Про прийняття міждержавних станд… | від 12.10.2009 № 368
ДЕРЖАВНИЙ КОМІТЕТ УКРАЇНИ З ПИТАНЬ
ТЕХНІЧНОГО РЕГУЛЮВАННЯ ТА СПОЖИВЧОЇ ПОЛІТИКИ
Про прийняття міждержавних стандартів
як національні методом підтвердження
та скасування відповідних міждержавних стандартів На виконання законів України «Про стандартизацію»
( 2408-14 ), «Про стандарти, технічні регламенти та процедури
оцінки відповідності» ( 3164-15 ) та Програми перегляду чинних в
Україні міждержавних стандартів (ГОСТ), розроблених до 1992 року
( v0077609-06 ), Н А К А З У Ю:
1. Надати чинності в Україні з 1 грудня 2009 р. міждержавним
стандартам як національним, прийнявши їх методом підтвердження,
мовою оригіналу з наданням їм відповідного національного
позначення та скасувати в Україні чинність відповідних
міждержавних стандартів:
1.1 ГОСТ 166-89 Штангенциркули.
— Взамен
ГОСТ 166-80
ДСТУ ГОСТ 166:2009 Штангенциркули.
(ИСО 3599-76) Технические условия
(ГОСТ 166-89
(ИСО 3599-76), IDT)
1.2 ГОСТ 193-79 Слитки медные.
(ИСО 431-81) Технические условия.
— Взамен
ГОСТ 193-67, ГОСТ 5.657-70,
ГОСТ 5.1073-71
ДСТУ ГОСТ 193:2009 Слитки медные.
(ИСО 431-81) Технические условия
(ГОСТ 193-79
(ИСО 431-81), IDT)
1.3 ГОСТ 980-80 Пилы круглые плоские для
(ИСО 2935-74) распиловки древесины.
Технические условия.
— Взамен
ГОСТ 980-69
ДСТУ ГОСТ 980:2009 Пилы круглые плоские для
(ИСО 2935-74) распиловки древесины.
Технические условия.
(ГОСТ 980-80
(ИСО 2935-74), IDT)
1.4 ГОСТ 1652.1-77 Сплавы медно-цинковые. Методы
(ИСО 1554-76) определения меди.
— Взамен
ГОСТ 1652.1-71
ДСТУ ГОСТ 1652.1:2009 Сплавы медно-цинковые. Методы
(ИСО 1554-76) определения меди.
(ГОСТ 1652.1-77
(ИСО 1554-76), IDT)
1.5 ГОСТ 1652.2-77 Сплавы медно-цинковые. Методы
(ИСО 4749-84) определения свинца.
ГОСТ 1652.2-71
ДСТУ ГОСТ 1652.2:2009 Сплавы медно-цинковые. Методы
(ИСО 4749-84) определения свинца.
(ГОСТ 1652.2-77
(ИСО 4749-84), IDT)
1.6 ГОСТ 1652.3-77 Сплавы медно-цинковые. Методы
(ИСО 1812-76, определения железа.
ИСО 4748-84) — Взамен
ГОСТ 1652.3-71
ДСТУ ГОСТ 1652.3:2009 Сплавы медно-цинковые. Методы
(ИСО 1812-76, определения железа.
ИСО 4748-84) (ГОСТ 1652.3-77 (ИСО 1812-76,
ИСО 4748-84), IDT)
1.7 ГОСТ 1652.5-77 Сплавы медно-цинковые. Методы
(ИСО 4751-84) определения олова.
— Взамен
ГОСТ 1652.5-71
ДСТУ ГОСТ 1652.5:2009 Сплавы медно-цинковые. Методы
(ИСО 4751-84) определения олова.
(ГОСТ 1652.5-77
(ИСО 4751-84), IDT)
1.8 ГОСТ 1652.9-77 Сплавы медно-цинковые. Метод
(ИСО 7266-84) определения серы.
— Взамен
ГОСТ 1652.9-71
ДСТУ ГОСТ 1652.9:2009 Сплавы медно-цинковые. Метод
(ИСО 7266-84) определения серы
(ГОСТ 1652.9-77
(ИСО 7266-84), IDT)
1.9 ГОСТ 1652.11-77 Сплавы медно-цинковые. Методы
(ИСО 4742-84) определения никеля
— Взамен
ГОСТ 1652.11-71
ДСТУ ГОСТ 1652.11:2009 Сплавы медно-цинковые. Методы
(ГОСТ 1652.11-77
(ИСО 4742-84), IDT)
1.10 ГОСТ 2211-65 Огнеупоры и огнеупорное сырье.
(ИСО 5018-83) Методы определения плотности.
— Взамен
ГОСТ 2211-43
ДСТУ ГОСТ 2211:2009 Огнеупоры и огнеупорное сырье.
(ИСО 5018-83) Методы определения плотности.
(ГОСТ 2211-65
(ИСО 5018-83), IDT)
1.11 ГОСТ 3274.2-72 Волокно хлопковое. Ускоренные
(ИСО 2403-72) методы определения сорта и
линейной плотности.
— Взамен
ГОСТ 3274-46 в части разд. IIБ
ДСТУ ГОСТ 3274.2:2009 Волокно хлопковое. Ускоренные
(ИСО 2403-72) методы определения сорта и
линейной плотности
(ГОСТ 3274.2-72
(ИСО 2403-72), IDT)
1.12 ГОСТ 3274.5-7 Волокно хлопковое. Методы
(ИСО 4913-81) определения длины.
— Взамен
ГОСТ 3274-46 в части разд. IIД
ДСТУ ГОСТ 3274.5:2009 Волокно хлопковое. Методы
(ИСО 4913-81) определения длины
(ГОСТ 3274.5-7
(ИСО 4913-81), IDT)
1.13 ГОСТ 3816-81 Полотна текстильные. Методы
(ИСО 811-81) определения гигроскопических и
водоотталкивающих свойств.
— Взамен
определения капиллярности
технических тканей заменен
ГОСТ 29104.11-91)
ДСТУ ГОСТ 3816:2009 Полотна текстильные. Методы
(ИСО 811-81) определения гигроскопических и
водоотталкивающих свойств.
(ГОСТ 3816-81
(ИСО 811-81), IDT)
1.14 ГОСТ 4757-91 Феррохром. Технические
(ИСО 5448-81) требования и условия поставки.
— Взамен
ГОСТ 4757-89
ДСТУ ГОСТ 4757:2009 Феррохром. Технические
(ИСО 5448-81) требования и условия поставки.
(ГОСТ 4757-91
(ИСО 5448-81), IDT)
1.15 ГОСТ 4759-91 Ферромолибден. Технические
(ИСО 5452-80) требования и условия поставки.
— Взамен
ГОСТ 4759-79
ДСТУ ГОСТ 4759:2009 Ферромолибден. Технические
(ИСО 5452-80) требования и условия поставки.
(ГОСТ 4759-91
(ИСО 5452-80), IDT)
1.16 ГОСТ 4761-91 Ферротитан. Технические
(ИСО 5454-80) требования и условия поставки.
— Взамен
ГОСТ 4761-80
ДСТУ ГОСТ 4761:2009 Ферротитан. Технические
(ИСО 5454-80) требования и условия поставки.
(ГОСТ 4761-91
(ИСО 5454-80), IDT)
1.17 ГОСТ 5583-78 Кислород газообразный
Технические условия.
— Взамен
ГОСТ 5583-68
ДСТУ ГОСТ 5583:2009 Кислород газообразный
(ИСО 2046-73) технический и медицинский.
Технические условия.
(ГОСТ 5583-78
(ИСО 2046-73), IDT)
1.18 ГОСТ 6024-75 Изделия огнеупорные динасовые
(ИСО 5019-3-84) и шамотные для кладки
мартеновских печей. Форма и
размеры.
— Взамен
ГОСТ 6024-51
ДСТУ ГОСТ 6024:2009 Изделия огнеупорные динасовые
(ИСО 5019-3-84) и шамотные для кладки
мартеновских печей. Форма и
размеры.
(ГОСТ 6024-75
(ИСО 5019-3-84), IDT)
1.19 ГОСТ 6532-77 Пилы ленточные для распиловки
(ИСО 3295-75) древесины. Технические
условия.
— Взамен
ГОСТ 6532-53
ДСТУ ГОСТ 6532:2009 Пилы ленточные для распиловки
(ИСО 3295-75) древесины. Технические
условия.
(ГОСТ 6532-77
(ИСО 3295-95), IDT)
1.20 ГОСТ 8691-73 Изделия огнеупорные общего
(ИСО 5019-1-84, назначения. Форма и размеры.
ИСО 5019-2-84, — Взамен
ИСО 5019-5-84) ГОСТ 8691-58
ДСТУ ГОСТ 8691:2009 Изделия огнеупорные общего
ИСО 5019-2-84, (ГОСТ 8691-73
ИСО 5019-5-84) (ИСО 5019-1-84,
ИСО 5019-2-84,
ИСО 5019-5-84), IDT)
1.21 ГОСТ 9293-74 Азот газообразный и жидкий.
(ИСО 2435-73) Технические условия.
— Взамен
ГОСТ 9293-59
ДСТУ ГОСТ 9293:2009 Азот газообразный и жидкий.
(ИСО 2435-73) Технические условия
(ГОСТ 9293-74
(ИСО 2435-73), IDT)
1.22 ГОСТ 11234-91 Пластмассы. Определение
(ИСО 171-80) коэффициента уплотнения
формовочных материалов.
— Взамен
ГОСТ 11234-81
ДСТУ ГОСТ 11234:2009 Пластмассы. Определение
(ИСО 171-80) коэффициента уплотнения
формовочных материалов
(ГОСТ 11234-91
(ИСО 171-80), IDT)
1.23 ГОСТ 11861-91 Ферросиликохром. Технические
(ИСО 5449-80) требования и условия поставки.
— Взамен
ГОСТ 11861-77
ДСТУ ГОСТ 11861:2009 Ферросиликохром. Технические
(ИСО 5449-80) требования и условия поставки.
(ГОСТ 11861-91
(ИСО 5449-80), IDT)
1.24 ГОСТ 12348-78 Стали легированные и
(ИСО 629-82) высоколегированные. Методы
определения марганца.
— Взамен
ГОСТ 12348-66, кроме общих
указаний
ДСТУ ГОСТ 12348:2009 Стали легированные и
(ИСО 629-82) высоколегированные. Методы
определения марганца
(ГОСТ 12348-78
(ИСО 629-82), IDT)
1.25 ГОСТ 13217.1-90 Феррованадий. Метод
(ИСО 6467-80) определения ванадия.
— Взамен
ГОСТ 13217.1-79
ДСТУ ГОСТ 13217.1:2009 Феррованадий. Метод
(ИСО 6467-80) определения ванадия
(ГОСТ 13217.1-90
(ИСО 6467-80), IDT)
1.26 ГОСТ 14041-91 Пластмассы. Определение
(ИСО 182-1-90) тенденции к выделению
хлористого водорода и других
кислотных продуктов при
высокой температуре у
композиций и продуктов на
основе гомополимеров и
сополимеров винилхлорида.
Метод конго красный.
— Взамен
ГОСТ 14041-68
ДСТУ ГОСТ 14041:2009 Пластмассы. Определение
(ИСО 182-1-90) тенденции к выделению
хлористого водорода и других
кислотных продуктов при
высокой температуре у
композиций и продуктов на
основе гомополимеров и
сополимеров винилхлорида.
Метод конго красный
(ГОСТ 14041-91
(ИСО 182-1-90), IDT)
1.27 ГОСТ 14111-90 Электроды прямые для
(ИСО 5184-79) контактной точечной сварки.
Типы и размеры
ДСТУ ГОСТ 14111:2009 Электроды прямые для
(ИСО 5184-79) контактной точечной сварки.
Типы и размеры
(ГОСТ 14111-90
(ИСО 5184-79), IDT)
1.28 ГОСТ 14250.1-90 Ферротитан. Метод определения
(ИСО 7692-83) титана.
— Взамен
ГОСТ 14250.1-80
ДСТУ ГОСТ 14250.1:2009 Ферротитан. Метод определения
(ИСО 7692-83) титана
(ГОСТ 14250.1-90
(ИСО 7692-83), IDT)
1.29 ГОСТ 16483.0-89 Древесина. Общие требования к
(ИСО 3129-75) физико-механическим
испытаниям.
— Взамен
ГОСТ 16483.0-78
ДСТУ ГОСТ 16483.0:2009 Древесина. Общие требования к
(ИСО 3129-75) физико-механическим испытаниям
(ГОСТ 16483.0-89
(ИСО 3129-75), IDT)
1.30 ГОСТ 15987-91 Рубанки деревянные.
(ИСО 2730-73) Технические условия.
— Взамен
ГОСТ 15987-79, ГОСТ 14664-77,
ГОСТ 14665-77, ГОСТ 14666-79,
ГОСТ 14669-79, ГОСТ 14670-77,
ГОСТ 14671-77
ДСТУ ГОСТ 15987:2009 Рубанки деревянные.
(ИСО 2730-73) Технические условия
(ГОСТ 15987-91
(ИСО 2730-73), IDT)
1.31 ГОСТ 16591.4-87 Силикомарганец. Методы
(ИСО 4158-78) определения кремния.
— Взамен
ГОСТ 16591.4-71
ДСТУ ГОСТ 16591.4:2009 Силикомарганец. Методы
(ИСО 4158-78) определения кремния
(ГОСТ 16591.4-87
(ИСО 4158-78), IDT)
1.32 ГОСТ 19151-73 Сурик свинцовый. Технические
(ИСО 510-77) условия.
— Взамен
ГОСТ 1787-50, ГОСТ 5.2028-73
ДСТУ ГОСТ 19151:2009 Сурик свинцовый. Технические
(ИСО 510-77) условия
(ГОСТ 19151-73
(ИСО 510-77), IDT)
1.33 ГОСТ 19882-91 Мебель корпусная. Методы
(ИСО 7171-88) испытания на устойчивость,
прочность и деформируемость.
— Взамен
ГОСТ 19882-80
ДСТУ ГОСТ 19882:2009 Мебель корпусная. Методы
(ИСО 7171-88) испытания на устойчивость,
прочность и деформируемость
(ГОСТ 19882-91
(ИСО 7171-88), IDT)
1.34 ГОСТ 20851.2-75 Удобрения минеральные. Методы
(ИСО 5316-77, определения фосфатов
ИСО 6598-85,
ИСО 7497-84)
ДСТУ ГОСТ 20851.2:2009 Удобрения минеральные. Методы
(ИСО 5316-77, определения фосфатов
ИСО 6598-85, (ГОСТ 20851.2-75 (ИСО 5316-77,
ИСО 7497-84) ИСО 6598-85, ИСО 7497-84), IDT)
1.35 ГОСТ 24048-80 Медь. Методы определения
(ИСО 2626-73) стойкости против водородной
хрупкости
ДСТУ ГОСТ 24048:2009 Медь. Методы определения
(ИСО 2626-73) стойкости против водородной
хрупкости
(ГОСТ 24048-80
(ИСО 2626-73), IDT)
1.36 ГОСТ 24386-91 Механизмы ведущие и ведомые.
(ИСО 496-73) Высоты осей.
— Взамен
ГОСТ 24386-80
ДСТУ ГОСТ 24386:2009 Механизмы ведущие и ведомые.
(ИСО 496-73) Высоты осей.
(ГОСТ 24386-91
(ИСО 496-73), IDT)
1.37 ГОСТ 24622-91 Пластмассы. Определение
(ИСО 2039-2-87) твердости. Твердость по
Роквеллу.
— Взамен
ГОСТ 24622-81
ДСТУ ГОСТ 24622:2009 Пластмассы. Определение
(ИСО 2039-2-87) твердости. Твердость по
Роквеллу.
(ГОСТ 24622-91
(ИСО 2039-2-87), IDT)
1.38 ГОСТ 24975.0-89 Этилен и пропилен. Методы
(ИСО 7382-86, отбора проб.
ИСО 8563-87) — Взамен
ГОСТ 24975.0-81
ДСТУ ГОСТ 24975.0:2009 Этилен и пропилен. Методы
(ИСО 7382-86, отбора проб
ИСО 8563-87) (ГОСТ 24975.0-89 (ИСО 7382-86,
ИСО 8563-87), IDT)
1.39 ГОСТ 24978-91 Сплавы медно-цинковые. Методы
(ИСО 4740-85) определения цинка.
— Взамен
ГОСТ 24978-81
ДСТУ ГОСТ 24978:2009 Сплавы медно-цинковые. Методы
(ИСО 4740-85) определения цинка.
(ГОСТ 24978-91
(ИСО 4740-85), IDT)
1.40 ГОСТ 25444-90 Электроды прямые и
(ИСО 1089-80) электрододержатели для
контактной точечной сварки.
Посадки конические. Размеры
ДСТУ ГОСТ 25444:2009 Электроды прямые и
(ИСО 1089-80) электрододержатели для
контактной точечной сварки.
Посадки конические. Размеры
(ГОСТ 25444-90
(ИСО 1089-80), IDT)
1.41 ГОСТ 27521-87 Фрукты. Номенклатура. Первый
(ИСО 1990-1-82) список
ДСТУ ГОСТ 27521:2009 Фрукты. Номенклатура. Первый
(ИСО 1990-1-82) список
(ГОСТ 27521-87
(ИСО 1990-1-82), IDT)
1.42 ГОСТ 28183-89 Машины гладильные
(МЭК 508-75) электрические для бытового и
аналогичного применения.
Методы измерений рабочих
характеристик
ДСТУ ГОСТ 28183:2009 Машины гладильные
(МЭК 508-75) электрические для бытового и
аналогичного применения.
Методы измерений рабочих
характеристик
(ГОСТ 28183-89
(МЭК 508-75), IDT)
1.43 ГОСТ 28326.2-89 Аммиак жидкий технический.
(ИСО 7105-85) Определение массовой доли
воды методом Фишера.
— Взамен
ГОСТ 6221-82 в части п. 4.5
ДСТУ ГОСТ 28326.2:2009 Аммиак жидкий технический.
(ИСО 7105-85) Определение массовой доли
воды методом Фишера
(ГОСТ 28326.2-89
(ИСО 7105-85), IDT)
1.44 ГОСТ 28346-89 Виноград свежий столовый.
(ИСО 2168-74, Хранение в холодильных
ИСО 2169-81) камерах
ДСТУ ГОСТ 28346:2009 Виноград свежий столовый.
(ИСО 2168-74, Хранение в холодильных
ИСО 2169-81) камерах
(ГОСТ 28346-89 (ИСО 2168-74,
ИСО 2169-81), IDT)
1.45 ГОСТ 28351-89 Продукты химические
(ИСО 6353-1-82) органические. Методы
определения кислотности и
щелочности
ДСТУ ГОСТ 28351:2009 Продукты химические
(ИСО 6353-1-82) органические. Методы
определения кислотности и
щелочности
(ГОСТ 28351-89
(ИСО 6353-1-82), IDT)
1.46 ГОСТ 28361-89 Водонагреватели
(МЭК 379-87) аккумуляционные электрические
бытовые. Методы функциональных
испытаний
ДСТУ ГОСТ 28361:2009 Водонагреватели
(МЭК 379-87) аккумуляционные электрические
бытовые. Методы функциональных
испытаний
(ГОСТ 28361-89
(МЭК 379-87), IDT)
1.47 ГОСТ 28640-90 Масла минеральные
(МЭК 590-77) электроизоляционные. Метод
определения ароматических
углеводородов
ДСТУ ГОСТ 28640:2009 Масла минеральные
(МЭК 590-77) электроизоляционные. Метод
определения ароматических
углеводородов
(ГОСТ 28640-90
(МЭК 590-77), IDT)
1.48 ГОСТ 28666.3-90 Зерновые и бобовые.
(ИСО 6639-3-86) Определение скрытой
зараженности насекомыми.
Часть 3. Контрольный метод
ДСТУ ГОСТ 28666.3:2009 Зерновые и бобовые.
(ИСО 6639-3-86) Определение скрытой
зараженности насекомыми.
