PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Diamantidis, A. D. et al. . Эволюция истории жизни в глобально вторгающемся тефритиде: модели выживания и размножения средиземноморских мух из шести регионов мира. Biol. J. Linn. Soc. 97 , 106–117 (2009).
Артикул Google Scholar
Diamantidis, A.Д., Кэри, Дж. Р., Накас, К. Т. и Пападопулос, Н. Т. Популяции предков лучше работают в новых условиях: Одомашнивание средиземноморских популяций плодовых мух из пяти регионов мира. Biol. J. Linn. Soc. 102 , 334–345 (2011).
Артикул Google Scholar
Диамантидис А. Д., Кэри Дж. Р. и Пападопулос Н. Т. Эволюция жизненного цикла инвазивного тефрита. J. Appl. Энтомол. 132 , 695–705 (2008).
Артикул Google Scholar
Briceño, RD, Eberhard, WG, Vilardi, JC, Liedo, P. & Shelly, TE Вариации в прерывистых жужжащих песнях самцов средиземноморской мухи (Diptera: Tephritidae), связанные с географией, массовым выращиванием и ухаживанием успех. Флорида Энтомол. 85 , 32–40 (2002).
Артикул Google Scholar
Брисеньо, Р. Д., Эберхард, В. Г., Виларди, Дж., Кайол, Дж. И Шелли, Т. Брачное поведение различных диких штаммов Ceratitis capitata (Diptera: Tephritidae). Флорида Энтомол. 90 , 15–18 (2007).
Артикул Google Scholar
Karsten, M., J van Vuuren, B., Addison, P. & Terblanche, JS Деконструкция гипотез межконтинентального пути вторжения средиземноморской плодовой мухи ( Ceratitis capitata ) с использованием подхода байесовского вывода: are port протоколы перехвата и карантина успешно предотвращают новые вторжения? Дайверы.Дистриб . 1–13 (2015).
Додд, Д. М. Б. Репродуктивная изоляция как следствие адаптивной дивергенции у Drosophila pseudoobscura. Evolution. 43 , 1308 (1989).
PubMed Статья Google Scholar
Рандл, Х. Д., Ченовет, С. Ф., Даути, П. и Блоуз, М. У. Дивергентный отбор и эволюция сигнальных признаков и брачных предпочтений. PLoS Biol. 3 , e368 (2005).
PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar
Кайол, Дж. П., Коронадо, П., Тахер, М. и Кайол. Половая совместимость средиземноморской мухи (Diptera: Tephritidae) разного происхождения. Флорида Энтомол. 85 , 51–57 (2002).
Артикул Google Scholar
Leftwich, P.Т., Нэш, У. Дж., Френд, Л. А. и Чепмен, Т. Адаптация к дивергентным рационам личинок средиземноморской мухи Ceratitis capitata. Evolution. 71 , 289–303 (2017).
PubMed Статья Google Scholar
Моррисон, Н. И. и др. . Сексуальная конкурентоспособность трансгенного штамма средиземноморской плодовой мухи Ceratitis capitata. Энтомол. Exp. Прил. 133 , 146–153 (2009).
CAS Статья Google Scholar
Leftwich, P. T., Clarke, N. V. E., Hutchings, M. I. & Chapman, T. Ответ Обадии и др. .: Влияние метилпарабена на взаимодействия хозяина и микробиоты у Drosophila melanogaster. Proc. Natl. Акад. Sci. США 115 , E4549 – E4550 (2018).
PubMed Статья Google Scholar
Миятаке Т., Чепмен Т. и Партридж Л. Ингибирование повторного спаривания у самок средиземноморских плодовых мух Ceratitis capitata, вызванное спариванием. J. Insect Physiol. 45 , 1021–1028 (1999).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Mohorianu, I. et al. . Сравнение альтернативных подходов к анализу многоуровневых данных RNA-seq. PLoS One 12 , e0182694 (2017).
PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar
Mohorianu, I. et al. . Геномные реакции на социально-сексуальную среду у самцов Drosophila melanogaster, подвергнутых воздействию конкурентов сородича. РНК 23 , 1048–1059 (2017).
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Mohorianu, I. и др. . Профилирование коротких РНК во время развития мясистых плодов позволяет выявить стадийно-специфические паттерны экспрессии sRNAome. Plant J. 67 , 232–246 (2011).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Prüfer, K. et al . PatMaN: быстрое сопоставление коротких последовательностей с большими базами данных. Биоинформатика 24 , 1530–1531 (2008).
PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar
Болстад, Б. М., Иризарри, Р. А., Остранд, М. и Спид, Т. П. Сравнение методов нормализации для данных массива олигонуклеотидов высокой плотности на основе дисперсии и смещения. Биоинформатика 19 , 185–193 (2003).
CAS Статья Google Scholar
О’Лири, Н.А. и др. . База данных эталонных последовательностей (RefSeq) в NCBI: текущий статус, таксономическое расширение и функциональная аннотация. Nucleic Acids Res. 44 , D733 – D745 (2016).
PubMed Статья CAS Google Scholar
Альтшул, С. Ф., Гиш, В., Миллер, В., Майерс, Э. У. и Липман, Д. Дж. Базовый инструмент поиска локального совмещения. J. Mol. Биол. 215 , 403–410 (1990).
CAS Статья Google Scholar
Рейманд, Дж. и др. . g: Profiler — веб-сервер для функциональной интерпретации списков генов (обновление 2016 г.). Nucleic Acids Res. 44 , W83 – W89 (2016).
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Scolari, F. et al. . Транскрипционные профили генов, отвечающих за спаривание, из семенников и мужских дополнительных желез средиземноморской плодовой мухи Ceratitis capitata. PLoS One 7 , e46812 (2012).
ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Корамутла, М. К., Аминеди, Р. и Бхаттачарья, Р. Комплексная оценка возможных референсных генов для исследований экспрессии генов с помощью qRT-PCR экспрессии генов у горчичной тли Lipaphis erysimi (Kalt). Sci. Отчет 6 , 25883 (2016).
ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Ye, J. et al. . Primer-BLAST: инструмент для разработки целевых праймеров для полимеразной цепной реакции. BMC Bioinformatics 13 , 134 (2012).
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Casares, P. et al. . Распутывание влияния склонности к спариванию и выбора спаривания у дрозофилы. Evolution. 52 , 126–133 (1998).
PubMed Статья Google Scholar
Койн, Дж. А., Элвин, С. и Ролан-Альварес, Э. Влияние дизайна эксперимента на исследования половой изоляции дрозофилы: прямые эффекты и сравнение с данными полевой гибридизации. Evolution. 59 , 2588 (2005).
PubMed Статья Google Scholar
Карвахаль-Родригес, А. и Ролан-Альварес, Э.JMATING: программа для анализа эффектов полового отбора и сексуальной изоляции на основе данных о частоте спариваний. BMC Evol. Биол . 6 (2006).
Ролан-Альварес, Э. и Кабальеро, А. Оценка эффектов полового отбора и сексуальной изоляции на основе частоты спариваний. Evolution. 54 , 30–36 (2000).
PubMed Статья Google Scholar
Rolán-Alvarez, E.Эволюция асимметрии в сексуальной изоляции: критика тестового примера. Evol. Ecol. Res. 6 , 1099–1106 (2004).
Google Scholar
Дьюи, М. мета-карта: метаанализ значений значимости. (2016).
Основная группа разработчиков R, R. R: Язык и среда для статистических вычислений. R Фонд статистических вычислений , https://doi.org/10.1007/978-3-540-74686-7 (2015).
Кэмерон П., Хирои М., Нгаи Дж. И Скотт К. Молекулярная основа вкуса воды у дрозофилы. Природа 465 , 91–95 (2010).
ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Knight, D. et al. . Равновесный переносчик нуклеозидов 2 регулирует ассоциативное обучение и синаптическую функцию у дрозофилы. J. Neurosci. 30 , 5047–5057 (2010).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Дэниэлсон, П. Б., Фостер, Дж. Л. М., Купер, С. К. и Фоглеман, Дж. С. Разнообразие экспрессируемых генов цитохрома Р450 у взрослых средиземноморских плодовых мух, Ceratitis capitata. Insect Mol. Биол. 8 , 149–159 (1999).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Мэйр, В., Пайпер, М. Д. У. и Партридж, Л. Калории не объясняют увеличение продолжительности жизни дрозофилы ограничением в питании. PLoS Biol. 3 , e223 (2005).
PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar
Росс, Дж., Цзян, Х., Каност, М. Р. и Ван, Ю. Сериновые протеазы и их гомологи в геноме Drosophila melanogaster: первоначальный анализ сохранения последовательности и филогенетических отношений. Gene 304 , 117–131 (2003).
CAS Статья Google Scholar
Дворкин И. и Джонс К. Д. Генетические изменения, сопровождающие эволюцию специализации хозяина у Drosophila sechellia. Генетика 181 , 721–736 (2009).
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Wurmser, F. и др. . Транскриптомика популяции: выводы из Drosophila simulans, Drosophila sechellia и их гибридов. Genetica 139 , 465–477 (2011).
PubMed Статья Google Scholar
Guillén, Y. et al. . Геномика экологической адаптации кактофильных дрозофил. Genome Biol. Evol. 7 , 349–366 (2014).
PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar
Каспи Р., Моссинсон С., Дрезнер Т., Каменский Б. и Юваль Б. Влияние личиночной диеты на темпы развития и репродуктивное созревание самцов и самок средиземноморских плодовых мух. Physiol. Энтомол. 27 , 29–38 (2002).
Артикул Google Scholar
Арита, Л. Х. и Канеширо, К. Ю. Размер тела и различный успех спаривания между самцами двух популяций средиземноморской плодовой мухи. Pacific Sci. 42 , 173–177 (1988).
Google Scholar
Davidowitz, G. & Nijhout, H. F. Физиологические основы норм реакции: взаимодействие между скоростью роста, продолжительностью роста и размером тела. Integr. Комп. Биол. 44 , 443–449 (2004).
PubMed Статья Google Scholar
Эдгар Б.А. Как мухи достигают своего размера: генетика встречается с физиологией. Nat. Преподобный Жене. 7 , 907–916 (2006).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Мацкин, Л. М., Джонсон, С., Пэйт, С. и Маркоу, Т. А. Родительский рацион Preadult влияет на развитие потомства и метаболизм у Drosophila melanogaster. PLoS One 8 , e59530 (2013).
ADS CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
May, C. M., Doroszuk, A. & Zwaan, B. J. Влияние развивающего питания на продолжительность жизни и плодовитость зависит от репродуктивной среды взрослых особей Drosophila melanogaster. Ecol. Evol. 5 , 1156–1168 (2015).
PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Гершони М., Темплтон А. Р. и Мишмар Д. Митохондриальная биоэнергетика как основная движущая сила видообразования. BioEssays 31 , 642–650 (2009).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Баллард, Дж. У. О. и Мелвин, Р. Г. Связывание митохондриального генотипа с фенотипом организма: приглашенный обзор. Мол. Ecol. 19 , 1523–1539 (2010).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Трудель, М., Tremblay, A., Schetagne, R. & Rasmussen, J. B. Почему карликовые рыбы такие маленькие? Энергетический анализ полиморфизма озерного сига (Coregonus clupeaformis). банка. J. Fish. Акват. Sci. 58 , 394–405 (2001).
Артикул Google Scholar
Нольте, А. В., Рено, С. и Бернатчез, Л. Расхождение в регуляции генов на молодых этапах жизненного цикла сига (Coregonus sp.) И появление геномной изоляции. BMC Evol. Биол. 9 , 59 (2009).
PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar
Evans, M. L. & Bernatchez, L. Транскрипция гена окислительного фосфорилирования в парах видов сига выявляет закономерности параллельной и непараллельной физиологической дивергенции. J. Evol. Биол. 25 , 1823–1834 (2012).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Дером Н., Дюшен П. и Бернатчез Л. Параллелизм в транскрипции генов у симпатрических экотипов озерного сига (Coregonus clupeaformis Mitchill). Мол. Ecol. 15 , 1239–1249 (2006).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Сент-Сир, Дж., Дером, Н. и Бернатчез, Л. Транскриптомика компромиссов между жизненным циклом в парах видов сигов (Coregonus sp.). Мол. Ecol. 17 , 1850–1870 (2008).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Jeukens, J., Renaut, S., St-Cyr, J., Nolte, AW & Bernatchez, L. Транскриптомика расхождения симпатрических карликовых и нормальных озерных сигов (Coregonus clupeaformis spp., Salmonidae) как выявлено секвенированием следующего поколения. Мол. Ecol. 19 , 5389–5403 (2010).
PubMed Статья Google Scholar
Renaut, S., Nolte, A. W. & Bernatchez, L. Разработка последовательностей транскриптомов для выявления адаптивных однонуклеотидных полиморфизмов в парах видов озерных сигов (Coregonus spp. Salmonidae). Мол. Ecol. 19 , 115–131 (2010).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Дике М. и Сабелис М. В. В Химическая экология насекомых: эволюционный подход 122–155 (Chapman & Hall, 1988).
Юренка Р. Биосинтез феромонов насекомых. Верх. Curr. Chem. 239 , 97–132 (2004).
CAS PubMed Статья Google Scholar
McBride, C. S. & Arguello, J. R. Пять геномов дрозофилы обнаруживают ненейтральную эволюцию и характерную специализацию хозяина в суперсемействе хеморецепторов. Генетика 177 , 1395–1416 (2007).
CAS PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Смаджа, К. и Бутлин, Р. К. Об запахе видообразования: хемосенсорная система и ее роль в изоляции перед беременностью. Наследственность. 102 , 77–97 (2009).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Галиндо К. и Смит Д. П. Большое семейство дивергентных белков, связывающих запахи дрозофилы, экспрессируемых во вкусовых и обонятельных сенсиллах. Генетика 159 , 1059–1072 (2001).
CAS PubMed PubMed Central Google Scholar
Кларк, А. Г. и др. . Эволюция генов и геномов в филогении дрозофилы. Природа 450 , 203–218 (2007).
ADS PubMed Статья CAS Google Scholar
Lux, S. A. et al. . Согласованность в характере ухаживания среди популяций средиземноморской мухи (Diptera: Tephritidae): сравнение диких штаммов и штаммов, массово выращенных для операций по МСН. Флорида Энтомол. 85 , 113 (2002).