Часть 3. Контрольный метод
(ГОСТ 28666.3-90
(ИСО 6639-3-86), IDT)
1.49 ГОСТ 28727-90 Шины и ободья для мотоциклов
(ИСО 4249-1-85) (серии с кодовым
обозначением). Часть 1. Шины
ДСТУ ГОСТ 28727:2009 Шины и ободья для мотоциклов
(ИСО 4249-1-85) (серии с кодовым
обозначением). Часть 1. Шины
(ГОСТ 28727-90
(ИСО 4249-1-85), IDT)
1.50 ГОСТ 28728-90 Шины и ободья для мотоциклов
(ИСО 4249-2-90) (серии с кодовым
обозначением). Часть 2. Расчет
нагрузки на шину
ДСТУ ГОСТ 28728:2009 Шины и ободья для мотоциклов
(ИСО 4249-2-90) (серии с кодовым
обозначением). Часть 2. Расчет
нагрузки на шину
(ГОСТ 28728-90
(ИСО 4249-2-90, IDT)
1.51 ГОСТ 28782-90 Ферросплавы. Экспериментальные
(ИСО 7373-87) методы контроля точности
сокращения проб
ДСТУ ГОСТ 28782:2009 Ферросплавы. Экспериментальные
(ИСО 7373-87) методы контроля точности
сокращения проб
(ГОСТ 28782-90
(ИСО 7373-87), IDT)
1.52 ГОСТ 28787-90 Ткани с резиновым или
(ИСО 3303-90) пластмассовым покрытием.
Определение прочности на
прорыв
ДСТУ ГОСТ 28787:2009 Ткани с резиновым или
(ИСО 3303-90) пластмассовым покрытием.
Определение прочности на
прорыв
(ГОСТ 28787-90
(ИСО 3303-90), IDT)
1.53 ГОСТ 28788-90 Ткани с резиновым или
(ИСО 4646-89) пластмассовым покрытием.
Испытание на удар при низкой
температуре
ДСТУ ГОСТ 28788:2009 Ткани с резиновым или
(ИСО 4646-89) пластмассовым покрытием.
Испытание на удар при низкой
температуре
(ГОСТ 28788-90
(ИСО 4646-89), IDT)
1.54 ГОСТ 28790-90 Ткани с резиновым или
(ИСО 5979-82) пластмассовым покрытием.
Определение гибкости. Метод
плоской петли
ДСТУ ГОСТ 28790:2009 Ткани с резиновым или
(ИСО 5979-82) пластмассовым покрытием.
Определение гибкости. Метод
плоской петли
(ГОСТ 28790-90
(ИСО 5979-82), IDT)
1.55 ГОСТ 28846-90 Перчатки и рукавицы. Общие
(ИСО 4418-78) технические условия
ДСТУ ГОСТ 28846:2009 Перчатки и рукавицы. Общие
(ИСО 4418-78) технические условия
(ГОСТ 28846-90
(ИСО 4418-78), IDT)
1.56 ГОСТ 28947-91 Ареометры стеклянные.
(ИСО 1768-75) Стандартное значение
коэффициента объемного
термического расширения (для
использования при подготовке
поправочных таблиц для
жидкостей)
ДСТУ ГОСТ 28947:2009 Ареометры стеклянные.
(ИСО 1768-75) Стандартное значение
коэффициента объемного
термического расширения (для
использования при подготовке
поправочных таблиц для
жидкостей)
(ГОСТ 28947-91
(ИСО 1768-75), IDT)
1.57 ГОСТ 29061-91 Ткани с пластмассовым
(ИСО 6451-82) покрытием. Поливинилхлоридное
покрытие. Экспресс-метод
определения степени
гомогенизации (желирования)
ДСТУ ГОСТ 29061:2009 Ткани с пластмассовым
(ИСО 6451-82) покрытием. Поливинилхлоридное
покрытие. Экспресс-метод
определения степени
гомогенизации (желирования)
(ГОСТ 29061-91
(ИСО 6451-82), IDT)
1.58 ГОСТ 29062-91 Ткани с резиновым или
(ИСО 2231-89) пластмассовым покрытием.
Стандартные условия
кондиционирования и испытания
ДСТУ ГОСТ 29062:2009 Ткани с резиновым или
(ИСО 2231-89) пластмассовым покрытием.
Стандартные условия
кондиционирования и испытания
(ГОСТ 29062-91
(ИСО 2231-89), IDT)
1.59 ГОСТ 29063-91 Ткани с резиновым покрытием.
(ИСО 4637-79) Определение прочности
сцепления резины с тканью.
Метод прямого натяжения
ДСТУ ГОСТ 29063:2009 Ткани с резиновым покрытием.
(ИСО 4637-79) Определение прочности
сцепления резины с тканью.
Метод прямого натяжения
(ГОСТ 29063-91
(ИСО 4637-79), IDT)
1.60 ГОСТ 29131-91 Продукты жидкие химические.
(ИСО 2211-73) Метод измерения цвета в
единицах Хазена (платино-
кобальтовая шкала)
ДСТУ ГОСТ 29131:2009 Продукты жидкие химические.
(ИСО 2211-73) Метод измерения цвета в
единицах Хазена (платино-
кобальтовая шкала)
(ГОСТ 29131-91
(ИСО 2211-73), IDT)
1.61 ГОСТ 29144-91 Зерно и зернопродукты.
(ИСО 711-85) Определение влажности
(базовый контрольный метод)
ДСТУ ГОСТ 29144:2009 Зерно и зернопродукты.
(ИСО 711-85) Определение влажности
(базовый контрольный метод
(ГОСТ 29144-91
(ИСО 711-85), IDT)
1.62 ГОСТ 29173-91 Углеводороды галоидзамещенные
(ИСО 2209-73) жидкие технические. Отбор проб
ДСТУ ГОСТ 29173:2009 Углеводороды галоидзамещенные
(ИСО 2209-73) жидкие технические. Отбор проб
(ГОСТ 29173-91
(ИСО 2209-73), IDT)
1.63 ГОСТ 29193-91 Углеводороды галоидзамещенные
(ИСО 3427-76) жидкие технические (сжиженные
газы). Отбор проб
ДСТУ ГОСТ 29193:2009 Углеводороды галоидзамещенные
(ИСО 3427-76) жидкие технические (сжиженные
газы). Отбор проб
(ГОСТ 29193-91
(ИСО 3427-76), IDT)
1.64 ГОСТ 29215-91 Целлюлоза. Метод определения
(ИСО 3260-82) расхода хлора (степень
делигнификации)
ДСТУ ГОСТ 29215:2009 Целлюлоза. Метод определения
(ИСО 3260-82) расхода хлора (степень
делигнификации)
(ГОСТ 29215-91
(ИСО 3260-82), IDT)
1.65 ГОСТ 29235-91 Велосипеды. Световозвращающие
(ИСО 6742-2-85) устройства. Фотометрические и
физические требования
ДСТУ ГОСТ 29235:2009 Велосипеды. Световозвращающие
(ИСО 6742-2-85) устройства. Фотометрические и
физические требования
(ГОСТ 29235-91
(ИСО 6742-2-85), IDT)
2. Вимоги національних стандартів прийняті за п. 1 цього
наказу, вважати добровільними .
3. Департаменту станда ртизації та метрології (Нелепов А.А.)
забезпечити оприлюднення цього наказу на веб-порталі
Держспоживстандарту України.
4. Державному підприємству «Український науково-дослідний і
навчальний центр проблем стандартизації, сертифікації та якості»
(Корчевна Л.О.):
4.1. Внести у тексти національних стандартів поправку, а
саме: на сторінці 1 вилучити слова «Несоблюдение стандарта
преследуется по закону».
4.2. У термін до 1 грудня 2009 р. сформувати справи
національних стандартів та відповідно до пункту 5.2 ДСТУ 1.7
«Національна стандартизація. Правила і методи прийняття та
застосування міжнародних і регіональних стандартів» розробити
підтверджувальні повідомлення за формою, наведеною у додатку, яке
розташувати на обкладинках відповідних стандартів.
4.3. Забезпечити опублікування цього наказу та
підтверджувальних повідомлень у черговому виданні щомісячного
інформаційного покажчика «Стандарти».
5. Контроль за виконанням цього наказу покласти на заступника
Голови Черепкова С.Т.
Голова Л.В.Лосюк
Додаток
до наказу
Держспоживстандарту
України
12.10.2009 N 368 —————————————————————— | ПІДТВЕРДЖУВАЛЬНЕ ПОВІДОМЛЕННЯ | | Наказ Держспоживстандарту України від хх.хх2009 N ХХХ | | | | ГОСТ ХХХХХ-ХХ | | Назва міждержавного стандарту | | прийнято як національний стандарт | | методом підтвердження за позначенням | | | | ДСТУ ГОСТ ХХХХХ:2009 | | (ГОСТ ХХХХХ-ХХ, IDT) | | | | З наданням чинності від 2009-ХХ-ХХ | | | | Вимоги національного стандарту вважати добровільними. У | | національний стандарт внесено поправку, а саме: на сторінці 1 | | вилучені слова «Несоблюдение стандарта преследуется по | | закону». | | (примітка) | ——————————————————————
Директор Департаменту
стандартизації та метрології А.А.Нелепов
ГОСТ 3274.3-72 «Волокно хлопковое. Методы определения пороков и сорных примесей» завершил свое действие
С. 3 ГОСТ 3274.3-72
то — масса хлопкового волокна, очищенного от пороков и сорных примесей, г.
Если полученный результат превышает ±0,2 %, то новую пробу испытывают в том же порядке.
Из десяти мест массы хлопкового волокна тв , очищенной ог пороков и сорных примесей в результате первого разбора, отбирают навеску тд для второго разбора, тд равна 0,05 тв при массовой доле пороков н сорных примесей менее 5% и 0,1 тв — при массовой доле пороков и сорных примесей 5 % и более.
Второй разбор
Из навески mu вручную пинцетом выделяют кожицу с волокном и мелкий сор и взвешивают их раздельно с погрешностью ±0,1 мг. С той же точностью взвешивают очищенную от пороков навеску, определяя массу те.
Из нескольких мест массы хлопкового волокна /л*, очищенной от пороков и мелкого сора в результате второго разбора, отбирают навеску массой mу для третьего разбора, Шу равна 0.2 шt при массовой доле пороков и сорных примесей менее 5 % н 0,5 те — при массовой доле пороков и сорных примесей 5 % и более.
Третий разбор
Ия навески ту вручную пинцетом выделяют узелки, которые взвешивают с погрешностью ±0,05 мг.
(Измененная редакция, Изм. № 2, 3).
5. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
5.1. Массовую долю пороков и сорных примесей (П) в процентах при проведении испытаний на хлопкоаналиэаторе типа АХ вычисляют по формуле
где X — массовая доля сора, определяемая по ГОСТ 327-1.0-72.
гщ> — масса пороков и сорных примесей, выбранных из угарной камеры и с воздушного фильтра, г;
/па — масса средней лабораторной пробы с учетом высыпавшегося сора из общей пробы, г;
К — переводной коэффициент анализатора, устанавливаемый индивидуально для каждого прибора по эталонному волокну.
За конечный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов испытаний двух проб.
(Измененная редакция, Изм. № 1).
5.2. Если расхождение между результатами испытаний превы
шает для хлопкового волокна отборного, первого, второго и треть-28
ГОСТ 3274.0-72 Волокно хлопковое. Методы отбора проб
Текст ГОСТ 3274.0-72 Волокно хлопковое. Методы отбора проб
ГОСУДАРСТВЕННЫЕ СТАНДАРТЫ
СОЮЗА ССР
ВОЛОКНО ХЛОПКОВОЕ
МЕТОДЫ ИСПЫТАНИИ
ГОСТ 3274.0-72—ГОСТ 3274.5-72
Издание официальное
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО СТАНДАРТАМ
Москва
УДК 677 21:620.113:006 354 Группа М69
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР
ВОЛОКНО ХЛОПКОВОЕ
ГОСТ
3274.0—72* *
Методы отбора проб
Colton fibre Methods of sampling
Взамен
ГОСТ 3274—46 в части разд I
Утвержден постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 28 ноября 1972 г. № 2151 срок введения установлен
с 01.01.74
Проверен в 1986 г. Постановлением Госстандарта от 28.05.86 № 1327 срок действия продлен
до 01.01.92
Несоблюдение стандарта преследуется по закону
1 Настоящий стандарт распространяется на хлопковое волокно и устанавливает методы отбора проб от незапрессованного и запрессованного в кипы волокна.
В стандарте учтены требования рекомендации СЭВ по стандартизации PC 2960—71
2 Точечная проба — масса хлопкового волокна, взятая с конденсора из незапрессованного хлопкового волокна или из кипы.
3 Объединенная проба — совокупность точечных проб
4 Для определения показателей качества хлопкового волокна отбирают объединенные пробы первого и второго видов
Объединенную пробу первого вида отбирают для определения разрывной нагрузки, линейной плотности, зрелости, длины, содержания пороков и сорных примесей хлопкового волокна
Объединенную пробу второго вида отбирают для определения влажности
5 Отбор объединенной пробы первого вида
5 1 Точечную пробу из незапрессованного хлопкового волокна отбирают на хлопкозаводах механизированным способом при помощи пробоотборника или вручную с лотка конденсора через каждые 10 кип в процессе формирования партии.
Издание официальное Перепечатка воспрещена
* Переиздание (июль 1989 г) с Изменениями JV? L 2, утвержденными в августе 1974 г, августе 1981 г. (МУС 9—74, 10—81)
© Издательство стандартов, 1989
Отбор точечных проб начинают через 10—20 мин после начала джинирования.
Масса точечной пробы не должна быть менее 100 г.
Масса объединенной пробы первого вида не должна быть менее 1 кг.
(Измененная редакция, Изм. № 1, 2).
5.2. Точечную пробу из запрессованного в кипы хлопкового волокна отбирают вручную.
Для отбора точечной пробы из середины кипы снимают два или три металлических пояса и на выпуклой ее стороне разрезают упаковочную ткань. Верхний слой хлопкового волокна толщиной 2—3 см снимают и откладывают в сторону, затем на расстоянии не менее 10 см от края кипы отбирают точечную пробу в виде пласта шириной 10—12 см и массой согласно табл. 1.
Допускается производить выемку пласта, не снимая металлического пояса кипы, для чего на выпуклой стороне кипы между двумя соседними поясами разрезают упаковочную ткань, снимают верхний слой хлопкового волокна толщиной 1—2 см, затем вырезают пласт массой согласно табл. 1. Обрезанные края пласта отбирают во избежание попадания резаных волокон.
Таблица 1
Количество кип, обобранных для проверки | Масса то 1ечной пробы oi каждой кипы, г, не менее |
1 | 500 |
2 | 250 |
3 | 170 |
4 | 130 |
5 и более | 100 |
Если в выборке не более 5 кип, то от каждой кипы с двух сторон отбирают по две точечные пробы.
Вынутую точечную пробу осторожно, так, чтобы не изменить фактическое содержание пороков и сорных примесей хлопкового волокна, завертывают в бумагу и проставляют на ней номер партии и номер кипы, из которой взята точечная проба хлопкового волокна. После этого снятый верхний слой укладывают обратна в кипу и ткань зашивают.
Все точечные пробы упаковывают в общий сверток и получают объединенную пробу массой не менее 1 кг, завертывают ее в бумагу и проставляют на ней номер партии и номера кип, из которых взяты точечные пробы.
(Измененная редакция, Изм. № 1, 2).
6. Отбор объединенной пробы второго вида
6.1. Точечные пробы отбирают согласно пп. 5.1 и 5.2.
Масса объединенной пробы второго вида не должна быть менее 200 г. При этом следует учитывать, что влажность хлопкового волокна быстро меняется в зависимости от окружающей среды. Поэтому взятые из кип или из незапрессованного хлопкового волокна точечные пробы помещают в банку с плотно закрывающейся крышкой или взвешивают с точностью до 0,1 г, завертывают в бумагу и проставляют на ней массу объединенной пробы, номер партии и номера кип, из которых взяты точечные пробы.
6.2. При возникновении разногласий в оценке влажности хлопкового волокна из запрессованного в кипы хлопкового волокна отбирают две объединенные пробы второго вида, для чего кипу вскрывают полностью
Точечные пробы отбирают из середины каждой намеченной для отбора кипы: первую — на глубине 3—5 см после снятия верхнего слоя, характеризующую среднюю влажность 30% массы кипы, вторую — на глубине 20 см, характеризующую среднюю влажность 70 % массы кипы.
(Измененная редакция, Изм. № 1, 2).
7. Отбор средней и малой средней лабораторных проб из объединенной пробы первого вида
7.1. Среднюю и малую среднюю лабораторные пробы отбирают после оценки однородности пластов хлопкового волокна органолептическим методом — сравнением внешнего вида объединенной пробы со стандартным образцом. Если окажется, что качество хлопкового волокна в разных пластах объединенной пробы различное, то средние и малые средние лабораторные пробы для испытания отбирают от каждой группы пластов в отдельности
7.2. Среднюю лабораторную пробу из объединенной пробы отбирают для определения содержания пороков и сорных примесей хлопкового волокна.
Среднюю лабораторную пробу составляют из примерно равных клочков хлопкового волокна, взятых из всех точечных проб с двух сторон.
Масса средней лабораторной пробы должна соответствовать табл. 2. Если при составлении средней лабораторной пробы ее масса окажется меньше указанной в табл. 2, то недостающее количество добавляют из любой точечной пробы.
При отборе средней лабораторной пробы из объединенной пробы, взятой от одной кипы, объединенную пробу условно делят на 10 примерно равных частей, затем из каждой части берут клочки для составления средней лабораторной пробы.
Таблица 2
Содержат* 1C по, окоа и сонных примесей, %
Масса средней ia6opaiopHOft npo6f.i с 5-четом высыпающегося сора из объединенной пробы,
Менее 5 5 II более
50(1—0,01 X) 10(1—0.01 X)
Высыпавшийся при составлении средней лабораторной пробьп сор собирают и определяют его массу т взвешиванием с точностью до 0,01 г. Затем содержание сора (X) в процентах вычисляют по формуле
где тоб — масса объединенной пробы, г.
В дальнейшем величину X учитывают при определении содержания пороков и сорных примесей.
При определении содержания пороков и сорных примесей хлопкового волокна методом ручного разбора отбирают одну среднюю лабораторную пробу массой согласно табл. 2, а при определении на хлопкоанализаторе типа АХ отбирают три средние лабораторные пробы массой 100 г каждая: две для проведения параллельных испытаний и одну для контрольного испытания.
7.3. Малую среднюю лабораторную пробу из объединенной пробы первого вида отбирают для определения разрывной нагр\зки, линейной плотности, зрелости и длины хлопкового волокна.
Малую среднюю лабораторную пробу отбирают из всех точечных проб или из разных мест с двух сторон объединенной пробы первого вида. Всего отбирают 16—20 клочков хлопкового волокна общей массой 4—5 г Из малой средней лабораторной пробы удаляют крупные пороки и сорные примеси и делят ее па четыре части. Каждую часть поочередно пропускают через вытяжной прибор ППЛ для приготовления пробной ленточки.
Хлопковое волокно отборного, первого, второго и третьего сортов пропускают через вытяжной прибор ППЛ не менее трех раз, а хлопковое волокно четвертого, пятого и шестого сортов — не менее пяти раз. После этого каждую ленточку делят поперек на две равные части. Четыре части, по одной от каждой ленточки, складывают по две и пропускают через вытяжной прибор ППЛ 3—5 раз. Оставшиеся части ленточек отбрасывают, а две вновь полученные ленточки снова делят пополам, из них две части, по одной из каждой ленточки, складывают вместе и снова пропускают через вытяжной прибор ППЛ 3—5 раз для получения пробной ленточки.
Расстояние между осями вытяжных пар валиков в зависимости
от длины хлопкового волокна должно быть установлено согласно табл. 3.
Таблица 3 | |
мм | |
Длина хлопкового волокна классификатор-ска я | Расстояние межд> осями вытяжных пар валиков |
До 25/26 | Длина хлопкового волокна +3 |
От 26/27 до 31/32 | Длина хлопкового волокна +4 |
32/33 и более | Длина хлопкового волокна +5 |
Пробная ленточка не должна содержать жгутиков и комбинированных жгутиков.
(Измененная редакция, Изм. № 2).
7.3.1. Для приготовления окончательной ленточки от пробной ленточки вдоль нее отделяют часть массой 190—200 мг, которую тщательно разбирают, распутывая и расправляя волокна. Оставшийся сор, узелки, кожицу с хлопковым волокном и пухом удаляют пинцетом. Разобранные таким образом хлопковые волокна пропускают через вытяжной прибор ППЛ с целью лучшей парал-лелизации хлопковых волокон.