Артикул Google Scholar
Диамантидис, А. Д., Кэри, Дж. Р., Накас, К. Т. и Пападопулос, Н. Т. Демография популяций и потенциал инвазии средиземноморской мухи. Ecol. Evol. 1 , 479–488 (2011).
PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Малакрида, А. Р. и др. . Генетические аспекты всемирного процесса колонизации Ceratitis capitata. J. Hered. 89 , 501–7 (1998).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Уилсон, Дж. Р. У., Дормонт, Э. Э., Прентис, П. Дж., Лоу, А. Дж. И Ричардсон, Д. М. Что-то в том, как вы двигаетесь: пути рассредоточения влияют на успех вторжения. Trends Ecol. Evol. 24 , 136–144 (2009).
PubMed Статья Google Scholar
Barrett, T. et al. . NCBI GEO: Архив наборов данных функциональной геномики — Обновление. Nucleic Acids Res. 41 , D991 – D995 (2013).
CAS PubMed Статья Google Scholar
Низкомолекулярный миметик BDNF, димерный дипептид GSB-106, обращает симптомы депрессии при стрессе хронического социального поражения у мышей
Биомолекулы.2021 фев; 11 (2): 252.
Philippe De Deurwaerdère, научный редактор
Получено 30 декабря 2020 г .; Принято 5 февраля 2021 г.
Лицензиат MDPI, Базель, Швейцария. Эта статья представляет собой статью в открытом доступе, распространяемую в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution (CC BY) (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/). Эта статья цитировалась другими статьями в PMC. .- Заявление о доступности данных
Наборы данных во время и / или проанализированные в ходе текущего исследования доступны от соответствующего автора по разумному запросу.
Abstract
В нашей научной группе был разработан и синтезирован миметик петли 4 BDNF, бис (N-моносукцинил-L-серил-L-лизин) гексаметилендиамид, названный GSB-106. Соединение активировало TrkB, MAPK / ERK, PI3K / AKT и PLCγ в экспериментах in vitro. Эксперименты in vivo на грызунах показали его антидепрессантоподобную активность в тестах принудительного плавания и подвешивания за хвост в диапазоне доз 0,1–5,0 мг / кг (внутрибрюшинно, перорально). Однако GSB-106 не изучался на моделях депрессии, модулирующих большую депрессию у людей.В настоящем исследовании антидепрессантоподобная активность GSB-106 была выявлена у мышей на модели депрессии, вызванной 28-дневным стрессом социального поражения при пероральном приеме в течение 21 дня (0,1 мг / кг) после стресса. В то же время GSB-106 восстановил сниженную двигательную активность и полностью устранил проявления ангедонии. Соединение также восстанавливало пониженные уровни синаптофизина и CREB в гиппокампе. Кроме того, было обнаружено, что антагонист рецептора Trk K252A и ингибитор PLC U73122 полностью блокируют антидепрессантоподобную активность GSB-106 в тесте принудительного плавания на мышах.Таким образом, настоящие результаты демонстрируют, что дипептидный миметик BDNF GSB-106 обращает вспять депрессивно-подобное поведение и восстанавливает нейропластичность гиппокампа на модели депрессии на грызунах. Эти эффекты GSB-106, вероятно, регулируются передачей сигналов TrkB.
Ключевые слова: BDNF, дипептидный миметик, GSB-106, антидепрессантоподобная активность, стресс хронического социального поражения
1. Введение
Согласно современным представлениям, передача сигналов BDNF-TrkB, связанная с поддержанием нейропластичности, играет ключевую роль в патогенез и лечение депрессивного расстройства [1].BDNF является ключевым регулятором синаптогенеза, нейро / глиогенеза и синаптической пластичности — процессов, лежащих в основе нейропластичности [2,3]. BDNF при внутримозговом введении оказывает длительное действие, подобное антидепрессанту, в экспериментальных моделях депрессии [4].
Однако клиническое использование BDNF ограничено из-за его плохих фармакокинетических свойств и нежелательных побочных эффектов. Создание низкомолекулярных миметиков, которые обладали бы терапевтическими эффектами полноразмерного нейротрофина и были бы лишены его недостатков, кажется оптимальным способом преодоления этих проблем.Низкомолекулярные миметики BDNF разрабатываются рядом научных групп [5,6].
Был разработан и синтезирован миметик петли 4 BDNF GSB-106, представляющий собой замещенный димерный дипептид бис (N-моносукцинил-L-серил-L-лизин) гексаметилендиамид. Закусова [7]. Ранее было обнаружено, что GSB-106 активирует рецептор TrkB и его основные пути передачи сигнала: MAPK / ERK, PI3K / AKT и PLCγ [8,9]. Антидепрессивная активность GSB-106 была выявлена в тесте принудительного плавания и тесте подвешивания за хвост у крыс и мышей при внутрибрюшинном (т.п.) (0,1–1,0 мг / кг) и перорально (0,5–5,0 мг / кг) [10,11]. Способность GSB-106 стимулировать синапто- и нейрогенез в гиппокампе была показана в экспериментах на мышах [12,13]. Однако GSB-106 ранее не изучался в моделях депрессии, модулирующих большую депрессию у людей. Поэтому целью настоящего исследования было изучить эффекты GSB-106 на модели стресса хронического социального поражения у мышей после трех недель перорального введения. Хронический социальный стресс у мышей — одна из наиболее подходящих моделей депрессии, поскольку она имеет хорошую прогностическую ценность и феноменологическое и патофизиологическое сходство с депрессивным расстройством [14].Эта модель была использована для изучения эффектов GSB-106 на предпочтение сахарозы и двигательную активность, а также на содержание синаптического маркера синаптофизина и маркера нейропластичности CREB в гиппокампе. Мы выбрали гиппокамп в качестве основной структуры мозга, претерпевающей нейродегенеративные изменения при депрессии. Продолжительность введения GSB-106 соответствовала продолжительности полного цикла нейрогенеза.
Эффекты антагониста рецептораTrkB K252A и ингибитора PLCγ U73122 на антидепрессивную активность GSB-106 в тесте принудительного плавания были изучены для подтверждения BDNF-подобного механизма действия дипептида.
2. Материалы и методы
2.1. Животные
Самцов мышей C57BL / 6 (10 недель) массой 19–25 г и мышей-самцов BALB / c (8 недель) массой 20–22 г были получены из филиала животноводческого хозяйства «Столбовая» ФГБУН им. Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства, Россия. Всех животных содержали при 12-часовом цикле темнота / свет, температуре 22 ° C ± 2 ° C и влажности 60 ± 10%. Всех мышей посадили на стандартную диету с неограниченным доступом к пище и воде.Исследование проводилось в соответствии с требованиями Приказа Минздрава РФ от 1 апреля 2016 г. №199 «Об утверждении Правил надлежащей лабораторной практики» и ГОСТ 33215-2014 «Правила содержания и ухода за животными. Окружающая среда, жилье и управление »(http://protect.gost.ru/document.aspx?control=7&id=202494 (по состоянию на 5 апреля 2019 г.)) и Директиве 2010/63 / ЕС Европейского парламента и Совета 22 сентября 2010 г. «О защите животных, используемых в научных целях.«Животные содержались в соответствии с санитарно-эпидемиологическими правилами 2.2.1.3218-14« О санитарно-эпидемиологических требованиях к устройству, оборудованию и содержанию экспериментальных биологических клиник (вивариев) », утвержденных Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации № 51 от 29 августа 2014 г. Все эксперименты были одобрены Комитетом по содержанию и использованию животных VV. Закусова, Москва (приказ № 5А от 26 апреля 2019 г.).
2.2. Chemicals
GSB-106, бис (N-моносукцинил-L-серил-L-лизин) гексаметилендиамид, синтезирован в отделении медицинской химии Московского государственного медицинского университета им. Закусова, как описано ранее [7]. Лекарственная форма ГСБ-106 для перорального применения разработана и изготовлена в Опытно-технологическом отделении ФГБУН им. Закусова (Патент РФ 2697254. Дата приоритета: 28 февраля 2018 г. Опубл. 13 августа 2019 г.) и содержала 1% ГСБ-106 и 99% наполнителя, состоящего из лактозы, микрокристаллической целлюлозы, сополимера полиэтиленгликоля и поливинилового спирта. и стеарат магния.
Реагент Фолина был приобретен у Merck KGaA (Дармштадт, Германия), бычий сывороточный альбумин (BSA), коктейль ингибиторов протеаз, Na 3 VO 4 , K252A, 1- (6 — ((17-3-metxyestra- 1,3,5 (10) -триен-17-ил) амино) гексил) -1H-пиррол-2,5-дион (U73122) были приобретены у Sigma Aldrich Co., Ltd. (Сент-Луис, Миссури, США. ). Додецилсульфат натрия (SDS), Tween-20, TEMED, бис-акриламид, Tris, DTT-дитиотреитол, EDTA, Triton X-100, глицерин были приобретены в Bio-Rad Laboratories (Hercules, CA, USA).Na-дезоксихолат был приобретен у AppliChem GmbH (Дармштадт, Германия). Первичные поликлональные антитела против синаптофизина были приобретены у BD Biosciences (Сан-Хосе, Калифорния, США), против CREB, фосфо-CREB был приобретен у Cell Signaling Technology (Данверс, Массачусетс, США), против бета-актина был приобретен у Abcam (Кембридж, США). ВЕЛИКОБРИТАНИЯ). Вторичные антитела против кроличьего IgG, конъюгированные с пероксидазой хрена, были приобретены в Abcam (Кембридж, Великобритания). Амитриптилин был приобретен на Московском эндокринном заводе (Москва, Россия).
2.3. Процедура хронического социального стресса (CSDS)
Хронический стресс социального поражения у самцов мышей C57Bl / 6 моделировали в соответствии с международными протоколами [14,15]. Подопытных мышей-самцов содержали парами в клетках (28 × 14 × 10 см), разделенных пополам перфорированной перегородкой из оргстекла, по одной мыши на отсек. Разделитель удаляли на 10 минут ежедневно, позволяя животным иметь прямой контакт. Одна из мышей выступила «агрессором», а вторая — «жертвой». В случае чрезмерно агрессивных атак агрессора (укус продолжался даже после того, как подчиненная мышь демонстрировала покорную позу), контакт прекращался раньше, чем через 10 мин.Подчиненные животные подвергались стрессу ежедневно в течение 28 дней, что, согласно литературным данным, привело к развитию тяжелой депрессии у мышей [16,17]. Жертв меняли каждый день, что создавало непредсказуемые условия для жертв в новых клетках агрессоров и приводило к дополнительному стрессу. К следующему этапу эксперимента все 28-дневные стрессированные мыши были протестированы на ИК-актиметре с регистрацией двигательной активности. Затем отбирали только мышей со значительно сниженной двигательной активностью по сравнению с группой без стресса и одинаково рандомизировали в экспериментальные группы лечения.
2.4. Медикаментозное лечение
Подчиненных мышей случайным образом разделили на 2 группы по 8 животных в каждой: «CSDS», «CSDS + GSB-106». Были также 2 группы животных, не подвергавшихся стрессу, по 10 мышей в каждой группе, которых содержали в течение 28 дней, а затем получали плацебо или лекарственную форму GSB-106 параллельно с животными, подвергшимися стрессу. Контрольным животным без стресса («Контрольная» группа) и животным из группы «CSDS» перорально вводили носитель в виде дозированной формы, суспендированный в 1% растворе крахмала (плацебо), один раз в день в течение 21 дня.Лекарственную форму GSB-106 (таблетки) суспендировали в 1% растворе крахмала и вводили перорально мышам из групп «Контроль + GSB-106» и «CSDS + GSB-106» в дозе 0,1 мг / кг (активное лекарственное средство). ингредиент) ежедневно, однократно, в течение 21 дн. Доза GSB-106 была выбрана на основе предыдущих экспериментов [18]. Введение лекарств было начато на следующий день после 28-дневного социального стресса после оценки двигательной активности. Во время лечения препаратами мышей содержали группами по 4 животных в клетке.
2.5. Locomotion
Для регистрации двигательной активности использовали инфракрасный актиметр (Panlab, Барселона, Испания) с программным обеспечением ActiTrack. Двигательную активность мышей регистрировали в течение 3 мин. Тест проводился через 24 часа после окончания 28-дневного социального стресса, а затем через 24 часа после последнего приема препарата.
2.6. Тест предпочтения сахарозы
После оценки двигательной активности мышам, сидящим по отдельности, предоставили 24-часовой свободный доступ одновременно к двум бутылкам, одна из которых содержала 1% раствор сахарозы, а другая — чистую воду.Позиции бутылок меняли по истечении половины времени во время испытания. Расход воды и растворов сахарозы оценивали путем взвешивания бутылок до и после испытания. Предпочтение раствора сахарозы рассчитывали по следующей формуле: (М сахар) / (М сахар + М вода) * 100%, где М сахар — израсходованная масса раствора сахарозы, М воды — израсходованная масса воды.
Снижение предпочтения раствора сахарозы ниже контрольной группы расценивалось как развитие ангедонии [19].
2.7. Сбор образцов
Через пять дней после последнего теста предпочтения сахарозы мышей декапитировали. Гиппокамп собирали в жидкий азот и хранили при -80 ° C до обнаружения белка.
Схема эксперимента показана на.
Дизайн эксперимента низкомолекулярный BDNF-миметик GSB-106 влияет на модель хронического социального стресса у мышей.
2.8. Вестерн-блоттинг
Образцы ткани головного мозга гомогенизировали в буфере для лизиса (50 мМ трис-HCl, 5 мМ EDTA, 1 мМ DTT, 1% Triton X-100) pH 7.5 в соотношении 1:10 (ткань: буфер) при 4 ° C в течение 5 минут, затем поместили в центрифужную пробирку объемом 1,5 мл и центрифугировали при 13000 об / мин в течение 10 минут при 4 ° C. Цитозольную фракцию (супернатант) использовали для определения синатофизина, осадок использовали для выделения ядерной фракции и определения CREB и фосфо-CREB.
Осадок лизировали в буфере (50 мМ Трис-HCl, 150 мМ NaCl, 1 мМ EDTA, 1 мМ EGTA, 1 мМ DTT, 1% Triton X-100, 0,5% дезоксихолата натрия, 0,1% SDS, 10% глицерина, 1 мМ Na 3 VO 4 ) pH 7.8 в соотношении 4: 6 (ткань: буфер) в течение 30 минут при 0 ° C, перемешивая каждые 10 минут. Затем образцы центрифугировали при 14000 об / мин в течение 30 мин при 4 ° C. Собирали супернатант. Концентрацию белка в образцах измеряли методом Фолина-Лоури. Белки разделяли в 12% полиакриламидном геле (ПААГ). Перенос белков из ПААГ на PVDF-мембрану осуществляли электроэлюцией в течение 45 мин.