Полученная окончательная ленточка массой 175—180 мг должна иметь ширину не более 25 мм.
2 Зак 2773
5
Чугун. Польские токарные патроны Bison 3274 крепление со стороны кулачков.
BISON-BIAL S.A. — это крупная польская компания, занимающаяся производством различного промышленного оборудования и приспособлений. Она начала свою деятельность в 1948 году и быстро развилась из небольшого предприятия в крупную сеть заводов. Компания всегда следила за современными тенденциями и опережала конкурентов. Так, уже в 1997 на всех заводах оборудование было оснащено вычислительной техникой, которая стала первым шагом к автоматизации производственных процессов.
Сегодня BISON является крупнейшим польским производителем в своей сфере. Компания экспортирует свою продукцию более чем в 50 стран мира. В ассортименте товаров концерна представлены следующие типы оснастки:
Ручные токарные патроны. Есть самоцентрирующиеся изделия и комплектующие с независимым перемещением кулачков;
Механизированные токарные патроны;
Пневматические и гидравлические цилиндры;
Прецизионные, слесарные и машинные тиски;
Рабочие промышленные столы и устройства для разделки различных материалов;
Втулки и оправки;
Державки.
Также BISON занимается производством уникальных изделий по индивидуальным заказам.
Компания всегда поддерживает конкурентоспособные цены на всю номенклатуру. Профессионализм сотрудников, оптимизация всех бизнес-процессов и применение высокопроизводительных средств создания продукции позволяют сделать себестоимость товарных позиций минимальной.
Максимум внимания уделяется качеству продукции. Менеджмент контроля производимых изделий сертифицирован по стандарту PN-EN ISO 9001 еще в 1997 году. Также бренд заботится об экологии и делает всё, чтобы минимизировать вред для окружающей среды. Менеджмент экологичности всех заводов сертифицирован по международному стандарту PN-EN ISO 14001.
Патрон токарный Bison-Bial – это основной элемент оснастки токарного станка, зажимное устройство обеспечивающее закрепление заготовки на шпинделе. Применение токарных патронов Польша бизон позволяет производить обработку на высоких скоростях вращения, обеспечивает точность установки и необходимое усилие зажима
Патроны для токарных станков производства Bison-Bial Польша производятся из закаленной стали, реже-высокопрочного чугуна, и отличаются друг от друга конструкцией, и назначением. В России разработано и утверждено восемь стандартов, описывающих требования к этим элементам. Например, согласно ГОСТ 1654-86, выделяется 4 класса точности: А (особо высокая), В (высокая), П (повышенная), Н (нормальная).
Польский завод токарных патронов Bison-Bial основывался при участии СССР, который в свою очередь был основным заказчиком токарных патронов. Поэтому в производственной программе Bison-Bial Польша есть отдельная линейка токарных патронов по ГОСТ 2685-80 классов точности А,В,П. Польские токарные патроны Bison-Bial по ГОСТ вы можете посмотреть и заказать по ссылке.
В настоящее время основная масса продукции Bison-Bial Польша, изготавливается по ДИН, которые частично не отличаются от Российских ГОСТ. Данная продукция Бизон имеет 2 класса точности, например:
1.Польский токарный патрон Bison тип 3534-250-6 (класс точности 2) радиальное биение контрольной оправки зажатой в прямых кулачках на вылете 80мм = не более 40 микрон.
2.Польский токарный патрон Bison тип 3534-250-6-P (класс точности 1, Прецизионный) радиальное биение контрольной оправки зажатой в прямых кулачках на вылете 80мм не более 20 микрон.
Следует помнить, что характеристики патронов Bison-Bial указанные в каталоге гарантирует производитель, соответственно биение токарных патронов бизон не выше указанных значений при массовом, серийном производстве. Каждый грамотный токарь знает, как получить от польского токарного патрона bison-bial требуемую точность, путем шлифовки кулачков под конкретную заготовку. Грамотные советы по использованию и обслуживанию токарных патронов Bison-Bial вы можете посмотреть на канале ютуб студии техпросвет. Серия видео про токарный патрон с посадкой на планшайбу, где непосредственно используется патрон токарный Bison-Bial типа 3534-250-6, будет полезна как новичкам, так и опытным пользователям.
После распада СССР завод токарных патронов Bison-Bial Польша, переориентировался на европейский рынок токарных патронов, а затем вышел на мировой уровень. В наше время продукция завода токарных патронов Bison-Bial S.A. известна во всем мире, токаря и фрезеровщики всех стран ценят продукцию завода Bison-Bial Польша, за непревзойденное соотношение цены и качества исполнения. Так же, завод токарных патронов Бизон-Биал расширил ассортимент и начал выпуск разной станочной оснастки для станков токарной и фрезерной группы, такой как: тиски станочные Bison-Bial Польша, тиски слесарные Bison-Bial Польша, столы поворотные для фрезерных станков Bison-Bial Польша, делительные головки Bison-Bial Польша, тиски лекальные, втулки переходные Bison-Bial Польша, механизированные токарные патроны Bison-Bial Польша, оправки Bison-Bial Польша, центры вращающиеся Bison-Bial Польша, центры упорные, цанговые патроны и цанги Bison-Bial Польша, кулачки для токарных патронов основных мировых производителей.
В настоящее время завод токарных патронов Bison-Bial Польша в основном производит продукцию согласно DIN.
Наиболее востребованная продукция Бизон Биал Польша, в наличии на складе.
Многолетний опыт работы позволяет предоставить качественные услуги по подбору и технической консультации продукции Bison-Bial Польша. Наши специалисты прошли обучение на заводе Bison-Bial S.A. г. Белосток Польская республика. Постоянно поддерживаемый ассортимент продукции польского завода Бизон, позволяет быстро и в сжатые сроки обеспечить ваше производство качественной станочной оснасткой Бизон.
Ящики управления асинхронными двигателями в Новосибирске
Как заказать?
Ящики управления асинхронными двигателями есть в наличии на складах. Мы гарантируем оперативную доставку и выгодные цены. Благодаря развитой логистической сети, сотрудничеству с большинством транспортных компаний и большому количеству поставщиков по всей стране мы минимизируем затраты на поставку в город Новосибирск.
По наименованию (А-Я)По наименованию (Я-А)По популярности (возрастание)По популярности (убывание)
| ||||
| ||||
| ||||
| ||||
| ||||
| ||||
| ||||
| ||||
| ||||
| ||||
| ||||
|
* Уважаемые заказчики! Актуальная цена на продукцию в Новосибирске формируется согласно следующим условиям: объема поставки, формы оплаты и удаленности от заказчика места отгрузки. Информация в каталоге о цене и наличии носит информационный характер и не является публичной офертой, определяемой положениями ч. 2 ст. 437 Гражданского кодекса РФ.
Преимущества сотрудничества
С «Металл Экспедицией» вы сможете:
- выбирать из широкого ассортимента, в том числе и очень редких товаров
- рассчитывать на отгрузку в день оплаты
- получить отсрочку платежа (для постоянных клиентов)
- минимизировать затраты на оплату доставки
- воспользоваться накопительными скидками при длительном сотрудничестве.
Оплата и доставка
Чтобы заказать товары из категории такой продукции как «ящики управления асинхронными двигателями» в Новосибирске, свяжитесь с нами — менеджеры рассчитают сроки поставки продукции в ваш регион и предложат удобные варианты оплаты.
Контакты
Новосибирск, ул. Нижегородская, 6а, офис 615
с 9.00 до 18.00 (без обеда). Выходные: суббота, воскресенье.
Критичен ден за 4 зодии, пазете парите и не се доверявайте
Днес се опитайте да си починете от цялата суета, която ви заобикаляше през седмицата. Не планирайте дори срещи с приятели.
Телец
Днес ще може да заразите околните с доброто си настроение. Постарайте се да оставите приятни моменти и на вас самите.
Близнаци
Днес настоявайте за това, което ви се полага, дори ако сте скромни и притеснителни. Точно сега нямате право да сте такива.
Рак
Днес ви очаква един горещ ден, независимо от температурата навън. Ще ви е трудно да си поемете дъх от събитията, които ще се променят със скоростта на светлината.
Лъв
Този ден може да бъде критичен за вас, затова бъдете внимателни. Не предприемайте никакви рискове. Пазете се от измами, свързани с пари.
Дева
Събитията от този ден няма да се съобразяват с вашето темпо и желания. Всъщност в живота често се случва така. Вие нямате вина за това.
Везни
Днес е добре да си дадете сметка какво точно искате. Преди да ви стане ясно, не предявявайте претенции към когото и да било.
Скорпион
Днес може да обърнете повече внимание на външната си красота. Това ще повдигне самочувствието ви и ще ви даде кураж.
Стрелец
Очаква ви един прекрасен ден. Обстоятелствата ще се подредят така, че ще забравите всички грижи. Отпуснете се максимално!
Козирог
Днес ще имате огромно желание да виждате красотата във всичко, което ви заобикаля. Това желание е страхотно и не го възпирайте по никакъв начин.
Водолей
Днес не разчитайте на приятелски съвети. Възможно е да се опитат да ви заблудят с невярна информация и да ви привлекат за нечиста кауза.
Риби
Колкото и да сте чаровни, днес това няма да ви помогне по никакъв начин. Възможно е цял ден да попадате в неприятни ситуации.
NETWORK WG Шон Тернер Интернет-проект IECA Предполагаемый статус: информационный А. Мельников Истекает: 14 декабря 2013 г. ISODE Ltd Карл Уоллес Red Hound Software 12 июня 2013 г. Свойство возможностей vCard S / MIME черновик-токарь-vcard-smimecaps-00.текст Абстрактный Этот документ определяет свойство vCard S / MIME Capabilities и определяет или ссылается на значения для многих алгоритмов. СМИМ Значения возможностей также могут быть включены в сообщения S / MIME как подписанные атрибут и в сертификатах открытых ключей в качестве расширения. S / MIME Свойство Capabilities является дополнением к ключевому свойству, которое вместе разрешить использование S / MIME без первоначального обмена сообщениями электронной почты. Статус этой памятки Данный Интернет-проект представлен в полном соответствии с положения BCP 78 и BCP 79.Интернет-проекты — это рабочие документы Интернет-инжиниринга. Целевая группа (IETF). Обратите внимание, что другие группы также могут распространять рабочие документы в виде Интернет-проектов. Список текущих Интернет- Черновики находятся на http://datatracker.ietf.org/drafts/current/. Интернет-проекты — это проекты документов, срок действия которых составляет не более шести месяцев. и могут быть обновлены, заменены или исключены другими документами в любое время время. Использовать Интернет-черновики в качестве справочника неуместно. материала или цитировать их иначе, как «незавершенная работа».» Уведомление об авторских правах Авторские права (c) IETF Trust 2013 г. и лица, указанные в качестве авторы документа. Все права защищены. Этот документ подпадает под действие BCP 78 и Правового регулирования IETF Trust. Положения, касающиеся документов IETF (http://trustee.ietf.org/license-info) действует на дату публикация этого документа. Пожалуйста, просмотрите эти документы внимательно, поскольку они уважительно описывают ваши права и ограничения к этому документу. Компоненты кода, извлеченные из этого документа, должны Тернер 14 декабря 2013 г. [Страница 1] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. включить упрощенный текст лицензии BSD, как описано в разделе 4.е из Правовые положения Trust и предоставляются без гарантии, как описано в упрощенной лицензии BSD. 1. Введение Этот документ определяет или ссылается на значения для vCard S / MIME. Свойство Capabilities. Синтаксис свойства определен в [RFC5751], но значения для каждого экземпляра возможности определены в отдельные RFC, а в некоторых случаях и вовсе нет. Значения возможностей могут также включаться в сообщения S / MIME как атрибут и в открытый ключ сертификаты как расширение [RFC4262].Большинство значений в этом документе определены в других RFC, и этот документ ссылается на эти RFC до SMIME Возможности. Значения кодируются с использованием правила отличительного кодирования. (DER) [X.690] и представляют собой последовательность идентификатора объекта алгоритма плюс любые параметры. Значения, указанные в этом документе, являются значениями для один экземпляр SMIMECapability, который содержит один алгоритм — пара параметров. Эти значения могут быть объединены, и им может предшествовать тег и значение длины для получения значения SMIMECapabilities.В синтаксис атрибута следующий и повторяется здесь из [RFC5751] для удобства: Возможности SMIME :: = ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ SMIME SMIMECapability :: = SEQUENCE { ИДЕНТИФИКАТОР ОБЪЕКТА capacityID, параметры ЛЮБЫЕ ОПРЕДЕЛЯЕМЫЕ С помощью capacityID ДОПОЛНИТЕЛЬНО} Как указано в [RFC5751]: «идентификаторы объектов (OID) перечислены в порядке предпочтения, но СЛЕДУЕТ логически разделять строки их категорий (алгоритмы подписи, симметричные алгоритмы, алгоритмы шифрования ключей и др.) «Как» структура атрибут SMIMECapabilities [разработан], чтобы упростить поиск в таблицах и бинарные сравнения для определения совпадений «, значения даны в закодированном формате. В следующих разделах значения DER [X.690] для возможности предшествуют имени алгоритма, и, если они были ранее определенная ссылка для документа, в котором они определенный. 1.1. Терминология требований Ключевые слова «ДОЛЖНЫ», «НЕ ДОЛЖНЫ», «ОБЯЗАТЕЛЬНО», «ДОЛЖНЫ», «НЕ ДОЛЖНЫ», «ДОЛЖЕН», «НЕ ДОЛЖЕН», «РЕКОМЕНДУЕТСЯ», «МОЖЕТ» и «ДОПОЛНИТЕЛЬНО» в этом Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 2] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. документ следует интерпретировать, как описано в [RFC2119].2. Алгоритмы дайджеста сообщений [RFC3370] и [RFC5754] определяют следующий дайджест сообщения алгоритмы использования с CMS: MD5: 300a 0608 2a86 4886 f70d 0205 ПРИМЕЧАНИЕ. Хотя [RFC3370] допускает параметры NULL для SHA-1, SHA-224, SHA-256, SHA-384, SHA-512, параметры НЕ ДОЛЖНЫ включаться в Значения SMIMECapability согласно [RFC5751], поскольку нет дифференцирование по параметрам для SHA-1 (например, по длине вывода). SHA-1: 3007 0605 290e 0302 1a [RFC5754] SHA-224: 300b 0609 6086 4801 6503 0402 04 [RFC5754] SHA-256: 300b 0609 6086 4801 6503 0402 01 [RFC5754] SHA-384: 300b 0609 6086 4801 6503 0402 02 [RFC5754] SHA-512: 300b 0609 6086 4801 6503 0402 03 Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 3] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. 3.Алгоритмы цифровой подписи [RFC3370], [RFC4056], [RFC5754] и [RFC5753] определяют следующее алгоритмы цифровой подписи для использования с CMS: Шифрование RSA: 3009 0608 2a86 4886 f70d 0101 01 RSA с MD5: 3009 0608 2a86 4886 f70d 0101 04 RSA с SHA-1: 3009 0608 2a86 4886 f70d 0101 05 RSA с SHA-224: 3009 0608 2a86 4886 f70d 0101 0e RSA с SHA-256: 3009 0608 2a86 4886 f70d 0101 0b RSA с SHA-384: 3009 0608 2a86 4886 f70d 0101 0c RSA с SHA-512: 3009 0608 2a86 4886 f70d 0101 0d ПРИМЕЧАНИЕ: [RFC4055] включает параметры NULL с SHA-1.RSASSA-PSS По умолчанию: 300D 0609 2a86 4886 f70d 0101 0a30 00 DSA с SHA-1: 3009 0607 2a86 48ce 3804 03 [RFC5754] DSA с SHA-224: 300b 0609 6086 4801 6503 0403 01 [RFC5754] DSA с SHA-256: 300b 0609 6086 4801 6503 0403 02 ПРИМЕЧАНИЕ. [RFC5753] показывает ECDSA с SHA-1 с параметром NULL. значения, но параметры NULL не должны быть включены согласно [RFC5751]. NULL сохраняется для обратного совместимость. [RFC5753] ECDSA с SHA-1: 300b 0607 2a86 48ce 3d04 0105 00 [RFC5753] ECDSA с SHA-224: 300a 0608 2a86 48ce 3d04 0301 [RFC5753] ECDSA с SHA-256: 300a 0608 2a86 48ce 3d04 0302 [RFC5753] ECDSA с SHA-384: 300a 0608 2a86 48ce 3d04 0303 [RFC5753] ECDSA с SHA-512: 300a 0608 2a86 48ce 3d04 0304 4.Ключевые транспортные алгоритмы [RFC3370], [RFC3560], [RFC5990] определяют следующий ключевой транспорт алгоритмы использования с CMS: Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 4] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. Шифрование RSA: 300d 0608 2a86 4886 f70d 0101 01 [RFC3560] RSAES-OAEP По умолчанию: 300D 0609 2a86 4886 f70d 0101 0730 00 ПРИМЕЧАНИЕ. [RFC3560] показывает RSAES-OAEP с SHA-224, SHA-256, 384 и 512 со значениями параметра NULL для алгоритмов SHA, но NULL параметры не должны быть включены в соответствии с [RFCTBD1].[RFC3560] RSAES-OAEP SHA-224: 3038 0609 2a86 4886 f70d 0101 0730 2b30 0d06 0960 8648 0165 0304 0201 0500 301a 0609 2a86 4886 f70d 0101 0830 0d06 0960 8648 0165 0304 0204 0500 [RFC3560] RSAES-OAEP SHA-256: 3038 0609 2a86 4886 f70d 0101 0730 2b30 0d06 0960 8648 0165 0304 0201 0500 301a 0609 2a86 4886 f70d 0101 0830 0d06 0960 8648 0165 0304 0201 0500 [RFC3560] RSAES-OAEP SHA-384: 3038 0609 2a86 4886 f70d 0101 0730 2b30 0d06 0960 8648 0165 0304 0202 0500 301a 0609 2a86 4886 f70d 0101 0830 0d06 0960 8648 0165 0304 0202 0500 [RFC3560] RSAES-OAEP SHA-512: 3038 0609 2a86 4886 f70d 0101 0730 2b30 0d06 0960 8648 0165 0304 0202 0500 301a 0609 2a86 4886 f70d 0101 0830 0d06 0960 8648 0165 0304 0203 0500 [RFC5990] RSA-KEM KDF3 на основе SHA-256, AES Key Wrap со 128-битным KEK: 3047 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 ?? 30 3830 2906 0728 818c 7102 0204 301e 3019 060a 2b81 0510 8648 092c 0102 300b 0609 6086 4801 6503 0402 0102 0110 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 [RFC5990] RSA-KEM KDF3 на основе SHA-384, AES Key Wrap с 192-битным KEK: 3047 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 ?? 30 3830 2906 0728 818c 7102 0204 301e 3019 060a 2b81 0510 8648 092c 0102 300b 0609 6086 4801 6503 0402 0202 0118 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 [RFC5990] RSA-KEM KDF3 на основе SHA-512, AES Key Wrap с 256-битным KEK: 3047 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 ?? 30 3830 2906 0728 818c 7102 0204 301e 3019 060a 2b81 0510 8648 092c 0102 300b 0609 6086 4801 6503 0402 0302 0120 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2д [RFC5990] RSA-KEM KDF2 на основе SHA-1, Triple-DES Key Wrap с 128-битный KEK (двухклавишный тройной DES): 3045 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 ?? 30 3630 2506 0728 818c 7102 0204 301a 3015 060a 2b81 0510 8648 092c 0101 3007 0605 2b0e 0302 1a02 0110 300d 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 5] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. 5.Ключевые алгоритмы согласования [RFC2876], [RFC3370] и [RFC5753] определяют следующий ключ алгоритмы согласования для использования с CMS: ПРИМЕЧАНИЕ. Параметры алгоритмов согласования ключей — это перенос ключей. алгоритм (см. раздел 6). [RFC2876] KEA: 3018 0609 6086 4801 6502 0101 1830 0b06 0960 8648 0165 0201 0117 KA = DH S-S Обертка = Triple-DES: 301c 060d 2a86 4886 f70d 0109 1003 0a30 0d06 0d2a 8648 86f7 0d01 0910 0306 KA = DH S-S Wrap = RC2 Para = 40 бит: 3020 060d 2a86 4886 f70d 0109 1003 0a30 1106 0d2a 8648 86f7 0d01 0910 0306 0202 00a0 KA = DH S-S Wrap = RC2 Para = 64-бит: 301f 060d 2a86 4886 f70d 0109 1003 0a30 1006 0d2a 8648 86f7 0d01 0910 0306 0201 78 KA = DH S-S Wrap = RC2 Para = 128 бит: 301f 060d 2a86 4886 f70d 0109 1003 0a30 1006 0d2a 8648 86f7 0d01 0910 0306 0201 3a KA = DH E-S Wrap = Triple-DES: 301c 060d 2a86 4886 f70d 0109 1003 0530 0d06 0d2a 8648 86f7 0d01 0910 0306 KA = DH E-S Wrap = RC2 Para = 40 бит: 3020 060d 2a86 4886 f70d 0109 1003 0530 1106 0d2a 8648 86f7 0d01 0910 030a 0202 00a0 KA = DH E-S Wrap = RC2 Para = 64-бит: 301f 060d 2a86 4886 f70d 0109 1003 0530 1006 0d2a 8648 86f7 0d01 0910 030a 0201 78 KA = DH E-S Wrap = RC2 Para = 128 бит: 301f 060d 2a86 4886 f70d 0109 1003 0530 1006 0d2a 8648 86f7 0d01 0910 030a 0201 3a ПРИМЕЧАНИЕ: [RFC5753] показывает ECDH с SHA-1 | Triple-DES wrap возможности со значениями параметров NULL, но параметры NULL не должны были быть включены в соответствии с [RFCTBD1].NULL — это сохранено для обратной совместимости. [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-1 Wrap = Triple-DES: 301c 0609 2b81 0510 8648 3f00 0230 0f06 0b2a 8648 86f7 0d01 0910 0306 0500 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-224 Wrap = Triple-DES: 3017 0606 2b81 0401 0b00 300e 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-256 Wrap = Triple-DES: 3017 0606 Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 6] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. 