Вестерн-блотов предварительно инкубировали в буфере TBS-T (с добавлением 1% Tween-20) с 3% ( w / v ) BSA в течение 1 часа.Затем мембраны инкубировали с первичными антителами против синаптофизина в разведении 1: 500, против CREB в разведении 1: 500, против фосфо-CREB в разведении 1: 1000, против бета-актина в разведении 1: 5000 при 4 ° C в течение ночи. Мембраны промывали буфером TBS-T (с добавлением 1% Tween-20) с 0,5% ( w / v ) BSA, а затем инкубировали со вторичными антителами, конъюгированными с пероксидазой хрена (разведение 1: 500) в течение 45 минут. мин. Белки были обнаружены после отмывки от вторичных антител в буфере TBS-T (с добавлением 1% Tween-20) с 0.5% ( w / v ) BSA в реакции с реагентами ECL с использованием системы гель-документирования Alliance UVITEC (Великобритания). Денситометрию полученных изображений проводили с помощью программы GIMP2. Бета-актин использовали в качестве контроля нагрузки.
2.9. Анализ фармакологического ингибирования
Тест принудительного плавания [20] был использован для изучения механизма антидепрессантоподобного действия GSB-106. Тест проводился, как описано ранее [11,21]. Аппаратная установка состояла из 5 прозрачных пластиковых цилиндров диаметром 10 см и высотой 30 см, разделенных черными непрозрачными пластиковыми перегородками для предотвращения визуального контакта с животными во время исследования.Цилиндры были заполнены водой с температурой 22 ° C на 2/3. В первые сутки мышей помещали в цилиндры с водой на 10 мин. Через 22 ч животных снова помещали на 5 мин в те же условия. Велась видеозапись эксперимента. Видео обработано с помощью программы ANY-maze (Ирландия). Регистрировали общее время неподвижности животных.
Исследования вклада активации TrkB и PLCγ за счет антидепрессивной активности GSB-106 были проведены с блокатором рецепторов Trk K252A и специфическим ингибитором фосфолипазы C U73122.K252A и U73122 растворяли в 1% растворе ДМСО / физиологический раствор и вводили внутрибрюшинно. Через 30 минут после первого плавания в дозах 25 мкг / кг [22] и 30 мг / кг [23] соответственно. GSB-106 растворяли в дистиллированной воде и вводили внутрибрюшинно в дозе 0,1 мг / кг через 30 мин после введения ингибиторов. Трициклический антидепрессант амитриптилин использовали в качестве препарата сравнения в физиологическом растворе и вводили внутрибрюшинно. в дозе 10 мг / кг [24].
2.10. Статистический анализ
Межгрупповые различия оценивались с помощью t-критерия Стьюдента или U-критерия Манна-Уитни в случае сравнения двух групп или двухфакторного дисперсионного анализа с последующим тестом Тьюки или LSD-тестом при сравнении более двух групп.Различия считались статистически значимыми при p ≤ 0,05. Данные были представлены как средние и стандартные ошибки среднего.
3. Результаты
3.1. GSB-106 восстанавливает сниженную двигательную активность у мышей CSDS
Двигательная активность мышей через день после CSDS была значительно снижена в 1,4 раза (F (23, 9) = 2,49; p = 0,0002) по сравнению с животными, которые не подвергались стрессу ().
Таблица 1
Влияние стресса хронического социального поражения (CSDS) на двигательную активность мышей.
Группа | n | Моторная активность | ||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Контроль | 20 | 620,0 ± 24,4 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
CSDS | 16 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
22 locotor У подвергнутых стрессу животных, получавших плацебо, также наблюдали через 22 дня после окончания стресса (). Двусторонний ANOVA-анализ данных о локомоции показал статистически значимый эффект CSDS (F (1, 30) = 5.278, р. = 0,0287). Эффект GSB-106 и взаимодействие факторов не были значимыми (F (1, 30) = 0,6213, p = 0,4368; F (1, 30) = 1,98, p = 0,1697). Апостериорный LSD-тест Фишера выявил статистически значимые различия между «контрольной» и «CSDS» группами ( p = 0,016) и тенденцию ( p = 0,14) для GSB-106 к усилению передвижения у мышей CSDS. Однако существенные различия между группами «Контроль» и «CSDS» ( p = 0.014) и между группами «CSDS» и «CSDS + GSB-106» ( p = 0,05) были установлены с использованием U-критерия Манна – Уитни.Таблица 2Влияние дипептида GSB-106 на передвижение мышей CSDS.
3.2. GSB-106 полностью восстанавливает предпочтение раствора сахарозы у мышей CSDSДвусторонний дисперсионный анализ показал, что взаимодействие (F (1, 24) = 10,33, p = 0,0037) между CSDS и обработкой GSB-106 было значительным. Апостериорный тест показал, что подвергнутые стрессу животные, получавшие плацебо, показали статистически значимое ( p <0,012) снижение предпочтения раствора сахарозы на 20% по сравнению с контрольными животными, не подвергавшимися стрессу, получавшими плацебо.Введение GSB-106 способствовало полному восстановлению предпочтения раствора сахарозы до контрольного уровня ( p = 0,0039) (). Хроническое введение GSB-106 животным, не подвергшимся стрессу, не повлияло на этот показатель. Таблица 3Влияние дипептида GSB-106 на предпочтение сахарозы у мышей CSDS.