2b81 0401 0b01 300e 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-384 Wrap = Triple-DES: 3017 0606 2b81 0401 0b02 300e 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-512 Wrap = Triple-DES: 3017 0606 2b81 0401 0b03 300e 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-1 Wrap = AES-128: 3018 0609 2b81 0510 8648 3f00 0230 0b06 0960 8648 0165 0304 0105 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-224 Wrap = AES-128: 3015 0606 2b81 0401 0b00 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-256 Wrap = AES-128: 3015 0606 2b81 0401 0b01 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-384 Wrap = AES-128: 3015 0606 2b81 [RFC5753] KA = стандарт ECDH KDF = SHA-512 Wrap = AES-128: 3015 0606 2b81 0401 0b03 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-1 Wrap = AES-192: 3018 0609 2b81 0510 8648 3f00 0230 0b06 0960 8648 0165 0304 0119 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-224 Wrap = AES-192: 3015 0606 2b81 0401 0b00 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-256 Wrap = AES-192: 3015 0606 2b81 0401 0b01 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-384 Wrap = AES-192: 3015 0606 2b81 0401 0b02 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 [RFC5753] KA = стандарт ECDH KDF = SHA-512 Wrap = AES-192: 3015 0606 2b81 0401 0b03 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-1 Wrap = AES-256: 3018 0609 2b81 0510 8648 3f00 0230 0b06 0960 8648 0165 0304 012d [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-224 Wrap = AES-256: 3015 0606 2b81 0401 0B00 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2d [RFC5753] KA = стандарт ECDH KDF = SHA-256 Wrap = AES-256: 3015 0606 2b81 0401 0b01 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2d [RFC5753] KA = стандартный ECDH KDF = SHA-384 Wrap = AES-256: 3015 0606 2b81 0401 0b02 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2d Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 7] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. [RFC5753] KA = стандарт ECDH KDF = SHA-512 Wrap = AES-256: 3015 0606 2b81 0401 0B03 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2d ПРИМЕЧАНИЕ: [RFC5753] показывает ECMQV с SHA-1 и Triple-DES. возможности со значениями параметров NULL, но параметры NULL не должны были быть включены в соответствии с [RFCTBD1].NULL — это сохранено для обратной совместимости. [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-1 Wrap = Triple-DES: 301c 0609 2b81 0510 8648 3f00 0330 0f06 0b2a 8648 86f7 0d01 0910 0306 0500 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-224 Wrap = Triple-DES: 3017 0606 2b81 0401 0e00 300d 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-256 Wrap = Triple-DES: 3017 0606 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-384 Wrap = Triple-DES: 3017 0606 2b81 0401 0e02 300d 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-512 Wrap = Triple-DES: 3017 0606 2b81 0401 0e03 300d 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-1 Wrap = AES-128: 3018 0609 2b81 0510 8648 3f00 0330 0b06 0960 8648 0165 0304 0105 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-224 Wrap = AES-128: 3015 0606 2b81 0401 0e00 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-256 Wrap = AES-128: 3015 0606 2b81 0401 0e01 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-384 Wrap = AES-128: 3015 0606 2b81 0401 0e02 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-512 Wrap = AES-128: 3017 0606 2b81 0401 0e03 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-1 Wrap = AES-192: 30 18 06 09 2b 81 0510 8648 3f00 0330 0b06 0960 8648 0165 0304 0119 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-224 Wrap = AES-192: 3015 0606 2b81 0401 0e00 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-256 Wrap = AES-192: 3015 0606 2b81 0401 0e01 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-384 Wrap = AES-192: 3015 0606 2b81 0401 0e02 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 8] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-512 Wrap = AES-192: 3015 0606 2b81 0401 0e03 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-1 Wrap = AES-256: 3015 0609 2b81 0510 8648 3f00 0330 0b06 0960 8648 0165 0304 012d [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-224 Wrap = AES-256: 3015 0606 2b81 0401 0e00 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2d [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-256 Wrap = AES-256: 3015 0606 2b81 0401 0e01 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2d [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-384 Wrap = AES-256: 3015 0606 2b81 [RFC5753] KA = кофактор ECDH KDF = SHA-512 Wrap = AES-256: 3015 0606 2b81 0401 0e03 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2d ПРИМЕЧАНИЕ: [RFC5753] показывает ECMQV с SHA-1 и Triple-DES. возможности со значениями параметров NULL, но параметры NULL не должны были быть включены в соответствии с [RFCTBD1].NULL — это сохранено для обратной совместимости. [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-1 Wrap = Triple-DES: 301c 0609 2b81 0510 8648 3f00 1030 0f06 0b2a 8648 86f7 0d01 0910 0306 0500 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-224 Wrap = Triple-DES: 3017 0606 2b81 0401 0f00 300d 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-256 Wrap = Triple-DES: 3017 0606 2b81 0401 0f01 300d 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-384 Wrap = Triple-DES: 3017 0606 2b81 0401 0f02 300d 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-512 Wrap = Triple-DES: 3017 0606 2b81 0401 0f03 300d 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-1 Wrap = AES-128: 3018 0609 2b81 0510 8648 3f00 1030 0b06 0960 8648 0165 0304 0105 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-224 Wrap = AES-128: 3015 0606 2b81 0401 0f00 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-256 Wrap = AES-128: 3015 0606 2b81 0401 0f01 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-384 Wrap = AES-128: 3015 0606 2b81 0401 0f02 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 9] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-512 Wrap = AES-128: 3015 0606 2b81 0401 0f03 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-1 Wrap = AES-192: 3018 0609 2b81 0510 8648 3f00 1030 0b06 0960 8648 0165 0304 0119 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-224 Wrap = AES-192: 3015 0606 2b81 0401 0f00 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-256 Wrap = AES-192: 3015 0606 2b81 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-384 Wrap = AES-192: 3015 0606 2b81 0401 0f02 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-512 Wrap = AES-192: 3015 0606 2b81 0401 0f03 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-1 Wrap = AES-256: 3018 0609 2b81 0510 8648 3f00 1030 0b06 0960 8648 0165 0304 012d [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-224 Wrap = AES-256: 3015 0606 2b81 0401 0f00 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2d [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-256 Wrap = AES-256: 3015 0606 2b81 0401 0f01 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2d [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-384 Wrap = AES-256: 3015 0606 2b81 0401 0f02 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2d [RFC5753] KA = ECMQV 1-Pass KDF = SHA-512 Wrap = AES-256: 3015 0606 2b81 0401 0f03 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2d 6.Ключевые алгоритмы переноса [RFC2876], [RFC3058], [RFC3370], [RFC3565], [RFC3657], [RFC4010], [RFC5649] определяют следующие алгоритмы переноса ключей для использования с CMS: ПРИМЕЧАНИЕ. В большинстве случаев алгоритм переноса ключей включен в возможности, установленные как часть алгоритма согласования ключей. [RFC2876] FORTEZZA Wrap 80: 300b 0609 6086 4801 6502 0101 17 [RFC3058] ИДЕЯ: 300D 060B 2B06 0104 0181 3C07 0101 02 Обертка 3-DES: 300e 060b 2a86 4886 f70d 0109 1003 06 RC2 40-битный: 3011 060d 2a86 4886 f70d 0109 1003 0602 0200 a0 RC2, 64-разрядная версия: 3010 060d 2a86 4886 f70d 0109 1003 0602 0178 Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 10] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. RC2 128-бит: 3010 060d 2a86 4886 f70d 0109 1003 0602 013a AES-128 Key Wrap: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 Обертка для ключей AES-196: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 Накладка для ключей AES-128 с прокладкой: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 08 Накладка для ключей AES-196 с прокладкой: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 1c Накладка для ключей AES-256 с прокладкой: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 30 Камелия 128-пленка: 300d 060b 2a83 088c 9a4b 3d01 0103 02 Камелия 196-Обертка: 300d 060b 2a83 088c 9a4b 3d01 0103 03 Камелия 256-пленка: 300d 060b 2a83 088c 9a4b 3d01 0103 04 SEED Wrap: 300c 060a 2a83 1a8c 9a44 0701 0101 7.Алгоритмы шифрования контента [RFC2876], [RFC3058], [RFC3370], [RFC3565], [RFC3657], [RFC5084] и [RFC5649] определяют следующие алгоритмы шифрования контента для использования с CMS: RC2-CBC 40-бит: 300d 0608 2a86 4886 f70d 0302 0201 28 RC2-CBC, 64-разрядная версия: 300d 0608 2a86 4886 f70d 0302 0201 40 RC2-CBC 128-бит: 300e 0608 2a86 4886 f70d 0302 0202 0080 3-DES-CBC: 300a 0608 2a86 4886 f70d 0307 ПРИМЕЧАНИЕ. [RFC2876] неправильно включал 00 в конце СМИМЕ. [RFC2876] SKIPJACK: 300b 0609 6086 4801 6502 0101 04 [RFC3058] IDEA-CBC: 300d 060b 2b06 0104 0181 3c07 0101 02 [RFC3565] AES-CBC-128: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 02 [RFC3565] AES-CBC-196: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 16 [RFC3565] AES-CBC-256: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2a Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 11] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. AES-CCM-128: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 07 AES-CCM-196: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 1b AES-CCM-256: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2f AES-GCM-128: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 06 AES-GCM-196: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 1a AES-GCM-256: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2e AES-128 Key Wrap: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 05 Обертка для ключей AES-196: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 19 AES-256 Key Wrap: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 2d Обертка ключей AES-128 с MLI: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 08 Накладка для ключей AES-196 с MLI: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 1c Обертка ключей AES-256 с MLI: 300b 0609 6086 4801 6503 0401 30 ПРИМЕЧАНИЕ. Camellia определяет параметры своих возможностей как NULL.[RFC3657] Camellia 128-CBC: 300f 060b 2a83 088c 9a4b 3d01 0101 0205 00 [RFC3657] Camellia 196-CBC: 300f 060b 2a83 088c 9a4b 3d01 0101 0305 00 [RFC3657] Camellia 256-CBC: 300f 060b 2a83 088c 9a4b 3d01 0101 0405 00 ПРИМЕЧАНИЕ. SEED определяет параметры своих возможностей как NULL. [RFC4010] SEED CBC: 300C 0608 2a83 1a8c 9a44 0104 0500 8. Алгоритмы кода аутентификации сообщения. [RFC3370], [RFC4231] и [RFC4490] определяют следующее сообщение Алгоритмы кода аутентификации для использования с CMS: HMAC SHA-1: 3009 0608 2b0601 0505 0801 02 HMAC SHA-224: 300a 0608 2a86 4886 f70d 0208 Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 12] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. HMAC SHA-256: 300a 0608 2a86 4886 f70d 0209 HMAC SHA-384: 300a 0608 2a86 4886 f70d 020a [RFC4490] HMAC ГОСТ: 3008 0606 2A85 0302 0209 9.Алгоритмы сжатия [RFC3274] определяют следующие алгоритмы сжатия для использования с CMS: [RFC3274] ZLIB: 300D 060B 2A86 4886 F70D 0109 1003 08 10. Соображения безопасности Этот документ не поддерживает использование какого-либо конкретного алгоритма. Сила алгоритмов и применимость к их использованию в конкретная среда определяется в спецификациях алгоритмов. В отличие от атрибута возможностей S / MIME, который может быть включен в Сообщения S / MIME или атрибут возможностей S / MIME, который может быть включен в X.509, свойство vCard, определенное в этом документ не подписан. Локально сохраненные копии свойства vCard следует обновлять по мере необходимости при представлении подписанного S / MIME экземпляр возможностей. 11. Соображения IANA В этом документе регистрируется новое свойство vCard [RFC6350] для S / MIME. Возможности, определенные в разделе 1. Шаблон регистрации указанные ниже: Цель: указать список возможностей S / MIME, связанных с объект, который представляет визитная карточка.Каждое значение представляет собой одно СМИМЕ. Тип значения: текстовое значение (DER в кодировке base64 [X.690]). Он также может сбросить на один URI. [[Или просто всегда использовать данные: URI?]] Мощность: * ABNF: SMIMECAPA-param = SMIMECAPA-uri-param / SMIMECAPA-text-param SMIMECAPA-значение = SMIMECAPA-значение-uri / SMIMECAPA-текст-значение ; Значение и параметр ДОЛЖНЫ совпадать. Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 13] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. SMIMECAPA-uri-param = «VALUE = uri» / mediatype-param SMIMECAPA-uri-value = URI SMIMECAPA-text-param = «ЗНАЧЕНИЕ = текст» SMIMECAPA-текст-значение = текст SMIMECAPA-param = / altid-param / pid-param / pref-param / тип-параметр / любой-параметр Примеры: СМИМЕКАПА: [[Добавить реальный пример]] 12.использованная литература 12.1. Нормативные ссылки [RFC2119] Брэднер, С., «Ключевые слова для использования в RFC для обозначения Уровни требований », BCP 14, RFC 2119, март 1997 г. [RFC5751] Рамсделл, Б. и С. Тернер, «Безопасность / Многоцелевой Сообщения Internet Mail Extensions (S / MIME) версии 3.2 Спецификация », RFC 5751, январь 2010 г. [RFC6350] Перро, С., «Спецификация формата vCard», RFC 6350, Август 2011 г. [X.690] Рекомендация МСЭ-Т X.690 (2002) | ИСО / МЭК 8825- 1: 2002, Информационные технологии — Правила кодирования ASN.1: Спецификация основных правил кодирования (BER), канонических Правила кодирования (CER) и особые правила кодирования (DER). 12.2. Информативные ссылки [RFC2876] Поулинг, Дж., «Использование алгоритмов KEA и SKIPJACK в CMS », RFC 2876, июль 2000 г. [RFC3058] Teiwes, S., Hartmann, P., and D. Kuenzi, «Использование Алгоритм шифрования IDEA в CMS », RFC 3058, февраль 2001 г.[RFC3274] Гутманн П., «Тип содержимого сжатых данных для Синтаксис криптографических сообщений (CMS) », RFC 3274, июнь 2002 г. Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 14] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. [RFC3370] Housley, R., «Синтаксис криптографических сообщений (CMS)» Алгоритмы », RFC 3370, август 2002 г. [RFC3560] Housley, R., «Использование транспорта ключей RSAES-OAEP Алгоритм в синтаксисе криптографических сообщений (CMS) », RFC 3560, июль 2003 г.[RFC3565] Шаад Дж. «Использование расширенного стандарта шифрования. (AES) Алгоритм шифрования в криптографическом сообщении Syntax (CMS) », RFC 3565, июль 2003 г. [RFC3657] Мориаи, С. и А. Като, «Использование шифрования Camellia. Алгоритм в синтаксисе криптографических сообщений (CMS) », RFC 3657, январь 2004 г. [RFC4010] Парк, Дж., Ли, С., Ким, Дж. И Дж. Ли, «Использование Алгоритм шифрования SEED в криптографическом сообщении Syntax (CMS) », RFC 4010, февраль 2005 г.[RFC4055] Schaad, J., Kaliski, B., and R. Housley, «Additional Алгоритмы и идентификаторы для использования криптографии RSA в Internet X.509 Public Key Infrastructure Сертификат и список отзыва сертификатов (CRL) Профиль », RFC 4055, июнь 2005 г. [RFC4056] Шаад Дж. «Использование алгоритма подписи RSASSA-PSS. in Cryptographic Message Syntax (CMS) », RFC 4056, июнь 2005 г. [RFC4231] Нистром М., «Идентификаторы и тестовые векторы для HMAC- SHA-224, HMAC-SHA-256, HMAC-SHA-384 и HMAC-SHA-512 «, RFC 4231, декабрь 2005 г. [RFC4262] Santesson, S., «Расширение сертификата X.509 для Безопасные / многоцелевые расширения почты Интернета (S / MIME) Возможности », RFC 4262, декабрь 2005 г. [RFC4490] Леонтьев С., Ред., Чудов Г. Под ред. «Использование ГОСТа». 28147-89, ГОСТ Р 34.11-94, ГОСТ Р 34.10-94, ГОСТ Р 34.10-2001 Алгоритмы с синтаксисом криптографических сообщений (CMS) «, RFC 4490, май 2006 г. [RFC5084] Housley, R., «Использование AES-CCM и AES-GCM с аутентификацией. Шифрование в синтаксисе криптографических сообщений (CMS) », RFC 5084, ноябрь 2007 г. [RFC5649] Housley, R. и M. Dworkin, «Advanced Encryption». Стандартный (AES) перенос ключей с алгоритмом заполнения «, Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 15] Свойство Internet-Draft vCard с возможностями S / MIME 12 июня 2013 г. RFC 5649, сентябрь 2009 г.[RFC5753] Тернер С. и Д. Браун, «Использование эллиптической кривой Алгоритмы криптографии (ECC) в криптографическом сообщении Syntax (CMS) », RFC 5753, январь 2010 г. [RFC5754] Тернер С., «Использование алгоритмов SHA2 с криптографическими Синтаксис сообщений », RFC 5754, январь 2010 г. [RFC5990] Randall, J., Kaliski, B., Brainard, J., and S. Turner, «Использование алгоритма переноса ключей RSA-KEM в Синтаксис криптографических сообщений (CMS) », RFC 5990, Сентябрь 2010 г.Адреса авторов Шон Тернер IECA, Inc. 3057 Натли-стрит, офис 106 Fairfax, VA 22031 Соединенные Штаты Америки Электронная почта: [email protected] Алексей Мельников Isode Ltd 5 Замковая Деловая Деревня 36 Station Road Хэмптон, Миддлсекс TW12 2BX Великобритания Электронная почта: [email protected] Карл Уоллес Электронная почта: [email protected] Тернер, 14 декабря 2013 г. [Страница 16]
Призрачные поля (Книга 7 из серии Рут Галлоуэй)
ПОХВАЛА ЭЛЛИ ГРИФФИТС И СЕРИЮ RUTH GALLOWAY Обладатель премии Мэри Хиггинс Кларк
Обладатель награды CWA «Кинжал в библиотеке»
«Галлоуэй — умница, успешная и немного неуверенная в себе женщина.Читатели с нетерпением ждут, чтобы узнать о ней больше ». — USA Today
« Элли Гриффитс уводит нас в доисторические времена… Очень атмосферно ». — The New York Times Book Review
«Судебный археолог и академик Рут Галлоуэй — увлекательная сыщик-любитель, вдохновенное творение. Я идентифицировал себя с ее неуверенностью и борьбой и поддерживал ее. «- Луиза Пенни, автор бестселлеров из серии Арманд Гамаш
» Эти книги необходимо прочитать.»- Дебора Кромби, автор серии Дункан Кинкейд / Джемма Джеймс
» [Рут Гэллоуэй] необычная, приземленная героиня, чья проницательность, острый юмор и глубина чувств делают ее очень привлекательной компаньонкой. «- Эрин Харт, Агата и Энтони номинирован на премию автора книг Haunted Ground и Lake of Sorrows
« Рут Галлоуэй — замечательный, восхитительный персонаж… Обязательно к прочтению поклонникам криминальной литературы и детективов ». Associated Press
«Богат атмосферой и историей и благословлен продолжающимся развитием [Гриффита] блестящей, энергичной, независимой Рут…Комната, полная костей, как и ее предшественники, творит чудеса в воображении читателя. «- Richmond Times-Dispatch
» Любители хорошо написанных и разумных традиционных тайн будут приветствовать четвертую книгу [Гриффита] … «Комната, полная костей» — это умное сочетание истории и тайны с более чем достаточным количеством криминалистических деталей, чтобы привлечь более внимательного читателя »- Denver Post — Этот текст относится к изданию в мягкой обложке.