3.3. GSB-106 восстанавливает сниженную иммунореактивность к синаптофизину в гиппокампе мышей CSDSУ мышей CSDS наблюдалось статистически значимое снижение уровня синаптофизина (8,4 ± 1,0 R.D.U. в контроле; 6.5 ± 0,6 R.D.U. в группе «CSDS»). Обработка GSB-106 статистически значимо ( p <0,05) восстанавливала пониженный уровень синаптофизина (до 7,9 ± 0,3 R.D.U.) (). Лечебный эффект ГСБ-106 составил 74%. Введение GSB-106 контрольным животным не влияло на уровень синаптофизина (). Дипептид GSB-106 восстанавливает пониженный уровень синаптофизина в гиппокампе мышей CSDS. Данные вестерн-блоттинга. R.D.U — относительные денситометрические единицы. Дорожки: 1 — Контроль, 2 — CSDS, 3 — CSDS + GSB-106, 4 — Контроль + GSB-106.Данные представлены как средние и стандартные ошибки среднего. * — p <0,05 по сравнению с группой «Контроль», # - p <0,05 по сравнению с группой «CSDS» (критерий Манна – Уитни). Статистически значимой разницы между полосами β-актина не было. 3.4. Дипептид GSB-106 полностью восстанавливает сниженную иммунореактивность к CREB и фосфо-CREB в гиппокампе мышей CSDSУровень транскрипционного ядерного фактора CREB также статистически значимо ( p <0.05) снизилась в ответ на социальный стресс с 3,8 ± 0,1 RD.U в контроле до 3,4 ± 0,2 R.D.U в группе «CSDS». Обработка GSB-106 восстановила ( p <0,05) сниженный уровень CREB, а частота CREB была даже выше, чем в контроле (5,5 ± 0,5 R.D.U) (). Введение GSB-106 контрольным животным не влияло на уровень CREB (). Дипептид GSB-106 полностью восстанавливает пониженный уровень CREB в гиппокампе мышей CSDS. Данные вестерн-блоттинга. R.D.U — относительные денситометрические единицы.Дорожки: 1 — Контроль, 2 — CSDS, 3 — CSDS + GSB-106, 4 — Контроль + GSB-106. Данные представлены как средние и стандартные ошибки среднего. * — p <0,05 по сравнению с группой «Контроль», # - p <0,05 по сравнению с группой «CSDS» (критерий Манна – Уитни). Статистически значимой разницы между полосами β-актина не было. Уровень фосфо-CREB статистически значимо ( p <0,05) снизился в ответ на социальный стресс до 5,6 ± 0.7 R.D.U. в контроле до 4,1 ± 0,6 R.D.U. в группе «CSDS». Обработка GSB-106 восстановила ( p <0,05) пониженный уровень фосфо-CREB, а уровень фосфо-CREB был даже выше, чем в контроле (6,7 ± 1,2 R.D.U) (). Введение GSB-106 контрольным животным не влияло на уровень фосфо-CREB (). Дипептид GSB-106 полностью восстанавливает пониженный уровень pCREB в гиппокампе мышей CSDS. Данные вестерн-блоттинга. R.D.U — относительные денситометрические единицы. Дорожки: 1 — Контроль, 2 — CSDS, 3 — CSDS + GSB-106, 4 — Контроль + GSB-106.Данные представлены как средние и стандартные ошибки среднего. * — p <0,05 по сравнению с группой «Контроль», # - p <0,05 по сравнению с группой «CSDS» (критерий Манна – Уитни). Статистически значимой разницы между полосами β-актина не было. 3.5. Антагонист рецептора TrkB K252A полностью блокирует антидепрессантоподобную активность дипептида GSB-106 в тесте принудительного плавания на мышахДвусторонний дисперсионный анализ ANOVA показал значительный лечебный эффект [F (2, 54) = 60.16, p <0,0001], эффект K252A [F (1, 54) = 215,3, p <0,0001] и эффект их взаимодействия [F (2, 54) = 70,94, p <0,0001] на неподвижность время. Апостериорный тест показал, что дипептидный миметик BDNF GSB-106 значительно ( p <0,0001) уменьшал время неподвижности в тесте принудительного плавания у мышей на 32% по сравнению с контролем (). Амитриптилин также статистически значимо ( p <0,0001) сокращал время неподвижности на 42.0% по сравнению с контрольной группой (). Антагонист рецепторов TrkB K252A полностью блокирует антидепрессантоподобную активность дипептида GSB-106 и амитриптилина в тесте принудительного плавания на мышах. Данные представлены как средние и стандартные ошибки среднего. *** p <0,0001 статистическая значимость различий по сравнению с «контрольной» группой; ### p <0,0001 статистическая значимость различий по сравнению с группой «GSB-106» или «Амитриптилин» (двусторонний дисперсионный анализ с апостериорным критерием Тьюки). Введение K252A полностью сняло антидепрессивный эффект как GSB-106, так и амитриптилина (). При этом К252А сам по себе не влиял на время неподвижности. Полученные результаты показывают, что антидепрессантоподобное действие GSB-106 и амитриптилина связано с активацией рецептора TrkB. 3.6. Ингибитор PLC U73122 полностью блокирует антидепрессантоподобную активность дипептида GSB-106 в тесте принудительного плавания на мышахДвусторонний дисперсионный анализ ANOVA показал значительный лечебный эффект (F (2, 54) = 29.52, p <0,0001), эффект U73122 (F (1, 54) = 46,35, p <0,0001) и их влияние взаимодействия (F (2, 54) = 24,32, p <0,0001) на неподвижность время. Апостериорный тест показал, что дипептидный миметик BDNF GSB-106 значительно ( p <0,0001) уменьшал время неподвижности в тесте принудительного плавания у мышей на 35% по сравнению с контрольной группой (). Амитриптилин также статистически значимо ( p <0,0001) сокращал время неподвижности на 39% по сравнению с контрольной группой ().Введение U73122 почти полностью сняло антидепрессантные эффекты как GSB-106, так и амитриптилина (). Сам по себе ингибитор не влиял на время неподвижности. Ингибитор PLC U73122 блокирует антидепрессантоподобную активность дипептида GSB-106 и амитриптилина в тесте принудительного плавания на мышах. *** p <0,0001 статистическая значимость различий по сравнению с «контрольной» группой; ### p <0,0001 статистическая значимость различий по сравнению с группой «GSB-106» или «Амитриптилин» (двусторонний дисперсионный анализ с апостериорным критерием Тьюки). 4. ОбсуждениеВ настоящем исследовании впервые продемонстрировано восстановление поведенческих и биохимических параметров депрессивно-подобного состояния у мышей, подвергшихся хроническому социальному стрессу при хроническом пероральном введении дипептидного миметика BDNF GSB-106. . Депрессивно-подобное поведение мышей CSDS оценивали по развитию ангедонии и двигательной задержки, которые считаются основными симптомами депрессии [25]. В тесте предпочтения сахарозы, наиболее распространенном методе оценки ангедонии у грызунов [26], было обнаружено, что предпочтение употребления раствора сахарозы уменьшилось на 20% у мышей, подвергшихся хроническому стрессу, по сравнению с контрольными животными.Кроме того, хронический социальный стресс приводил к снижению двигательной активности в 1,4 раза по сравнению с животными, не подвергавшимися стрессу. Дефицит передвижения у стрессированных животных сохранялся в течение как минимум трех недель после прекращения стресса. Эти данные согласуются с литературными данными о снижении двигательной активности мышей в стрессовой модели депрессии с хроническим социальным поражением [27]. Биохимические исследования ткани гиппокампа показали, что у стрессированных мышей статистически значимо снижена иммунореактивность к синаптическому маркеру синаптофизину (на 20%) и фактору транскрипции CREB (на 10%).Синаптофизин — белок пресинаптических везикул, регулирующий их эндоцитоз [28]. Известно, что тяжесть депрессивного расстройства обратно коррелирует с плотностью синапсов в префронтальной коре и гиппокампе [29], тогда как плотность синапсов коррелирует с уровнем синаптофизина [30]. CREB является нижележащим компонентом ряда сигнальных каскадов, включая BDNF / TrkB / MAPK / ERK [31], и регулирует транскрипцию многих генов, вовлеченных в мозг, в таких функциях, как выживание нейронов, синаптогенез, нейрогенез, синаптическая пластичность, обучение и т. Д. и память [32,33,34].