Страшное открытие сбитого самолета времен Второй мировой войны с трупом внутри заставляет Рут и старшего офицера полиции Нельсона раскрыть секреты богатой семьи в седьмой загадке Рут Галлоуэй.
Норфолк страдает от рекордной летней жары, когда строительная бригада обнаруживает жуткое открытие — сбитый самолет времен Второй мировой войны с пилотом внутри. Судебный археолог Рут Гэллоуэй быстро понимает, что скелет не мог быть пилотом, и тесты ДНК идентифицируют человека как Фреда Блэкстока, местного аристократа, который, как сообщалось, погиб в море. Когда остальные члены семьи Блэксток узнают об открытии, они кажутся странно напуганными этой новостью.
События осложняются тем, что телекомпания хочет снять фильм о заброшенных авиабазах Норфолка, так называемых призрачных полях, которые были частично превращены в свиноферму, которой управляет один из молодых Блэкстоков. В начале производства Рут замечает загадочного человека, скрывающегося на окраине поминальной службы Фреда Блэкстока. Затем на семейной свиноферме находят человеческие кости. Сможет ли команда опередить надвигающееся наводнение, чтобы найти убийцу?
Об авторе
ЭЛЛИ ГРИФФИТС — автор детективного сериала о Рут Галлоуэй и Волшебники, а также отдельных романов Дневники незнакомца, лауреата премии Эдгара за лучший роман и Убийства в постскриптуме . Она является лауреатом премии CWA Dagger in the Library и премии Мэри Хиггинс Кларк. Она живет в Брайтоне, Англия. — Этот текст относится к изданию в мягкой обложке.С задней обложки
Читатели будут рады узнать больше о [Рут Галлоуэй]. USA TodayЖаркое лето в Норфолке, когда строительная бригада обнаруживает сбитый американский истребитель времен Второй мировой войны с трупом внутри. Судебный археолог Рут Гэллоуэй определяет, что скелет не мог быть пилотом, и тесты ДНК идентифицируют человека как Фреда Блэкстока, местного аристократа, который долгое время считался мертвым, что, кажется, пугает его потомков. События осложняются еще и тем, что телекомпания хочет снять фильм о заброшенных базах ВВС Норфолка, так называемых призрачных полях, которые Блэкстоки превратили в свиноферму.В начале производства Рут замечает загадочного человека, слоняющегося к поминальной службе Фреда Блэкстока. Затем на семейной свиноферме находят человеческие кости, и погода быстро меняется. Сможет ли команда опередить надвигающееся наводнение, чтобы найти убийцу?
Рут Галлоуэй — увлекательный сыщик-любитель, вдохновленное творение. Я идентифицировал себя с ее неуверенностью и борьбой и поддерживал ее. Луиза Пенни
Необычная, приземленная героиня, чья проницательность, острый юмор и глубина чувств делают ее очень интересным компаньоном.Эрин Харт
ЭЛЛИ ГРИФФИТС — автор детективного сериала о Рут Галлоуэй и волшебниках. Она является лауреатом премии Мэри Хиггинс Кларк, а ее работа была оценена как захватывающая (Луиза Пенни), очень атмосферная ( New York Times Book Review ) и обязательная к прочтению поклонниками криминальной фантастики (Associated Press).
» — Этот текст относится к изданию в мягкой обложке.
Описание книги
HMH твердый переплет 2015, предыдущий ISBN 978-0-544-33014-6
— Этот текст относится к изданию в мягкой обложке.НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛУсачева А.П. , г. Доктор технических наук (Саратовский государственный технический университет),
А.Л. Шурайц , Доктор технических наук (ОАО «Гипрониигаз»),
С.В. Густова , г. Кандидат технических наук (ОАО «Газпром газораспределение»)
МАТЕМАТИЧЕСКАЯ МОДЕЛЬ РАЗРАБОТКА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЙ
ИЗ ПЕРЕПАД ДАВЛЕНИЯ НА ФИЛЬТРАЦИОННОМ ЭЛЕМЕНТЕ СЕТЧАТОГО ТИПА, ЗАГРЯЗНЕННЫМ ТВЕРДЫМИ ПРОДУКТАМИ
Фон
в В литературе много попыток математической формулировки перепад давления на сетчатом фильтрующем элементе, забитом твердыми частицами используя геометрическую экстраполяцию ряда кривых с постоянным расходом очиститель.Однако использовать его для расчета давления невозможно. по одной формуле.
Цели и объективы
Развивать математическая модель для расчета падения давления на сетчатом типе засорение фильтрующего элемента твердыми частицами на основании системы подход:
— предполагать процесс засорения фильтрующего элемента в виде серии последовательно уменьшение сечения сетки;
— чтобы получить принципы падения давления на фильтрующем элементе в зависимости от последовательного уменьшение поперечного сечения сетки из-за процесса засорения;
— определять уровень засорения фильтрующего элемента перед очередной плановой очисткой.
Результаты
На основании предложенной математической модели и системного подхода можно определить уровень засорения и эффективное сечение фильтра сетка, измеряющая падение давления во время работы фильтра.
Ключевые слова: природный газ, твердые частицы, система очистки, математическая модель, система подход, схема расчета, целевая функция, уравнение баланса, фильтрация элемент, сетка, перепад давления, кольцо для мусора, активная поверхность, ячейка сечения.
Литература
1. СТО Газпромрегионгаз 7.1-2011. Технические требования к материалам, оборудованию и технологическим схемам блочных газорегуляторных пунктов, Шкафных пунктов редуцирования газа. Схема модульных пунктов газового контроля, шкафов понижения давления газа) / Система стандартизации ОАО «Газпромрегионгаз». Санкт-Петербург: ОАО «Газпромрегионгаз», 2011 г.33 п.
2. ГОСТ 5542-87. Газы горючие природные для промышленного и коммунально-бытового назначения. Природные топливные газы для промышленных и промышленных предприятий. Бытовое потребление. Характеристики). М .: Изд-во стандартов, 1994. 5 с.
3. Усачев А.П., Шурайц А.Л., Густов С.В., Желанов В.П. Обоснование типа систем очистки природного газа, устанавливаемой перед регулирующей, предохранительной, защитной арматурой и узлами учета газорегуляторных пунктов // НТЖ Проблемы сбора, подготовки и транспорта нефти и нефтепродуктов. (Обоснование типа системы очистки природного газа, установленной до Клапаны регулирующие и предохранительные и узлы учета газорегулирующих аппаратов // STJ Проблемы сбора, переработки и транспортировки нефти и нефтепродуктов) / IPTER.Уфа, 2011. Вып. 1 (83). С. 159-167.
4. Усачев А.П., Шурайц А.Л., Густов С.В. и все. Обоснование размеров ячейки сетки филитрующих элементов системы защиты, предотвращающих попадание твердых частей в газорегуляторные точки, узлы учета и газоисполизующие приборы // Нефегазовое дело. Защитные фильтрующие элементы, предотвращающие попадание твердых частиц в газовый контроль Пункты, узлы учета и газоиспользующие приборы // Нефтегазовое дело.Уфа, 2010. № 2. Т. 8. С. 77-82.
5. Шур И.А. Газорегуляторные пункты и установки. Ленинград: Недра, 1985. 288 с.
6. Стаскевич Н.Л. и все. Справочник по газоснабжению и использованию газа. Книга по газоснабжению и использованию / Н.Л. Стаскевич, Г. Северинец, Д.Я. Вигдорчик. Ленинград: Недра, 1990. 762 с.
7. Ионин А.А. Газоснабжение.М .: Стройиздат, 1989. 438 с.
8. Промышленное газовое оборудование: Справочник. Справочник). 5-е изд., Перераб. я доп. / Стручок красный. E.A. Карякина. Саратов: Газовик, 2010. 992 с.
9. Страус В. Промышленная очистка газов: Пер. с англ. М .: Химия, 1981. 616 с.
10. Белоусов В.В. Теоретические основы процессов газоочистки. Процессы очистки газа).М .: Металлургия, 1988. 256 с.
11. Усачев А.П., Шурайц А.Л., Густов С.В., Желанов В.П. Целевая функция, д. устанавливающая требования к системе защиты, предотвращающей падение давления природного газа на филитрующем элементе установки Очистки сверх максимального допустимого значения // НТЖ Проблемы сбора, подготовки и транспорта нефти и нефтепродуктов (Целевая функция, Установка Требования к системе защиты от падения давления природного газа в фильтрующем элементе монтажных пилингов сверх возможной важности // СТЖ Проблемы сбора, переработки и транспортировки нефти и нефти Продукция) / IPTER.Уфа, 2011. Вып. 4 (86). С. 164-173.
12. Филитры газовые 16-50, 16-50, 16-80, 16-80, 16-100, 16-100. Газовые фильтры 16-50, Техническое описание и инструкция по эксплуатации. 16-50, 16-80, 16-80, 16-100, 16-100. Техническое описание и Руководство по эксплуатации). Арзамас: ООО «Эльстер Газ Электроника», 2012. 10 с.
13. ГОСТ. 6613-86. Сетки проволочные ткани с квадратными ячейками (Wire Gauze Net с квадратными сетками).М .: Изд-во стандартов, 1988. 12 с.
14. Иделычик И.Е. Справочник по гидравлическим сопротивлениям. Гидравлические сопротивления). М .: Машиностроение, 1975. 559 с.
Авторы
Усачев Александр П., доктор технических наук
Саратовский Государственный Технический университет
Профессор Кресло для теплоснабжения и вентиляции
русский Федерация, 410054, г. Саратов, ул.Политехническая, 77
тел: (8452) 51-50-18
Шурайц Александр Л., доктор технических наук, профессор
Гипрониигаз
Общий Директор
русский Федерация, 410000, г. Саратов, пр. Кирова, 54
тел: (8452) 26-20-42
Густов Сергей В., д.т.н.
Газпром газопаспределение ОАО
Общий Директор
русский Федерация, 194040, г. Санкт-Петербург,
Большой Сампсониевский пр., 60
тел: (812) 449-66-02
CMS, синтаксис криптографических сообщений
CMS, синтаксис криптографических сообщений| CMS, Синтаксис криптографических сообщений |
Описание:
(RFC 3058) Производный от PKCS # 7, основы для реализации криптографических функций в S / MIME.Он определяет форматы данных и процессы шифрования, не называя криптографические алгоритмы. Каждый алгоритм, который используется для целей шифрования, определяется уникальным идентификатором алгоритма.
Глоссарий:
RFC:
[RFC 2797] Сообщения управления сертификатами через CMS.
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 2876] Использование алгоритмов KEA и SKIPJACK в CMS.
[RFC 2984] Использование алгоритма шифрования CAST-128 в CMS.
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 3058] Использование алгоритма шифрования IDEA в CMS.
[RFC 3185] Повторное использование ключей шифрования контента CMS.
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 3218] Предотвращение атаки миллиона сообщений на CMS.
[RFC 3274] Тип содержимого сжатых данных для синтаксиса криптографических сообщений (CMS).
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 3278] Использование алгоритмов криптографии с эллиптическими кривыми (ECC) в синтаксисе криптографических сообщений (CMS).
[RFC 3370] Алгоритмы синтаксиса криптографических сообщений (CMS).
[RFC 3560] Использование алгоритма переноса ключа RSAES-OAEP в синтаксисе криптографических сообщений (CMS).
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 3565] Использование алгоритма шифрования Advanced Encryption Standard (AES) в синтаксисе криптографических сообщений (CMS).
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 3657] Использование алгоритма шифрования Camellia в синтаксисе криптографических сообщений (CMS).
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 4010] Использование алгоритма шифрования SEED в синтаксисе криптографических сообщений (CMS).
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 4056] Использование алгоритма подписи RSASSA-PSS в синтаксисе криптографических сообщений (CMS).
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 4073] Защита множественного содержимого с помощью синтаксиса криптографических сообщений (CMS).
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 4108] Использование синтаксиса криптографических сообщений (CMS) для защиты пакетов микропрограмм.
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 4490] Используя ГОСТ 28147-89, ГОСТ Р 34.11-94, ГОСТ Р 34.10-94 и ГОСТ Р 34.10-2001 Алгоритмы с криптографическим синтаксисом сообщений (CMS).
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 5409] Использование алгоритмов шифрования на основе идентичности Боне-Франклина и Боне-Бойена с синтаксисом криптографических сообщений (CMS).
[RFC 5652] Синтаксис криптографических сообщений (CMS).
- СТАНДАРТ: 70.
- Категория: Трек стандартов.
- Устарело:
RFC 3852.
[RFC 6031] Тип содержимого пакета симметричного ключа синтаксиса криптографического сообщения (CMS).
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 6032] Тип содержимого пакета зашифрованного ключа синтаксиса криптографического сообщения (CMS).
- Категория: Дорожка стандартов.
[RFC 6033] Алгоритмы для типа содержимого пакета зашифрованного ключа синтаксиса криптографического сообщения (CMS).
- Категория: Дорожка стандартов.
Публикации:
Устаревшие RFC:
[RFC 2630] Синтаксис криптографического сообщения.
[RFC 3211] Шифрование на основе пароля для CMS.
[RFC 3369] Синтаксис криптографических сообщений (CMS).
[RFC 3852] Синтаксис криптографических сообщений (CMS).
Метагеномная идентификация нового гена толерантности к соли из кишечного микробиома человека, который кодирует мембранный белок с гомологией β-каротина 15,15′-монооксигеназы семейства brp / blh
Abstract
Микробиом кишечника человека состоит как минимум из 3 миллионов неизбыточных генов, что в 150 раз больше, чем основной геном человека.Здесь мы сообщаем об идентификации и характеристике нового гена стрессоустойчивости из метагенома кишечника человека. Локус, присвоенный brpA , кодирует мембранный белок с гомологией с β-каротинмонооксигеназой семейства brp / blh -семейства. Клонирование и гетерологичная экспрессия brpA в Escherichia coli придает значительный фенотип солеустойчивости. Кроме того, при культивировании в присутствии экзогенного β-каротина клеточные гранулы приобретают красную / оранжевую пигментацию, что указывает на включение каротиноидов в клеточную мембрану.
Цитирование: Culligan EP, Sleator RD, Marchesi JR, Hill C (2014) Метагеномная идентификация нового гена толерантности к соли из кишечного микробиома человека, который кодирует мембранный белок с гомологией к brp / blh -Family β-Каротин 15,15′-Монооксигеназа. PLoS ONE 9 (7): e103318. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0103318
Редактор: Иддо Фридберг, Университет Майами, Соединенные Штаты Америки
Поступила: 16 апреля 2014 г .; Одобрена: 29 июня 2014 г .; Опубликовано: 24 июля 2014 г.
Авторские права: © 2014 Culligan et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.
Доступность данных: Авторы подтверждают, что все данные, лежащие в основе выводов, полностью доступны без ограничений. Данные о последовательностях фосмид доступны в GenBank https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/) под следующими номерами доступа: (JQ269599.1) (GI: 375342934).
Финансирование: Центр пищевых фармакологий — это исследовательский центр, финансируемый Ирландским научным фондом (грант SFI № 07 / CE / B1368). Авторы признательны за постоянную финансовую помощь Центру пищевых фармакологий, финансируемому Ирландским научным фондом. JRM благодарит Королевское общество за финансирование, которое поддерживает биоинформатический кластер (Hive) в Школе биологических наук Кардиффского университета. RDS — научный сотрудник ESCMID и координатор проекта ClouDx-i ЕС FP7 IAPP.Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.
Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.
Введение
Метагеномика обеспечивает независимые от культуры средства доступа и изучения генетического содержимого всех микроорганизмов в конкретной экологической нише. Метагеномный анализ может быть последовательным или функциональным (или их комбинацией).Развитие более быстрых, дешевых и точных технологий секвенирования следующего поколения (NGS) позволило по-новому взглянуть на структуру и разнообразие микробного сообщества и привело к открытию многих новых генетических локусов [1] — [4]. Функциональная метагеномика также использовалась для идентификации многих новых функций посредством клонирования и гетерологичной экспрессии метагеномной ДНК и последующего фенотипического обнаружения желаемого признака, присваиваемого клонирующему хозяину. Некоторые известные примеры включают гены, кодирующие белки промышленного, фармацевтического и медицинского назначения, такие как липазы, эстеразы и новые антибиотики [5] — [8].
Микробиом кишечника человека стал, пожалуй, наиболее интенсивно изучаемой средой с использованием метагеномики [9], [10]. В совокупности в микробиоме кишечника человека генов, по крайней мере, в 150 раз больше, чем генов человека в геноме, большая часть которых не охарактеризована [11]. Способность реагировать и адаптироваться к стрессам внешней среды является ключом к выживанию микробов, и можно использовать метагеномику для выявления новых механизмов, обеспечивающих такое выживание [12].В желудочно-кишечном тракте микроорганизмы сталкиваются с многочисленными проблемами, такими как низкий pH, низкие концентрации железа, повышенная осмолярность, желчь, механизмы иммунитета и конкурирующие микробы [13], [14]. Различные наборы генов активируются в ответ на сигналы окружающей среды [15]. Работа в нашей лаборатории сосредоточена на генах, повышающих устойчивость к осмотическому стрессу [16]. Ответ на осмотический стресс широк и охватывает множество разнообразных клеточных процессов и систем [17]. Метагеномика позволяет идентифицировать новые системы, не связанные с классическими (и всесторонне изученными) первичными и вторичными ответами поглощения калия (K + ) и использования осмопротекторов [18] — [20].Мы ранее идентифицировали ряд новых локусов солеустойчивости микробиоты кишечника человека, используя комбинацию функционального метагеномного скрининга, секвенирования следующего поколения и биоинформатического анализа [21] — [23].
В этом исследовании мы сообщаем об идентификации нового гена солеустойчивости из метагеномной библиотеки кишечника человека, которую мы ранее проверили [22]. Анализ in silico выявил ген (который мы назвали brpA ), кодирующий предполагаемый фермент, модифицирующий каротиноиды, с гомологией с белком β-каротин 15,15′-монооксигеназы семейства brp / blh , который расщепляет β-каротин к двум молекулам все — транс сетчатки (альдегид витамина А) [24], [25].Наконец, мы демонстрируем, что brpA придает фенотип повышенной солеустойчивости при гетерологичной экспрессии в Escherichia coli.
Материалы и методы
Штаммы бактерий и условия роста
Бактериальные штаммы и плазмиды, использованные в этом исследовании, перечислены в таблице 1. Олигонуклеотидные праймеры (синтезированные Eurofins, MWG Operon, Германия) представлены в таблице S1. E. coli EPI300 :: pCC1FOS (Epicenter Biotechnologies, Мэдисон, Висконсин, США) культивировали в среде Лурия-Бертани (LB), содержащей 12.5 мкг / мл хлорамфеникола (Cm) и 12,5 мкг / мл хлорамфеникола плюс 50 мкг / мл канамицина (Kan) после мутагенеза транспозонов EZ-Tn 5 . E. coli MKh23 выращивали в LB и LB с добавлением 20 мкг / мл Cm для штаммов, трансформированных плазмидой pCI372. Штаммы E. coli , содержащие вектор экспрессии pBAD, культивировали в присутствии 100 мкг / мл ампициллина.
Для роста в минимальных средах штаммы выращивали в минимальных солях M9 (Fluka) с добавлением конечных концентраций 0.4% глюкозы, 0,2% казаминокислоты, 2 мМ сульфата магния (MgSO 4 ) и 0,1 мМ хлорида кальция (CaCl 2 ). При необходимости в среду добавляли исходные растворы β-каротина до конечной концентрации 20 мкМ. В питательную среду добавляли 1,5% агар для анализов на планшете. Все ночные культуры выращивали при встряхивании при 37 ° C.
Создание и проверка метагеномной библиотеки кишечника человека
Ранее сконструированная библиотека клонов фосмид, созданная из метагеномной ДНК из кишечного микробиома человека [28], была использована для скрининга солеустойчивых клонов.Библиотеку подвергали скринингу с использованием протокола, описанного Каллиганом и др. [22]. Вкратце, всего 23 040 клонов библиотеки были скринированы на агаре LB с добавлением 6,5% (мас. / Об.) NaCl с использованием робототехнической платформы для сбора колоний / построения координатной сетки Genetix QPix 2 XT ™. Планшеты инкубировали при 37 ° C в течение 2–3 дней и периодически проверяли на рост вероятных солеустойчивых клонов.
Секвенирование и биоинформатический анализ
Вставка фосмиды из клона SMG 6 была полностью секвенирована и собрана GATC Biotech (Констанц, Германия) с использованием платформы пиросеквенирования GS-FLX 454 (Roche) на титановом мини-прогоне.Полную последовательность SMG 6 можно найти в GenBank под регистрационным номером JQ269599.1. Предполагаемые открытые рамки считывания были предсказаны с использованием бактериального оперона Softberry FGENESB и программного обеспечения для прогнозирования генов (www.softberry.com), а также GeneMark [29]. Извлеченные нуклеотидные и транслированные аминокислотные последовательности были функционально аннотированы поиском гомологии с использованием Basic Local Alignment and Search Tool (BLAST) для идентификации гомологичных последовательностей с веб-сайта Национального центра биотехнологической информации (NCBI): http: // www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/Blast.cgi. Следующие базы данных и инструменты были использованы для получения дополнительной информации о белке BrpA: База данных консервативных доменов (CDD), поиск мотивов PROSITE, SignalP 4.0, HMMER, TMHMM, HHPred и поиск промоторов Softberry BProm (www.softberry.com) [30 ] — [36].
The Fold and Functional Assignment System (FFAS03) представляет собой алгоритм распознавания профиля-профиля и складки, который может обнаруживать удаленную гомологию между белками [37]. Сравнение профиля-профиля имеет повышенную чувствительность по сравнению с алгоритмами последовательность-последовательность или профиль-последовательность.FFAS03 выполняет поиск в многочисленных базах данных, включая неизбыточные (nr) NCBI, Global Ocean Sampling (GOS) из JCVI, PDB, SCOP и COG, а также в многочисленных наборах данных метагенома, включая MetaHit [11], который содержит более 3 миллионов уникальных генов человека. микробиом кишечника. Последовательность белка BrpA была отправлена на сервер для идентификации белков с гомологией на основе профилирования FFAS или гомологии последовательностей с помощью BLAST и PSI-BLAST с базами данных и наборами данных метагенома. Сервер FFAS03 можно найти по адресу: http: // ffas.burnham.org/ffas-cgi/cgi/document.pl.
The Integrated Microbial Genomes and Metagenomes (IMG / M) [38] — это система управления данными для сравнительного анализа данных последовательностей метагенома. IMG / M-HMP [39], в частности, содержит данные метагенома из проекта Human Microbiome Project (HMP) [40]. Он содержит 748 наборов данных метагенома, сгенерированных из образцов секвенирования из разных участков тела, а также инструменты для сравнительного анализа между размещенными последовательностями и последовательностями, предоставленными пользователем. Последовательность белка BrpA использовалась в качестве запрашиваемой последовательности для BLAST (1e- 05 и 1e- 50 максимальное значение отсечки е) против всех доступных метагеномов из 17 участков тела из набора данных HMP.Сервер IMG / M-HMP можно найти по адресу: http://www.hmpdacc-resources.org/cgi-bin/imgm_hmp/main.cgi.
Манипуляции с ДНК и клонирование
Индукция фосмид от НИЗКОГО к большому количеству копий выполнялась в соответствии с инструкциями производителя. Набор мини-препарата Qiagen QIAprep Spin использовался для извлечения фосмид с использованием протокола, описанного производителем. Гены brpA L , brpA S и brpAatfA амплифицировали с использованием мастер-смеси ReddyMix PCR (Thermo Scientific).Продукты ПЦР очищали с помощью набора для очистки ПЦР Qiagen и расщепляли рестрикционными ферментами XbaI и PstI (Roche Applied Science) с последующим лигированием с использованием набора ДНК-лигаз Fast-Link (Epicenter Biotechnologies) с аналогичным образом расщепленной плазмидой pCI372. Электрокомпетентные E. coli MKh23 трансформировали смесью для лигирования и высевали на чашки с агаром LB, содержащим 20 мкг / мл Cm, для отбора.
Набор для экспрессии pBAD TOPO TA (Invitrogen, Carlsbad CA, USA) использовали для клонирования продуктов ПЦР в вектор экспрессии pBAD в соответствии с инструкциями производителя.Гены brpA L , brpA S и brpAatfA амплифицировали, как описано выше. Полученные плазмиды, содержащие интересующие гены, электропорировали в свежекомпетентный E. coli EPI300 и высевали на агар LB, содержащий 100 мкг / мл ампициллина.
ПЦР колонийвыполняли на устойчивых трансформантах с использованием комбинации праймеров, специфичных для гена и плазмиды (pCI372 или pBAD), для подтверждения наличия и размера вставки.Вставки секвенировали для подтверждения правильности нуклеотидной последовательности (GATC Biotech, Германия).
Эксперименты по выращиванию
Культуры выращивали в течение ночи в соответствующих средах (бульон LB или M9). Затем клетки собирали, промывали стерильным раствором Рингера крепостью четверть и ресуспендировали в свежей среде. 2% (об. / Об.) Посевной материал субкультивировали в свежем бульоне, содержащем хлорид натрия (NaCl), и 200 мкл переносили в стерильный 96-луночный микротитровальный планшет (Starstedt Inc.Ньютон, США). Для экспериментов с минимальной средой добавляли стерилизованные фильтрованием исходные растворы осмопротекторов бетаина, L-карнитина и L-пролина до конечной концентрации 1 мМ. Планшеты для микротитрования инкубировали при 37 ° C в течение 24–48 часов в автоматическом спектрофотометре (Tecan Genios), который регистрировал OD 595 нм каждый час. Данные были впоследствии получены и проанализированы с помощью программы Magellan 3.
Выживание в среде с высоким содержанием соли в присутствии и в отсутствие 20 мкМ β-каротина оценивали путем сбора ночных культур, как указано выше, и субкультивирования в 3% NaCl или 7% NaCl для штаммов MKh23 и EPI300 соответственно.Культуры инкубировали при 37 ° C как в аэробных (при встряхивании), так и в анаэробных (статических) условиях в течение 48 часов. Затем производили серийные разведения культур в стерильном растворе Рингера крепостью четверть и высевали на агар LB. Жизнеспособные клетки подсчитывали и рассчитывали как количество колониеобразующих единиц на миллилитр (КОЕ / мл).
Графики(созданные с помощью SigmaPlot 10.0) представлены как среднее из трех экспериментов, с полосами ошибок, представляющими стандартную ошибку среднего (SEM).
Мутагенез транспозонов
Мутагенез транспозоновпроводили на SMG 6 с использованием набора для транспозиции EZTn- 5 < oriV / KAN-2> in vitro (Epicenter Biotechnologies) в соответствии с инструкциями производителя. E. coli EPI300 трансформировали реакционной смесью транспозонов и отбирали на планшетах, содержащих Cm и Kan (12,5 и 50 мкг / мл соответственно). Вставки транспозонов в интересующие области подтверждали с помощью ПЦР.Области, содержащие транспозон EZTn 5 , примерно на 1,9 т.п.н. больше, чем область, покрытая праймерами. Продукты ПЦР правильного размера секвенировали с концов транспозона с использованием праймеров EZTn FP-1 и RP-1 (таблица S1) для подтверждения местоположения вставки транспозона. Все секвенирование было выполнено GATC Biotech (Германия).
Результаты
Скрининг метагеномной библиотеки кишечника человека
Пятьдесят три солеустойчивых клона были идентифицированы при скрининге приблизительно 23000 клонов библиотеки фосмид.Клоны были обозначены как SMG (для Salt MetaGenome) 1–53. Шесть клонов выросли в течение 24 часов (SMG 1–6), а остальные 47 выросли в течение следующих 24–48 часов. В центре внимания этого исследования были клоны SMG 1 и SMG 6, оба из которых, как было обнаружено, содержали одну и ту же вставку. SMG 6 был выбран для дальнейшего анализа. Предыдущая работа была сосредоточена на клонах SMG 3 и SMG 5 и SMG 25 [22], [23]. Конечное секвенирование показало, что другой клон, SMG 52, имеет те же последовательности на 5′- и 3′-концах фосмиды, что и SMG 1 и SMG 6.Кроме того, SMG 52 продемонстрировал профиль роста, аналогичный SMG 1 и 6, при выращивании в условиях стресса хлорида натрия (NaCl), и все три клона имеют значительное ( P <0,0001 для всех клонов) преимущество роста в присутствии 7% добавленного NaCl. по сравнению со штаммом-хозяином EPI300, несущим пустой фосмидный вектор (pCC1FOS) (рис. 1B). Никакой разницы в росте между любым из клонов не наблюдалось только для LB (фигура 1A). Дальнейшее исследование с использованием пиросеквенирования показало, что SMG 52 содержал ту же вставку, что и SMG 1 и SMG 6.
Секвенирование фосмид и биоинформатический анализ
Вставки фосмид из SMG 1, 6 и 52 были полностью секвенированы и собраны GATC Biotech (Германия) с использованием мини-цикла GS-FLX Titanium. Было обнаружено, что все три вставки идентичны, разделяя 100% нуклеотидную идентичность по всей длине вставки фосмиды (~ 34 т.п.н.). Прогнозирование генов с использованием FGENESB предсказало наличие тридцати предполагаемых открытых рамок считывания (см. Таблицу 2). Транслируемые нуклеотидные последовательности подвергали анализу BLASTP (максимальное значение отсечки для 1e- 05 ) для идентификации гомологичных последовательностей в базе данных.Подавляющее большинство соответствовало белкам из филума грамотрицательных бактерий Bacteroidetes с аминокислотной идентичностью от 26% до 100%. Белки с аминокислотной идентичностью 99–100% соответствовали трем видам Bacteroides , а именно Bacteroides thetaiotaomicron VPI-5482, Bacteroides sp. 1_1_6 и Bacteroides sp. 1_1_14. Остальная часть соответствовала другим представителям филума Bacteroidetes из родов Alistipes , Prevotella и Odoribacter , а также грамположительным Firmicutes из семейства Lachnospiraceridium 45 и Clostoshoraridium и Clostrapiraceae и Clostrapiraceae и родовые. .
Функциональное назначение кодируемых белков на SMG 6 на основе поиска гомологии с использованием BLASTP показало, что ген 26, по прогнозам, кодирует предполагаемый мембранный белок, хотя ни один из идентифицированных потенциальных гомологов не имеет более 30% аминокислотной идентичности (помещая их в « сумеречная зона »эволюционного родства). Этот белок также имел сходство последовательностей с brp / blh -семейством 15,15′-β-каротинмонооксигеназа из Prevotella marshii DSM 16973 (28% идентичности по 254 аминокислотам) и с симпортером пролина из Bifidobacterium bifidum BGN 4 (25% идентичности по 222 аминокислотам).Учитывая, что пролин является важным осмопротектором, используемым бактериями для противодействия пагубным эффектам осмотического стресса, вызванного солью [41], [42], мы решили продолжить изучение этого гена, который мы назвали brpA, для дальнейшего изучения.
Особенности SMG 6 и
brpA / BrpAГен brpA — номер 26 из 30 предсказанных генов на SMG 6 (рис. 2). Предполагается, что это будет одиночная открытая рамка считывания, за которой следует и за которым следует семигенный и четырехгенный оперон, соответственно.Он фланкирован выше и ниже по потоку рядом генов, которые, как предполагается, кодируют белки с ацетил-, ацил- или гликозилтрансферазной активностью. Есть признаки того, что brpA, и ряд смежных генов были приобретены посредством латерального переноса генов (LGT). Фосмидная вставка SMG 6 имеет размер ~ 34,26 т.п.н., и ее общее% содержания G + C составляет 41,92%. Наивысшая генетическая идентичность большой части генов относится к видам Bacteroides , с идентичностью до 100% в некоторых случаях.% G + C-содержание рода Bacteroides колеблется в пределах 40–48%, при этом B. thetaiotaomicron VPI-5482, Bacteroides sp. 1_1_6 и Bacteroides sp. 1_1_14 все с содержанием G + C примерно 43% (Genomes Online Database, GOLD; http://www.genomesonline.org/). Содержание% G + C генов на фосмидной вставке SMG 6 показано на рисунке 2A. Гены в первой половине вставки, до гена 16 включительно, имеют процентное содержание G + C ~ 45%; аналогично среднему процентному содержанию G + C для рода Bacteroides .Вторая половина вставки демонстрирует явное падение содержания% G + C до ~ 37%. Содержание% G + C в некоторых отдельных генах также низкое, в том числе atfA и brpA (рис. 2A), которые имеют гомологию BLAST с грамположительными бактериями с низким G + C, в основном из Phylum Firmicutes .
Рисунок 2. Обзор фосмидной вставки SMG 6 и особенности конкретных генов.
( A ) Генная карта вставки SMG 6, отображающая ориентацию гена и индивидуальное содержание% G + C, обозначенное градиентной цветной полосой.Номера генов соответствуют номерам в таблице 2 и нарисованы приблизительно в масштабе. ( B ) Сосредоточьтесь на генах 25 ( atfA ) и 26 ( brpA ), показывая области, клонированные для каждой конструкции. ( C ) Подробное изображение предполагаемых стартовых кодонов ATG и TTG brpA , включая вышележащие области, а также предполагаемые промоторные области (выделены жирным шрифтом) и последовательности сайтов связывания транскрипционных факторов (синие и оранжевые прямоугольники). ( D ) TMHMM-предсказание семи трансмембранных областей в BrpA.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0103318.g002
Было предсказано, что ген brpA будет иметь разные стартовые кодоны с использованием FGENESB в зависимости от используемых настроек; альтернативный стартовый кодон TTG (лейцин) был предсказан с использованием «родового бактериального», что дало белок из 232 аминокислот. Учитывая, что ряд белков в SMG 6 имеет 100% аминокислотную идентичность с Bacteroides thetaiotaomicron VPI-5482, он также был выбран в качестве ближайшего организма для предсказания генов и предсказал ATG (метионин) в качестве стартового кодона, 117 оснований. -пара перед предсказанным стартовым кодоном TTG (кодирующим белок из 271 аминокислоты).GeneMark использовался для предсказания генов в качестве сравнения, и он также предсказал тот же самый ATG, что и стартовый кодон. Была обнаружена предполагаемая последовательность сайта связывания рибосомы (RBS) (AGGTTT), оканчивающаяся на семь пар оснований перед TTG, в то время как более сильная последовательность RBS (AGTAGG) заканчивалась на 19 пар оснований перед стартовым кодоном ATG. Предполагаемые промоторные области E. coli-типа -10 и -35 были обнаружены с использованием BProm (www.softberry.com) перед обоими предполагаемыми стартовыми кодонами. Ручная проверка вышележащих последовательностей также выявила присутствие почти идеальной промоторной области Bacteroidetes — 7 / -33 (TAGGTTTG / TTTT; консенсус TAnnTTTG / TTTG) [43], [44] перед стартовым кодоном TTG и GGTATTTG / TTTT на -14 / -30 (GGTATTTG / TTTT) перед ATG.Предсказанные промоторные последовательности вместе с предполагаемыми сайтами связывания факторов транскрипции можно увидеть на рисунке 2C. Предполагаемый сайт связывания RpoS находится перед стартовым кодоном ATG, в то время как последовательность связывания OxyR, по прогнозам, располагается перед стартовым кодоном TTG.
Было предсказано, что белок BrpA представляет собой мембранный белок 30,9 кДа с семью трансмембранными областями, как предсказано с помощью TMHMM (фигура 2D). BrpA имеет прогнозируемую pI 9,42 и состоит на ~ 46% из гидрофобных аминокислот, как и другие микробные белки Brp / Blh (диапазон pI 8.89–9,56 и 48–56% гидрофобных аминокислот) [24]. Для BrpA не было обнаружено последовательности сигнального пептида, консервативных доменов или мотивов последовательности. Мы также искали мотивы в белковых последовательностях, гомологичных BrpA из BLAST. Мотив липокалина был обнаружен в гипотетическом белке из Clostridium sp KLE-1755. Интересно, что липокалиновые мотивы обнаруживаются в белках, которые связывают небольшие гидрофобные молекулы, такие как ретиноиды, каротиноиды, липиды и стероиды [45]. Таблица S2 показывает мотив липокалина и соответствующий мотив, идентифицированные в Clostridium sp KLE-1755.Аминокислотная последовательность BrpA вместе с 10 верхними гомологами BLAST была выровнена для идентификации консервативных остатков в этих белках. Остатки, которые соответствуют мотиву липокалина, отображаются зеленым, а те, которые не соответствуют, — красным (таблица S2).
Из-за низкой идентичности последовательности BLAST сервер FFAS03 использовался с целью идентификации гомологов BrpA. Лучшими гомологами были неохарактеризованный бактериальный белок (COG 3274; ацилтрансфераза) и предсказанный мембранный белок (COG 4763) со значительными оценками -40.70 и -23,30 соответственно. Интересно, что лучшим гомологом в банке данных белков (PDB) был родопсин архейного типа (3ug9), хотя оценка -9,43 не достигла значимости (-9,50).
База данных IMG / M-HMP, которая содержит все метагеномные наборы данных, охватывающие 17 участков тела из проекта Human Microbiome Project (HMP), также была проверена на наличие гомологов BrpA. Используя комбинацию самых мягких и самых строгих критериев поиска (максимальное отсеченное значение e-значения 1e-05 и 1e-50, соответственно), гомологи BrpA были идентифицированы в наборах данных HMP (рис. 3).Кроме того, было 145 обращений к набору данных MetaHit с использованием BLAST на сервере FFAS03.
Ген
brpA придает фенотип солеустойчивости при гетерологичной экспрессии в Escherichia coliГен brpA (ген 26) был клонирован из обоих предсказанных стартовых кодонов и экспрессирован в E. coli MKh23. Оба фрагмента значительно повышали солеустойчивость МХ23. Клетки, экспрессирующие более крупный фрагмент ( brpA L ), имели наиболее значительный эффект ( P = 0.0002) в присутствии 3% NaCl. Хотя клетки, экспрессирующие меньший фрагмент ( brpA S ), имели более медленный профиль роста и более длительную лаг-фазу, чем более крупный фрагмент ( brpA L ), обе показали значительное преимущество роста по сравнению с E. coli. Контроль MKh23, несущий пустую плазмиду (pCI372) ( P = 0,0039) (фигура 4B). Предполагается, что ген, расположенный непосредственно перед brpA , кодирует предполагаемый мембранный белок из 98 аминокислот (предполагаемая ацилтрансфераза), который мы назвали atfA .Ген atfA также был клонирован в комбинации с brpA ( brpAatfA ). Оба гена в комбинации не увеличивали солеустойчивость MKh23 по сравнению с brpA L отдельно при выращивании в LB + 3% NaCl, но повышение солеустойчивости было значительным ( P = 0,0002) (Рисунок 4B) .
Рисунок 4. Рост E. coli MKh23 :: pCI372 и E. coli MKh23, несущих кодируемую плазмидой копию brpA L , brpA S или brpAatfA в (AatfA) Бульон LB или (B) LB + 3% NaCl.