Среди прочего, CREB стимулирует транскрипцию гена BDNF [35]. CREB считается нейропластичным [36]. Как и в случае BDNF, уровень CREB в гиппокампе и коре головного мозга снижается при депрессии и возвращается к норме после терапии антидепрессантами [31,37]. В настоящем исследовании было обнаружено, что дипептид-миметик BDNF GSB-106 корректирует депрессивно-подобное поведение при хроническом введении, способствуя восстановлению двигательной активности с терапевтическим эффектом 60% и полному восстановлению проявлений ангедонии у мышей, подвергшихся воздействию хронический 28-дневный социальный стресс.Кроме того, GSB-106 способствовал восстановлению уровня синаптофизина с терапевтическим эффектом 74% и полному восстановлению уровня CREB в гиппокампе мышей CSDS. На основании литературных данных можно предположить, что антидепрессантоподобные эффекты GSB-106 связаны с восстановлением нарушенного синаптогенеза (синаптофизин) и нейропластичности (синаптофизин и CREB). Ранее методом вестерн-блоттинга было показано, что GSB-106 активирует рецепторы TrkB и их основные пути передачи сигнала: MAPK / ERK, PI3K / AKT и PLCγ.[8,9]. Большое количество экспериментальных и клинических данных указывает на то, что антидепрессивная активность BDNF опосредована его взаимодействием с рецепторами TrkB [2]. В настоящем исследовании влияние блокатора рецепторов Trk K252A на антидепрессивную активность дипептида было исследовано в тесте принудительного плавания на мышах для подтверждения BDNF-подобного механизма действия GSB-106. K252A полностью отменял антидепрессантоподобную активность как GSB-106, так и амитриптилина. Пострецепторный сигнальный каскад PLCγ является одним из активаторов CREB [31].Считалось, что влияние ингибитора PLC U73122 на эффекты дипептида в тесте принудительного плавания на мышах позволяет выявить вклад каскада в антидепрессивную активность GSB-106. Было обнаружено, что U73122 полностью устраняет антидепрессантные эффекты GSB-106. 5. ВыводыТаким образом, настоящие результаты демонстрируют, что дипептидный миметик BDNF GSB-106 обращает вспять депрессивно-подобное поведение и восстанавливает нейропластичность гиппокампа на модели депрессии на грызунах.Эти эффекты GSB-106, вероятно, регулируются передачей сигналов TrkB. Вклад авторовT.A.G. задумал исследование, участвовал в его разработке и координации, а также помогал в составлении рукописи. A.V.T. и А.Г.М. проведены эксперименты in vivo и проведен соответствующий статистический анализ. T.A.A. и I.O.L. проведены эксперименты in vitro, проведен соответствующий статистический анализ. Ю.Н.Ф. и P.Y.P. проанализировал результаты, составил рукопись и подготовил рукопись к публикации.S.B.S. участвовал в разработке и координации исследования. Рукопись написана при участии всех авторов. Все авторы прочитали и согласились с опубликованной версией рукописи. ФинансированиеЭто исследование не получало внешнего финансирования. Заключение экспертной комиссии учрежденияИсследование соответствовало требованиям Приказа Минздрава России № 199 «Об утверждении Правил надлежащей лабораторной практики» и ГОСТ 33215-2014 «Правила размещения. и уход за животными.Окружающая среда, жилье и управление »(http://protect.gost.ru/document.aspx?control=7&id=202494) и Директива 2010/63 / ЕС Европейского парламента и Совета от 22 сентября 2010 г.« О Защита животных, используемых в научных целях ». Содержание животных осуществлялось в соответствии с санитарно-эпидемиологическими правилами 2.2.1.3218-14 «О санитарно-эпидемиологических требованиях к устройству, оборудованию и содержанию экспериментальных биологических клиник (вивариев)», утвержденными постановлением Главного государственного санитарного врача. Российской Федерации № 51 от 29 августа 2014 г.Все эксперименты были одобрены Комитетом по уходу и использованию животных Института В.В. Закусова, Москва (приказ № 5А от 26 апреля 2019 г.). Заявление об информированном согласииНе применимо. Заявление о доступности данныхНаборы данных во время и / или проанализированные в ходе текущего исследования доступны от соответствующего автора по разумному запросу. Конфликт интересовАвторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. СноскиПримечание издателя: MDPI сохраняет нейтралитет в отношении юрисдикционных претензий на опубликованных картах и филиалов организаций. Ссылки1. Думан Р.С., Деяма С., Фогача М.В. Роль BDNF в патофизиологии и лечении депрессии. Зависимые от активности эффекты различают быстродействующие антидепрессанты. Евро. J. Neurosci. : 2019. DOI: 10.1111 / ejn.14630. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 2. Ян Т., Не З., Шу Х., Куанг Ю., Чен X., Ченг Дж., Ю. С., Лю Х. Роль BDNF в нейрональной пластичности при депрессии. Фронт. Клетка. Neurosci. 2020; 14:82. DOI: 10.3389 / fncel.2020.00082. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3. Ковянский П., Литцау Г., Чуба Э., Воськов М., Стелига А., Морись Ю. BDNF: ключевой фактор с мультипотентным влиянием на передачу сигналов в мозге и синаптическую пластичность. Клетка. Мол. Neurobiol. 2018; 38: 579–593. DOI: 10.1007 / s10571-017-0510-4. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 4.Сираяма Ю., Чен А.С., Накагава С., Рассел Д.С., Думан Р.С. Нейротрофический фактор головного мозга оказывает антидепрессивное действие в поведенческих моделях депрессии. J. Neurosci. 2002; 22: 3251–3261. DOI: 10.1523 / JNEUROSCI.22-08-03251.2002. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 5. Xiao J., Hughes R.A., Lim J.Y., Wong A.W., Ivanusic J.J., Ferner A.H., Kilpatrick T.J., Murray S.S. Небольшой пептидный миметик нейротрофического фактора головного мозга способствует периферической миелинизации. J. Neurochem.2013; 125: 386–398. DOI: 10.1111 / jnc.12168. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Zhang M.W., Zhang S.F., Li Z.H., Han F. 7,8-дигидроксифлавон обращает депрессивные симптомы при хроническом легком стрессе у мышей. Neurosci. Lett. 2016; 635: 33–38. DOI: 10.1016 / j.neulet.2016.10.035. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7. Гудашева Т.А., Тарасюк А.В., Помогайбо С.В., Логвинов И.О., Поварнина П., Антипова Т.А., Середенин С.Б. Дизайн и синтез дипептидных миметиков нейротрофического фактора головного мозга. Русь.J. Bioorg. Chem. 2012; 38: 280–290. DOI: 10,1134 / S1068162012030053. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 8. Гудашева Т.А., Логвинов И.О., Антипова Т.А., Середенин С.Б. Дипептидный миметик петли 4 нейротрофического фактора головного мозга GSB-106 активирует TrkB, Erk и Akt и способствует выживанию нейронов in vitro. Докл. Biochem. Биофиз. 2013; 451: 212–214. DOI: 10,1134 / S1607672 | 0121. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 9. Гудашева Т.А., Логвинов И.О., Николаев С.В., Антипова Т.А., Поварнина П.Ю., Середенин С.B. Дипептидные миметики различных петель NGF и BDNF активируют PLC-γ1. Докл. Biochem. Биофиз. 2020; 494: 244–247. DOI: 10,1134 / S1607672
Экспортер / производитель | Средневзвешенная оценка демпинговая маржа (в процентах) |
---|---|
ПАО ТМК и Волжский трубный завод Открытое акционерное общество (совместно ТМК) | 209.72 |
Все остальные | 209,72 |
Раскрытие информации
Commerce намеревается раскрыть заинтересованным сторонам расчеты, выполненные для этого окончательного определения, в течение пяти дней после любого публичного объявления или, если публичное объявление не будет сделано, в течение пяти дней с даты публикации этого уведомления в соответствии с 19 CFR 351.224 ( б).