Все гены придают MKh23 значительный фенотип солеустойчивости по сравнению с клетками с пустым плазмидным вектором. Все значения являются средними из трех экспериментов, а планки ошибок представляют стандартную ошибку среднего (SEM).
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0103318.g004
L-пролин больше не увеличивал солевую толерантность
Однажды мы показали, что ген brpA может давать фенотип солеустойчивости при экспрессии в E.coli , мы стремились расшифровать механизм действия и тем самым приписать функцию кодируемому белку. Учитывая, что BLASTP-анализ последовательности BrpA выявил гомологию с симпортером пролина, кривые роста были выполнены в минимальной среде с добавлением L-пролина, а также других распространенных осмопротекторов, бетаина и L-карнитина (конечная концентрация 1 мМ). Однако в присутствии каких-либо добавленных осмопротекторных соединений не наблюдалось никакого преимущества в росте, что позволяет предположить, что BrpA не является системой захвата осмопротектора.
Функциональная аннотация для
brpA АнализBLASTP также показал, что белок BrpA проявляет гомологию с β-каротин 15,15′-монооксигеназой семейства brp / blh . Такие белки родственны бактериородопсинам [24] и обозначены как родственный бактерио-опсин белок (brp) / белок-гомолог brp-подобный (blh). Было показано, что белки Brp / Blh обладают активностью β-каротин 15,15′-монооксигеназы; расщепление β-каротина на две молекулы all-trans retinal (альдегид витамина A) [25].Полученный ретиналь связан с белком родопсина, и клетки, экспрессирующие такие белки, приобретают оранжево-красный цвет, что указывает на присутствие сетчатки в клеточной мембране [46] — [48]. Штаммы, содержащие brpA , выращивали в присутствии β-каротина, и наблюдали за появлением в осадках клеток характерной красно-оранжевой окраски. Клетки E. coli MKh23, несущие ген brpA на плазмиде pCI372, не показали какого-либо явного развития окраски, скорее всего, из-за того, что pCI372 не индуцируется (рис. 5A).
Рис. 5. Пигментация, наблюдаемая в осадках клеток.
( A ) Внешний вид клеточных гранул, выращенных в LB с добавлением β-каротина. Слева направо: E. coli MKh23 :: pCI372, MKh23 :: pCI372- brpA L , MKh23 :: pCI372- brpA S и MKh23 :: pCI372- brpAatf. ( B ) Внешний вид клеточных гранул клонов, выращенных в LB с добавлением β-каротина и раствором для индукции копирования (L-арабиноза).Слева направо: E. coli EPI300 :: pCC1FOS, SMG 1, SMG 6 и SMG 52. ( C ) Внешний вид клеточных гранул, выращенных в LB с добавлением β-каротина и L-арабинозы. Слева направо: E. coli EPI300 :: pBAD, EPI300 :: pBAD- brpA S , EPI300 :: pBAD- brpA L и EPI300 :: pBAD- brpAatfA .
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0103318.g005
Учитывая, что в ряде предыдущих исследований сообщалось о необходимости использования индуцибельного вектора для визуализации пигментации в осадках клеток [46] — [50] , мы культивировали исходные клоны фосмиды (которые могут быть индуцированы благодаря способности фосмидного вектора pCC1FOS контролировать копирование) в присутствии β-каротина и включили раствор для индукции, чтобы индуцировать фосмиду от низкого до высокого числа копий.Осадки клеток приобрели интенсивный красный / оранжевый цвет, в то время как клетки с пустым вектором — нет (рис. 5В). Чтобы подтвердить, что белок BrpA отвечает за этот фенотип, мы клонировали brpA изолированно в индуцируемый вектор экспрессии pBAD и трансформировали его в E.coli EPI300 и повторили эксперименты по выращиванию. Опять же, осадок клеток приобрел характерный красно-оранжевый цвет (рис. 5C).
brpA также придает устойчивость к соли E.coli EPI300Гены ( brpA L , brpA S и brpAatfA ) также клонировали в вектор экспрессии pBAD и трансформировали в E. coli EPI300. Все трансформированные штаммы проявляли повышенную солеустойчивость по сравнению с хозяином, содержащим пустой вектор pBAD, хотя EPI300 :: pBAD- brpA S в меньшей степени, аналогично нашим наблюдениям с MKh23 выше (фиг. S1).
Влияние β-каротина на выживаемость в средах с высоким содержанием соли
Влияние β-каротина на выживаемость как E.coli MKh23 и EPI300. Выживаемость штаммов, несущих кодируемую плазмидой копию brpA , сравнивали с контролями (несущими пустую плазмиду) в высокосолевой среде (3% NaCl для MKh23 и 7% для EPI300) в присутствии и отсутствии β-каротина после 48-часовой период, как аэробно, так и анаэробно (Рисунок S2). -Каротин не оказывал осмопротекторного действия во время солевого стресса для контрольных штаммов или штаммов, несущих копию гена brpA в тестируемых условиях, однако фенотип повышенной солеустойчивости наблюдался как в аэробных, так и в анаэробных условиях.
Мутагенез транспозонов
Мутагенез транспозонавыполняли с использованием системы транспозиции EZTn 5 in vitro (Epicenter Biotechnologies) для создания нокаут-мутантов SMG 6. Клоны, несущие вставку транспозона в brpA и соседние гены, идентифицировали с помощью ПЦР. Пару праймеров brpAatfA FP и RP использовали для амплификации этой области, генерируя продукты ПЦР размером ~ 1,4 т.п.н. в отсутствие вставки транспозона и продукты размером ~ 3.3 т.п.н., если транспозон присутствовал (рис. 6А). После идентификации положительных клонов местоположение транспозона подтверждали секвенированием от концов транспозона. Мы идентифицировали четыре мутанта транспозона в SMG 6; а именно 6-EZTn № 24, 26, 34 и 38. Расположение вставок транспозона представлено на рисунке 6B. Цель состояла в том, чтобы идентифицировать клоны, у которых отсутствовала пигментация после транспозиции. Клоны, содержащие вставку транспозона, не демонстрируют такой же интенсивной красной пигментации, как у SMG 6, и, хотя пигментация заметно меньше, некоторая остаточная окраска тем не менее остается (рис. 6C).
Рисунок 6. EZTn 5 транспозонный мутагенез SMG 6 был выполнен для идентификации мутантов, лишенных пигментации, при выращивании в присутствии β-каротина.
( A ) Клоны, положительные по транспозону в этой области фосмидной вставки SMG 6, были идентифицированы с помощью ПЦР с ампликонами ~ 3,3 т.п.н., указывающими на событие вставки. ( B ) Примерное расположение вставок транспозонов по отношению к brpA и соседним генам. (C) Внешний вид осадка клеток SMG 6 и мутантов со вставкой транспозона (EZTn № 24, № 26, № 34 и № 38) после роста в присутствии β-каротина.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0103318.g006
Обсуждение
В текущем исследовании мы идентифицировали и охарактеризовали новый локус солеустойчивости из микробиома кишечника человека. Функциональное назначение кодируемого им белка BrpA с использованием BLAST вернуло гомологи, в основном аннотированные как гипотетические или предполагаемые мембранные белки. Единственным ключом к разгадке возможной функции белка было то, что он также имел сходство последовательностей (хотя и <30%) с симпортером пролина и β-каротин-15,15'-монооксигеназой семейства brp / blh .Гомологии последовательностей менее 30% считаются находящимися в «сумеречной зоне», и достоверность функциональных аннотаций снижается ниже этого порога [51], [52]. Тем не менее, мы сочли целесообразным продолжить изучение этого гена, поскольку пролин — это хорошо известное соединение, используемое бактериями в качестве осмопротектора при воздействии осмотического стресса.
Эксперименты по выращиванию в минимальных средах с добавлением L-пролина и других осмопротекторов не влияли на рост или устойчивость к соли. Ген, который мы назвали brpA , возможно, кодирует предполагаемую β-каротин 15,15′-монооксигеназу из семейства brp / blh .Было показано, что такие белки катализируют превращение β-каротина в две молекулы all-trans ретиналя (альдегид витамина А) (рис. 7A) [24], [25]. Рост метагеномного клона SMG 6 в присутствии экзогенного β-каротина привел к получению осадка клеток характерного оранжевого / красного цвета. Ряд других исследований показал, что бактериальные клетки, экспрессирующие плазмиду, кодирующую гены биосинтеза β-каротина в дополнение к гену brp / blh и гену, кодирующему протеородопсин (PR), принимают одинаковый цвет из-за расщепления β-каротина до сетчатки. и последующее связывание сетчатки протеородопсинами с клеточной мембраной [46] — [49].Таким образом, отсутствие какого-либо очевидного гена, кодирующего PR, в SMG 6 не объясняет наличие цвета в осадке клеток клонов SMG. Кроме того, когда bprA клонировали изолированно, осадок клеток все еще имел пигментацию, что указывает на то, что одного brpA достаточно для придания этого фенотипа. Однако есть несколько возможных объяснений пигментации; Анализ in silico показывает, что brpA , как предполагается, обладает ацилтрансферазной активностью (COG 3274), как и atfA , ген непосредственно перед brpA .Ген atfA был клонирован в комбинации с brpA , однако экспрессия обоих генов вместе не оказала заметного влияния на наблюдаемую степень пигментации или солевой толерантности. Каротиноиды и ретиноиды — это гидрофобные липофильные молекулы. Большинство каротиноидов находится в гидрофобном ядре липидных мембран, а также в липидных глобулах и других гидрофобных средах [53], [54]. Было показано, что ацилированные каротиноиды встраиваются в мембрану, и предсказанная ацилтрансферазная активность BrpA может объяснить пигментацию клеточного осадка в отсутствие белка родопсина [55].В Staphylococcus aureus ацилтрансфераза является ключевым ферментом в пути биосинтеза оранжевого каротиноида стафилоксантина [56]. Первоначально считалось, что этот фермент выполняет заключительный этап биосинтеза стафилоксантина, хотя недавно было показано, что на самом деле это предпоследний этап [57]. Перенос полярной ацильной группы или ацилсодержащих групп, таких как гидроксильные или кето-группы, на каротиноиды, вероятно, сделает возможным их взаимодействие с фосфатными головными группами липидов, таким образом закрепляя их внутри мембран [55], [58].
Рис. 7. Возможный (е) механизм (ы) действия BrpA (A) Представление известной реакции образования сетчатки.
B-каротин расщепляется по центральной 15,15 ‘связи brp 15,15′- β-каротинмонооксигеназой с образованием двух молекул all-trans retinal (альдегид витамина A). Мы предполагаем, что brpA может регулироваться двумя промоторами, при этом трансляция инициируется одним из двух потенциальных стартовых кодонов (ATG и TTG), в зависимости от условий окружающей среды.Мы предполагаем, что проиллюстрируем некоторые возможности, обсуждаемые в тексте. ( B ) Фенотип пигментации: регуляция brpA от промотора 1 (перед стартовым кодоном ATG) в «нормальных» клеточных условиях или, возможно, с помощью β-каротина, может привести к ( B1 ) BrpA добавлению ацильной группы к β-каротину, позволяя ему взаимодействовать с фосфатными головными группами липидов и закрепляя его в гидрофобном ядре липидной мембраны, или ( B2 ) BrpA может расщеплять β-каротин до сетчатки и впоследствии связывать производное сетчатки, закрепляя его в клеточная мембрана.( C ) Ответ на стресс: регуляция brpA от промотора 2 (перед стартовым кодоном TTG) может быть инициирована сигналами окружающей среды, такими как изменения внешней осмолярности, что приводит к повышению толерантности или устойчивости к стрессу окружающей среды, например повышению Концентрации NaCl по неизвестному пока механизму. Альтернативные стартовые кодоны, такие как TTG, были обнаружены в ряде генов реакции на стресс.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0103318.g007
Присутствие мотива липокалина было идентифицировано в BLAST-гомологе BrpA. Белки липокалина могут связывать гидрофобные молекулы, такие как каротиноиды и ретиноиды. Однако кажется маловероятным, что это имеет место с BrpA, поскольку мотив совершенно другой и лишен характерной сигнатуры глицин-X-триптофан (G-X-W), обнаруживаемой почти во всех липокалинах [59]. Белок BrpA имеет семь предсказанных трансмембранных областей, характерных для белков родопсина [60]. Ранее предполагалось, что Brp / Blh-подобные белки могут быть многофункциональными и как расщеплять β-каротин, так и впоследствии транспортировать или связывать производный all-trans сетчатки, хотя это не было продемонстрировано экспериментально [25].
Четыре мутанта транспозона SMG 6 были идентифицированы в этом исследовании с помощью ПЦР. Ожидалось получить мутанты без пигментации при выращивании в присутствии β-каротина. Хотя есть четкое видимое различие во внешнем виде гранул мутантов по сравнению с SMG 6, каждый из мутантов сохраняет некоторый уровень пигментации, хотя и в меньшей степени и с уменьшенной интенсивностью окраски. Вставка транспозона в гены перед brpA (мутанты № 24 и № 34) указывает на полярный эффект, опосредующий снижение степени пигментации.Удивительно, что некоторая пигментация остается в клонах, содержащих транспозон в гене brpA (мутанты № 26 и № 38), что указывает на остаточное накопление каротиноидов, возможно, из-за активности ацилтрансферазы atfA .
% содержания G + C в отдельных генах SMG 6 снижается до 30,64% для гена 25 ( atfA ), в то время как его соседний ген, brpA , составляет 32,05%. Кроме того, предполагается, что только 12% из 100 лучших попаданий BLASTP в BrpA будут от грамотрицательных бактерий.Остальные 88% представлены в основном белками, сходными с низкими G + C, грамположительными типами Firmicutes , в основном из родов Clostridium, Enterococcus и Streptococcus среди других. Взятые вместе, эти наблюдения предполагают, что большая часть этой области, включая особенно низкий% G + C, гены atfA и brpA , были приобретены посредством события LGT [61], [62]. Действительно, в поддержку этого есть доказательства, что гена типа brp / blh , наряду с родопсинами, подвергаются частым событиям LGT [46], [63] — [65].У бактерий, продуцирующих β-каротин, только эти два гена необходимы для производства сетчатки, которая связана с белком родопсина, что дает бактерии-реципиенту способность собирать световую энергию нефотосинтетическим путем и преобразовывать ее в химическую энергию. Приобретение гена родопсина в кишечнике было бы несколько излишним из-за афотической природы кишечной среды. Однако β-каротинмонооксигеназа brp / blh может быть полезной для расщепления β-каротина пищевого происхождения.
Было два возможных стартовых кодона, предсказанных для гена brpA с использованием программы предсказания гена FGENESB.Используя параметр «бактериальный родовой» в качестве ближайшего организма, был предсказан ген ( brpA S ), кодирующий белок из 232 аминокислот с альтернативным инициирующим кодоном TTG (лейцин). Поскольку ряд белков, кодируемых SMG 6, на 100% идентичны аминокислотам с Bacteroides thetaiotaomicron VPI-5482, этот организм также использовался в качестве параметра «ближайшего организма». Используя B. thetaiotaomicron VPI-5482 в качестве «ближайшего организма», был предсказан ген ( brpA L ), кодирующий белок из 271 аминокислоты с стартовым кодоном ATG (метионин).GeneMark также предсказал, что ATG будет стартовым кодоном. Клонирование и экспрессия гена из обоих предсказанных стартовых кодонов придавали устойчивость к соли E. coli , хотя штаммы, экспрессирующие фрагмент brpA L , имели более короткую лаг-фазу и достигали более высокой конечной OD. Первоначально казалось вероятным, что ATG был истинным стартовым кодоном brpA , однако дальнейшая ручная проверка последовательностей перед обоими стартовыми кодонами показала характерную область промотора Bacteroides — 7 / -33, предшествующую кодону TTG, которая отклонялась от консенсус только по одному нуклеотиду.Существует также потенциальный промотор типа Bacteroides- перед ATG, но в положении -14 / -30 (GGTATTTG / TTTT). Следовательно, кажется вероятным, что TTG является фактическим стартовым кодоном в Bacteroides . Интересно, что предыдущие исследования показали, что использование альтернативных кодонов инициации, отличных от ATG, является общей чертой генов осмотолерантности у ряда желудочно-кишечных патогенов [12], [17]. Фенотип повышенной солеустойчивости brpA L по сравнению с brpA S может быть связан с тем, что ATG является наиболее часто используемым кодоном для инициации трансляции (~ 90% генов) в E.coli [66], а также наличие сильного RBS (AGUAGGU) перед стартовым кодоном ATG, который отличается от консенсусного RBS E. coli (AGGAGGU) только одним нуклеотидом. Взятые вместе, стартовый кодон ATG и сильный RBS E. coli , вероятно, приводят к более эффективным уровням транскрипции и трансляции, а также к повышенной экспрессии brpA в E. coli , по крайней мере, в условиях, испытанных в текущее исследование. Конечно, возможно, что два типа белков (длинный и короткий) экспрессируются в разных условиях окружающей среды, как ранее сообщалось для локуса мультистрессовой устойчивости HtrA [67].
Присутствие предполагаемого сайта связывания RpoS предсказывается перед стартовым кодоном ATG brpA . Альтернативный сигма-фактор (сигма 38) RpoS является главным регулятором общей стрессовой реакции, индуцированной во время стационарной фазы у E. coli и других грамотрицательных бактерий [68]. Кроме того, RpoS регулирует экспрессию большого количества генов в ответ на различные стрессы, включая солевой стресс [69] — [71]. Также существует предполагаемый сайт связывания OxyR в восходящей области brpA .OxyR является регулятором реакции на окислительный стресс у многих бактерий [72], а каротиноиды могут действовать как антиоксиданты и могут повышать устойчивость к окислительному стрессу [73], [74]. Возможно, что ген brpA транскрибируется с двух промоторов в разных условиях окружающей среды, аналогично типу регуляции, наблюдаемому с транспортером осмопротектора ProP в E. coli, , где ген proP транскрибируется с промотора 1 ( P1) в первую очередь в ответ на изменения осмолярности и промотора 2 (P2) во время стационарной фазы [75], [76].
Аминокислотная последовательность BrpA использовалась для поиска BLAST по всем метагеномам из набора данных HMP при самом низком (1e- 05 ) и самом высоком (1e- 50 ) значении е. Попадания в BrpA были наиболее распространены в образцах стула, наддесневого налета и метагенома языка при самом низком значении е (рис. 3В). Большинство этих совпадений имели довольно низкий процент идентичностей в диапазоне 25–35%. Когда пороговое значение e-value было увеличено до 1e- 50 , было идентифицировано только 13 предполагаемых гомологов BrpA и только из образцов метагенома стула (рис. 3A) и, следовательно, оказалось, что это редкий ген, обнаруженный в некоторых штаммах Bacteroides. thetaiotaomicron , который является одним из наиболее распространенных видов в микробиоме кишечника человека, который, как было показано, составляет 6% всех бактерий кишечной микробиоты человека [77].Интересно, что гомологи этого гена наиболее часто встречаются на участках тела (язык, суб- и наддесневой налет, просвет кишечника / стул), где микробиота может встречаться с β-каротином (то есть из пищевых источников).
Каротиноиды, как было показано, защищают клетки от различных стрессов окружающей среды, таких как осмотические, окислительные и световые, а также укрепляют и обеспечивают повышенную жесткость мембран [54], [74], [78] — [80]. В этом исследовании β-каротин, однако, не обеспечивал дальнейшего повышения солеустойчивости в испытанных условиях и, следовательно, не проявлял осмопротекторной способности.Ферменты ацилтрансферазы также связаны с различными стрессовыми реакциями, включая осмотический стресс. Например, ацилтрансфераза HtrB обеспечивает защиту и проявляет повышенную экспрессию в ответ на тепловой, кислотный, окислительный и осмотический стресс у Campylobacter jejuni и Salmonella typhimurium [81], в то время как ацилтрансферазы также связаны со стрессовой реакцией у Pseudomonas putida [82].
В текущем исследовании мы использовали комбинированный функциональный метагеномный и биоинформатический подход для идентификации нового гена микробиома кишечника человека, который ранее не был связан с толерантностью к соли.Ген brpA кодирует белок с гомологией с β-каротин 15,15′-монооксигеназой семейства brp / blh . При экспрессии в E. coli BrpA придает фенотип солеустойчивости, и осадок клеток приобретает красную / оранжевую пигментацию при выращивании в присутствии экзогенного β-каротина.
Вспомогательная информация
Рисунок S1.
Рост E. coli EPI300 :: pBAD и EPI300 :: pBAD- brpA S ( P =0008), EPI300 :: pBAD- brpA L ( P = 0,0002) и EPI300 :: pBAD- brpAatfA
9045 = 0,0001) в (A) бульоне LB и (B) бульоне LB с добавлением 7% NaCl. Все три штамма имели статистически значимое повышение солеустойчивости по сравнению с EPI300, несущим пустую копию вектора pBAD. Цифры в скобках указывают на значимые значения P (непарный студент t -тест).Все значения являются средними из трех экспериментов, а планки ошибок представляют стандартную ошибку среднего (SEM).https://doi.org/10.1371/journal.pone.0103318.s001
(PDF)
Рисунок S2.
Влияние β-каротина на выживаемость штаммов MKh23 и штаммов EPI300 оценивали в аэробных и анаэробных условиях в (A) бульоне LB с 3% NaCl и (B) бульоне LB с 7% NaCl. Жизнеспособные клетки определяли путем расчета среднего КОЕ на миллилитр через 48 часов.Результаты являются репрезентативными для трехкратных экспериментов, а планки погрешностей представляют собой стандартную ошибку среднего (SEM).
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0103318.s002
(PDF)
Таблица S2.
1 штамм 3_1_57FAA_CT1. Мотив липокалина был обнаружен в гомологе BrpA из Clostridium sp. КЛЕ1755. Белки липокалина могут связывать гидрофобные молекулы, такие как каротиноиды и ретиноиды. Десять лучших гомологов BLASTP к BrpA были выровнены для сравнения этих белковых последовательностей и идентификации предполагаемых мотивов липокалина.Мотив консенсуса отображается в верхнем ряду таблицы 4. Остатки, которые соответствуют консенсусу, показаны зеленым цветом, а несоответствия показаны красным.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0103318.s004
(PDF)
Вклад авторов
Задумал и спроектировал эксперименты: EC RDS JRM CH. Проведены эксперименты: ЭК. Проанализированы данные: EC RDS JRM CH. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты для анализа: EC RDS JRM CH. Написал статью: EC RDS JRM CH.
Ссылки
- 1.Hess M, Sczyrba A, Egan R, Kim TW, Chokhawala H, et al. (2011) Метагеномное открытие генов и геномов, разрушающих биомассу, из рубца коров. Наука 331: 463–467.
- 2. Иваи С., Чай Б., Сул В.Дж., Коул Дж.Р., Хашшем С.А. и др. (2010) Генетаргетированная метагеномика выявляет обширное разнообразие генов ароматической диоксигеназы в окружающей среде. ISME J 4: 279–285.
- 3. Вентер Дж. К., Ремингтон К., Гейдельберг Дж. Ф., Халперн А. Л., Руш Д. и др. (2004) Секвенирование экологического генома Саргассова моря.Science 304: 66–74.
- 4. Culligan EP, Sleator RD, Marchesi JR, Hill C (2013) Метагеномика и открытие новых генов: перспективы и потенциал для новых терапевтических средств. Вирулентность 5.
- 5. Gillespie DE, Brady SF, Bettermann AD, Cianciotto NP, Liles MR, et al. (2002) Выделение антибиотиков турбомицина А и В из метагеномной библиотеки почвенной микробной ДНК. Appl Environ Microbiol 68: 4301–4306.
- 6. Heath C, Hu XP, Cary SC, Cowan D (2009) Идентификация новой алкалифильной эстеразы, активной при низких температурах, путем скрининга метагеномной библиотеки из почвы антарктической пустыни.Appl Environ Microbiol 75: 4657–4659.
- 7. Kallifidas D, Kang HS, Brady SF (2012) Тетаримицин A, антибиотик, активный против MRSA, идентифицированный посредством индуцированной экспрессии кластеров генов ДНК окружающей среды. J Am Chem Soc 134: 19552–19555.
- 8. Ламмле К., Зиппер Х, Брейер М., Хауэр Б., Бута С. и др. (2007) Идентификация новых ферментов с различной гидролитической активностью путем клонирования экспрессии метагенома. J Biotechnol 127: 575–592.
- 9. Фини А., Слейтор Р. Д. (2012) Микробиом кишечника человека: призрак в машине.Future Microbiol 7: 1235–1237.
- 10. Слеатор Р.Д. (2010) Человеческий сверхорганизм — микробы и человек. Med Hypotheses 74: 214–215.
- 11. Цинь Дж., Ли Р., Раес Дж., Арумугам М., Бургдорф К.С. и др. (2010) Каталог кишечных микробных генов человека, созданный с помощью метагеномного секвенирования. Природа 464: 59–65.
- 12. Hoffmann RF, McLernon S, Feeney A, Hill C, Sleator RD (2013) Единственная точечная мутация в листериальном betL sigma (A) -зависимом промоторе приводит к улучшенной устойчивости к осмо- и холоду и морфологическому сдвигу при повышенной осмолярности.Биоинженерия 4.
- 13. Луи П., О’Бирн С.П. (2010) Жизнь в кишечнике: реакция микробов на стресс в желудочно-кишечном тракте. Sci Prog 93: 7–36.
- 14. Sleator RD, Watson D, Hill C, Gahan CG (2009) Взаимодействие между Listeria monocytogenes и желудочно-кишечным трактом хозяина. Микробиология 155: 2463–2475.
- 15. Hill C, Cotter PD, Sleator RD, Gahan CGM (2001) Реакция на бактериальный стресс в Listeria monocytogenes : преодоление препятствий, налагаемых минимальной обработкой.Международный молочный журнал 12: 273–283.
- 16. Sleator RD, Hill C (2002) Бактериальная осмоадаптация: роль осмолитов в бактериальном стрессе и вирулентности. FEMS Microbiol Rev 26: 49–71.
- 17. Sleator RD, Gahan CG, Hill C (2003) Постгеномная оценка осмотолерантности Listeria monocytogenes. Appl Environ Microbiol 69: 1–9.
- 18. Эпштейн В. (2003) Роль и регуляция калия в бактериях. Prog Nucleic Acid Res Mol Biol 75: 293–320.
- 19. Кемпф Б., Бремер Э. (1998) Поглощение и синтез совместимых растворенных веществ в качестве реакции микробного стресса на среду с высокой осмоляльностью. Arch Microbiol 170: 319–330.
- 20. Кунте HJ (2006) Осморегуляция в бактериях: совместимые накопления растворенных веществ и осмосенсинг. Химия окружающей среды 3: 94–99.
- 21. Culligan EP, Marchesi JR, Hill C, Sleator RD (2012) Изучение микробиома кишечника человека на предмет новых генов устойчивости к стрессу. Кишечные микробы 3: 394–397.
- 22. Culligan EP, Sleator RD, Marchesi JR, Hill C (2012) Функциональная метагеномика выявляет новые локусы солеустойчивости из микробиома кишечника человека. ISME J 6: 1916–1925.
- 23. Culligan EP, Sleator RD, Marchesi JR, Hill C (2013) Функциональный экологический скрининг метагеномной библиотеки идентифицирует stlA ; Уникальный локус толерантности к соли из микробиома кишечника человека. PLOS ONE 8: e82985.
- 24. Kim YS, Kim NH, Yeom SJ, Kim SW, Oh DK (2009) Характеристика in vitro рекомбинантного белка Blh из некультивируемых морских бактерий как β-каротин 15,15′-диоксигеназы.J Biol Chem 284: 15781–15793.
- 25. Пек Р.Ф., Эчаварри-Эрасан Ч., Джонсон Э.А., Нью-Вирджиния, Кеннеди С.П. и др. (2001) brp и blh необходимы для синтеза ретинального кофактора бактериородопсина в Halobacterium salinarum. J Biol Chem 276: 5739–5744.
- 26. Haardt M, Kempf B, Faatz E, Bremer E (1995) Осмопротектор пролин бетаин является основным субстратом для зависимой от связывания транспортной системы ProU Escherichia coli K-12. Mol Gen Genet 246: 783–786.
- 27. Hayes F, Daly C, Fitzgerald GF (1990) Идентификация минимального репликона Lactococcus lactis subsp. lactis UC317 Плазмида pCI305. Appl Environ Microbiol 56: 202–209.
- 28. Jones BV, Marchesi JR (2007) Транспозонный захват (TRACA) плазмид, находящихся в подвижном метагеноме кишечника человека. Nat Методы 4: 55–61.
- 29. Besemer J, Borodovsky M (2005) GeneMark: веб-программа для поиска генов у прокариот, эукариот и вирусов.Нуклеиновые кислоты Res 33: W451–454.
- 30. Bendtsen JD, Nielsen H, von Heijne G, Brunak S (2004) Улучшенное предсказание сигнальных пептидов: SignalP 3.0. J Mol Biol 340: 783–795.
- 31. Финн Р.Д., Клементс Дж., Эдди С.Р. (2011) Веб-сервер HMMER: интерактивный поиск сходства последовательностей. Nucleic Acids Res 39: W29–37.
- 32. Марчлер-Бауэр А., Лу С., Андерсон Дж. Б., Чицаз Ф., Дербишир М.К. и др. (2011) CDD: База данных консервативных доменов для функциональной аннотации белков.Нуклеиновые кислоты Res 39: D225–229.
- 33. Sigrist CJ, Cerutti L, de Castro E, Langendijk-Genevaux PS, Bulliard V и др. (2010) PROSITE, база данных белковых доменов для функциональной характеристики и аннотации. Nucleic Acids Res 38: D161–166.
- 34. Soding J, Biegert A, Lupas AN (2005) Интерактивный сервер HHpred для обнаружения гомологии белков и предсказания структуры. Nucleic Acids Res 33: W244–248.
- 35. Sonnhammer EL, von Heijne G, Krogh A (1998) Скрытая марковская модель для предсказания трансмембранных спиралей в белковых последовательностях.Proc Int Conf Intell Syst Mol Biol 6: 175–182.
- 36. Wilkins MR, Gasteiger E, Bairoch A, Sanchez JC, Williams KL, et al. (1999) Инструменты идентификации и анализа белков на сервере ExPASy. Методы Мол Биол 112: 531–552.
- 37. Jaroszewski L, Rychlewski L, Li Z, Li W, Godzik A (2005) FFAS03: сервер для выравнивания последовательностей профиль-профиль. Nucleic Acids Res 33: W284–288.
- 38. Марковиц В.М., Иванова Н.Н., Сзето Э., Паланиаппан К., Чу К. и др.(2008) IMG / M: система управления и анализа данных для метагеномов. Nucleic Acids Res 36: D534–538.
- 39. Марковиц В.М., Чен И.М., Чу К., Сзето Э., Паланиаппан К. и др. (2012) IMG / M-HMP: система сравнительного анализа метагеномов для проекта Human Microbiome Project. PLoS One 7: e40151.
- 40. Human_Microbiome_Project_Consortium (2012) Структура, функции и разнообразие здорового микробиома человека. Природа 486: 207–214.
- 41. Хоффманн Т., фон Блон С., Станек А., Моисей С., Барзантны Х и др.(2012) Синтез, высвобождение и повторный захват совместимого растворенного вещества пролина осмотически подвергнутыми стрессу клетками Bacillus subtilis. Appl Environ Microbiol 78: 5753–5762.
- 42. Sleator RD, Gahan CG, Hill C (2001) Идентификация и нарушение локуса proBA в Listeria monocytogenes: роль биосинтеза пролина в солеустойчивости и инфекции мышей. Appl Environ Microbiol 67: 2571–2577.
- 43. Bayley DP, Rocha ER, Smith CJ (2000) Анализ cepA и других генов Bacteroides fragilis показывает уникальную структуру промотора.FEMS Microbiol Lett 193: 149–154.
- 44. Вингадассалом Д., Колб А., Майер С., Рыбкин Т., Коллатц Э. и др. (2005) Необычный первичный сигма-фактор в типе Bacteroidetes. Мол микробиол 56: 888–902.
- 45. Flower DR (1996) Семейство белков липокалина: структура и функция. Biochem J 318 (Pt 1): 1–14.
- 46. Martinez A, Bradley AS, Waldbauer JR, Summons RE, DeLong EF (2007) Экспрессия гена фотосистемы протеородопсина обеспечивает фотофосфорилирование в гетерологичном хозяине.Proc Natl Acad Sci U S A 104: 5590–5595.
- 47. Ван З., О’Шонесси Т.Дж., Сото С.М., Рахбар А.М., Робертсон К.Л. и др. (2012) Функция и регуляция протеородопсина Vibrio campbellii: приобретенная фототрофия у классического органогетеротрофа. PLoS One 7: e38749.
- 48. Бежа О, Аравинд Л., Кунин Э.В., Сузуки М.Т., Хадд А. и др. (2000) Бактериальный родопсин: свидетельство нового типа фототрофии в море. Наука 289: 1902–1906.
- 49. Сабехи Дж., Лой А., Юнг К. Х., Партха Р., Спудич Дж. Л. и др.(2005) Новое понимание метаболических свойств морских бактерий, кодирующих протеородопсины. PLoS Biol 3: e273.
- 50. фон Линтиг Дж., Фогт К. (2000) Заполнение пробела в исследованиях витамина А. Молекулярная идентификация фермента, расщепляющего β-каротин до сетчатки. J Biol Chem 275: 11915–11920.
- 51. Рост Б (1999) Сумеречная зона выравнивания последовательностей белков. Protein Eng 12: 85–94.
- 52. Sleator RD (2012) Белки: форма и функции. Bioeng Bugs 3: 80–85.
- 53. Kerfeld CA, Sawaya MR, Brahmandam V, Cascio D, Ho KK, et al. (2003) Кристаллическая структура цианобактериального водорастворимого каротиноид-связывающего белка. Структура 11: 55–65.
- 54. Gruszecki WI, Strzalka K (2005) Каротиноиды как модуляторы физических свойств липидной мембраны. Biochim Biophys Acta 1740: 108–115.
- 55. Maresca JA, Bryant DA (2006) Два гена, кодирующие новые ферменты, модифицирующие каротиноиды, в зеленой серной бактерии Chlorobium tepidum.J Bacteriol 188: 6217–6223.
- 56. Пельц А., Виланд К.П., Путцбах К., Хентшель П., Альберт К. и др. (2005) Структура и биосинтез стафилоксантина из Staphylococcus aureus. J Biol Chem 280: 32493–32498.
- 57. Kim SH, Lee PC (2012) Функциональная экспрессия и расширение пути биосинтеза стафилококка стафилоксантина в Escherichia coli. J Biol Chem 287: 21575–21583.
- 58. Бриттон Г. (1995) Структура и свойства каротиноидов в зависимости от функции.FASEB J 9: 1551–1558.
- 59. Певснер Дж. (2009) Биоинформатика и функциональная геномика: 2-е издание: John Wiley & Sons Inc., Хобокен, Нью-Джерси, США.
- 60. Спудич Ю.Л., Синещеков О.А., Говорунова Е.Г. (2013) Дивергенция механизма микробных родопсинов. Biochim Biophys Acta.
- 61. Sleator RD (2013) Руководство по филогенетике для новичков. Microb Ecol 66: 1–4.
- 62. Слеатор Р.Д. (2011) Филогенетика. Arch Microbiol 193: 235–239.
- 63. de la TorreJR, Christianson LM, Beja O, Suzuki MT, Karl DM и др. (2003) Гены протеородопсина распределены среди различных таксонов морских бактерий. Proc Natl Acad Sci U S A 100: 12830–12835.
- 64. Шарма А.К., Спудич Дж. Л., Дулиттл В. Ф. (2006) Микробные родопсины: функциональная универсальность и генетическая подвижность. Trends Microbiol 14: 463–469.
- 65. McCarren J, DeLong EF (2007) Кластеры генов фотосистемы протеородопсина демонстрируют коэволюционные тенденции и общее происхождение среди различных морских микробных типов.Environ Microbiol 9: 846–858.
- 66. Учияма Т., Миядзаки К. (2009) Функциональная метагеномика для открытия ферментов: проблемы для эффективного скрининга. Curr Opin Biotechnol 20: 616–622.
- 67. Stack HM, Sleator RD, Bowers M, Hill C, Gahan CG (2005) Роль HtrA в индукции стресса и потенциале вирулентности в Listeria monocytogenes. Appl Environ Microbiol 71: 4241–4247.
- 68. Battesti A, Majdalani N, Gottesman S (2011) RpoS-опосредованная общая стрессовая реакция у Escherichia coli.Анну Рев Микробиол 65: 189–213.
- 69. Bohringer J, Fischer D, Mosler G, Hengge-Aronis R (1995) UDP-глюкоза является потенциальной внутриклеточной сигнальной молекулой в контроле экспрессии сигма S и сигма S-зависимых генов в Escherichia coli. J Bacteriol 177: 413–422.
- 70. Hengge-Aronis R, Klein W., Lange R, Rimmele M, Boos W. (1991) Гены синтеза трегалозы контролируются предполагаемым сигма-фактором, кодируемым rpoS, и участвуют в термостойкости стационарной фазы у Escherichia coli.J Bacteriol 173: 7918–7924.
- 71. Cheville AM, Arnold KW, Buchrieser C, Cheng CM, Kaspar CW (1996) rpoS-регуляция устойчивости к кислоте, теплу и соли у Escherichia coli O157: H7. Appl Environ Microbiol 62: 1822–1824.
- 72. Chiang SM, Schellhorn HE (2012) Регуляторы генов ответа на окислительный стресс у Escherichia coli и их функциональная консервация у бактерий. Arch Biochem Biophys 525: 161–169.
- 73. Clauditz A, Resch A, Wieland KP, Peschel A, Gotz F (2006) Стафилоксантин играет роль в приспособленности Staphylococcus aureus и его способности справляться с окислительным стрессом.Инфекция иммунной 74: 4950–4953.
- 74. Kelman D, Ben-Amotz A, Berman-Frank I (2009) Каротиноиды обеспечивают основную антиоксидантную защиту у глобально значимой морской цианобактерии Trichodesmium, фиксирующей N2. Environ Microbiol 11: 1897–1908.
- 75. Xu J, Johnson RC (1997) Активация RpoS-зависимой транскрипции proP P2 с помощью белка Fis in vitro. J Mol Biol 270: 346–359.
- 76. Xu J, Johnson RC (1997) Белок рецептора циклического AMP функционирует как репрессор осмотически индуцируемого промотора proP P1 в Escherichia coli.J Bacteriol 179: 2410–2417.
- 77. Bjursell MK, Martens EC, Gordon JI (2006) Функциональные геномные и метаболические исследования адаптации выдающегося симбионта кишечника взрослого человека, Bacteroides thetaiotaomicron, к периоду кормления грудью. J Biol Chem 281: 36269–36279.
- 78. Kim SH, Ahn YO, Ahn MJ, Lee HS, Kwak SS (2012) Подавление β-каротингидроксилазы увеличивает β-каротин и общие каротиноиды, повышая устойчивость к солевому стрессу в трансгенных культивируемых клетках сладкого картофеля.Фитохимия 74: 69–78.
- 79. Мэтьюз-Рот М.М. (1987) Фотозащита каротиноидами. Fed Proc 46: 1890–1893.
- 80. Мишра Н.Н., Лю Г.Й., Йеман М.Р., Наст СС, Проктор Р.А. и др. (2011) Связанное с каротиноидами изменение текучести клеточной мембраны влияет на чувствительность Staphylococcus aureus к защитным пептидам хозяина. Антимикробные агенты Chemother 55: 526–531.
- 81. Phongsisay V, Perera VN, Fry BN (2007) Экспрессия гена htrB важна для чувствительности Salmonella typhimurium и Campylobacter jejuni к суровым условиям окружающей среды.Микробиология 153: 254–262.
- 82. Рева О. Н., Вайнель С., Вайнель М., Бом К., Степандич Д. и др. (2006) Функциональная геномика стрессового ответа у Pseudomonas putida KT2440. J Bacteriol 188: 4079-4092.
морских экосистем Западной Африки:
% PDF-1.6 % 1167 0 объект > эндобдж 1101 0 объект > эндобдж 1164 0 объект > поток 2007-10-05T22: 10: 45-07: 00Acrobat PDFMaker 8.1 для Word2010-03-23T14: 48: 18-07: 002010-03-23T14: 48: 18-07: 00 Acrobat Distiller 8.1.0 (Windows) application / pdf
| ||