Продолжение приостановления ликвидации
В соответствии с разделом 735 (c) (1) (B) Закона мы направим U.S. Служба таможенного и пограничного контроля (CBP) продолжает приостанавливать ликвидацию всех ввозов бесшовных труб из России, как описано в Приложении I к настоящему уведомлению, которые были введены или сняты со склада для потребления 10 февраля 2021 г. или после этой даты. , дата публикации положительного предварительного определения в Федеральном реестре .
В соответствии с разделом 735 (c) (1) (B) (ii) Закона и 19 CFR 351.210 (d), мы проинструктируем CBP о необходимости внесения депозита наличными следующим образом: (1) Ставка депозита наличными для респондентов перечисленные выше будут равны оценочной средневзвешенной демпинговой марже для конкретной компании, определенной в этом окончательном решении; (2) если экспортером является не указанная выше компания, а производитель, то ставка депозита наличными будет равна расчетной средневзвешенной демпинговой марже для данной компании, установленной для этого производителя рассматриваемых товаров; и (3) ставка денежного депозита для всех других производителей и экспортеров будет равна расчетной средневзвешенной демпинговой марже для всех остальных.Эти инструкции о приостановлении действия ликвидации остаются в силе до дальнейшего уведомления.
Уведомление Комиссии по международной торговле
В соответствии с разделом 735 (d) Закона мы уведомим Комиссию по международной торговле (ITC) об окончательном утвердительном решении о продажах в LTFV. Поскольку окончательное решение Commerce является утвердительным, в соответствии с разделом 735 (b) (2) Закона, ITC примет окончательное решение относительно того, будет ли отечественная промышленность в Соединенных Штатах материально пострадать или ей угрожает материальный ущерб в результате причина импорта или продажи (или вероятность продажи) для импорта бесшовных труб из России не позднее, чем через 45 дней после нашего окончательного определения.Если ITC определит, что такой травмы не существует, это разбирательство будет прекращено, и все денежные депозиты будут возвращены. Если ИТЦ определит, что такой ущерб действительно существует, коммерция издаст приказ об антидемпинговых пошлинах, предписывающий CBP оценить, по дальнейшим инструкциям коммерции, антидемпинговые пошлины на весь импорт рассматриваемых товаров, ввезенных или снятых со склада, для потребления во время или после дата вступления в силу приостановления ликвидации, как описано выше в разделе «Продолжение приостановки ликвидации».
Уведомление об административных защитных приказах
Это уведомление служит последним напоминанием сторонам, на которых распространяется административный защитный ордер (APO), об их ответственности за распоряжение конфиденциальной информацией, раскрытой в соответствии с APO в соответствии с 19 CFR 351.305 (a) (3). Настоящим запрашивается своевременное письменное уведомление о возврате или уничтожении материалов APO или о переходе на судебный охранный ордер. Несоблюдение правил и условий APO является нарушением, подлежащим наказанию.
Уведомление заинтересованных сторон
Это определение выдается и публикуется в соответствии с разделами 735 (d) и 777 (i) (1) Закона и 19 CFR 351.210 (c).
Начать подпись Начать печатную страницу 35271Датировано: 25 июня 2021 г.
Джеймс Мэдер,
Заместитель помощника секретаря по антидемпинговым и компенсационным операциям.
Конец ПодписьПриложение I — Объем расследования
Товаром, попадающим в рамки данного расследования, являются бесшовные трубы из углеродистой и легированной стали (кроме нержавеющей стали) и пустотелые участки размером менее или равные 16 дюймов (406.4 мм) номинального внешнего диаметра, независимо от толщины стенки, производственного процесса ( например, горячее или холоднотянутое), отделки торца ( например, плоский конец, скошенный конец, высаженный конец, резьбовой или резьбовой и соединенные) или отделка поверхности ( например, голая, лакированная или с покрытием). Пустоты повторной вытяжки — это любые трубы из необработанной углеродистой или легированной стали (кроме нержавеющей стали) или «полые профили», подходящие для операций холодной чистовой обработки, таких как холодное волочение, в соответствии с требованиями Американского общества испытаний и материалов (ASTM) или Американского института нефти (API). ) спецификации, указанные ниже, или сопоставимые спецификации.В объем поставки входят, в частности, бесшовные стандарты из углеродистой и легированной стали (кроме нержавеющей стали), трубопроводы и напорные трубы, произведенные в соответствии с ASTM A-53, ASTM A-106, ASTM A-333, ASTM A-334, ASTM A- 589, ASTM A-795, ASTM A-1024 и API 51 или сопоставимые спецификации, а также соответствие физическим параметрам, описанным выше, независимо от области применения, за исключением исключений, обсуждаемых ниже.
В частности, из области исследования исключены: (1) все трубы, отвечающие аэрокосмическим, гидравлическим и подшипниковым спецификациям, включая трубы, произведенные в соответствии со стандартом ASTM A-822; (2) все трубы, отвечающие химическим требованиям ASTM A-335, законченные или незаконченные; и (3) незакрепленные муфты.Также исключены из объема исследования (1) все механические, котельные, конденсаторные и теплообменные трубы, за исключением тех случаев, когда такие изделия соответствуют требованиям к размерам, то есть наружному диаметру и толщине стенки, ASTM A53, ASTM A- 106 или API 51. Также из исследования исключены: (1) трубные изделия нефтяного сортамента, состоящие из бурильных труб, обсадных труб, насосно-компрессорных труб и муфт; (2) все трубы, отвечающие химическим требованиям ASTM A-335, независимо от их соответствия размерным требованиям ASTM A-53, ASTM A-106 или API 5L; и (3) исключение для ASTM A335 применяется к трубам, отвечающим сопоставимым техническим условиям ГОСТ 550-75.
Соответствующие бесшовные стандарт, линия и напорная труба обычно включаются в подзаголовки Согласованного тарифного плана США (HTSUS) 7304.19.1020, 7304.19.1030, 7304.19.1045, 7304.19.1060, 7304.19.5020, 7304.19.5050, 7304.31 6050, 7304.39.0016, 7304.39.0020, 7304.39.0024, 7304.39.0028, 7304.39.0032, 7304.39.0036, 7304.39.0040, 7304.39.0044, 7304.39.0048, 7304.39.0052, 7304.39.0056, 7304.39.0056, 7304.39.0056, 7304.39.0032 , 7304.39.0068, 7304.39.0072, 7304.51.5005, 7304.51.5060, 7304.59.6000, 7304.59.8010, 7304.59.8015, 7304.59.8020, 7304.59.8025, 7304.59.8030, 7304.59.8035, 7304.59.8040, 7304.59.8045, 7304.59.8050, 7304.59.8055, 7304.59.8060, 7304.59.8060, 7304.59.8060 и 7304.59.8070. Подзаголовки и спецификации HTSUS предоставлены для удобства и для таможенных целей; письменное описание объема является диспозитивным.
Приложение II — Список тем, обсуждаемых в меморандуме по вопросам и решениям
I. Резюме
II.Справочная информация
III. Период расследования
IV. Изменения с момента предварительного определения
V. Обсуждение вопросов
Комментарий 1: Отклонение незначительных исправлений, касающихся кодирования продукта
Комментарий 2: Было ли оправдано применение имеющихся неблагоприятных фактов (AFA) для незарегистрированных продаж на вторичном рынке сбыта
Комментарий 3: Методология выбора AFA
VI.