Преодоление разрыва: состав, регуляция и физиологическая функция комплекса киназ IκB Стимуляции фосфорилирования IκB в естественных условиях недостаточно для активации NF-κB. Мол Селл Биол. 1995; 15:1294–1301. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
2. Baeuerle PA, Baltimore D. NF-κB — десять лет спустя. Клетка. 1996; 87: 13–20. [PubMed] [Google Scholar]
3. Бауэрле П.А., Хенкель Т. Функция и активация NF-κB в иммунной системе. Анну Рев Иммунол. 1994;12:141–179. [PubMed] [Google Scholar]
4. Болдуин А.С. Белки NF-kB и IkB — новые открытия и идеи. Анну Рев Иммунол. 1996; 14: 649–683. [PubMed] [Google Scholar]
5. Барнс П. Дж., Карин М. Ядерный фактор-κB: основной фактор транскрипции при хронических воспалительных заболеваниях. N Engl J Med. 1997; 336:1066–1071. [PubMed] [Google Scholar]
6. Бег А.А., Балтимор Д. Важнейшая роль NF-κB в предотвращении гибели клеток, вызванной TNF-α. Наука. 1996; 274: 782–784. [PubMed] [Академия Google]
7.
Beg AA, Sha WC, Bronson RT, Ghosh S, Baltimore D. Эмбриональная летальность и дегенерация печени у мышей, у которых отсутствует компонент RelA в NF-κB. Природа. 1995; 376: 167–169. [PubMed] [Google Scholar]
8. Бендер К., Готтлихер М., Уайтсайд С., Рамсдорф Х.Дж., Херрлих П. Последовательная независимая от повреждения ДНК и зависимая от повреждения ДНК активация NF-κB УФ. EMBO J. 1998; 17: 5170–5181. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
9. Бхуллар И.С., Ли И.С., Мяо Х., Занди Э., Ким М., Ший Дж.И., Чиен С. Активация киназы IκB под действием напряжения сдвига жидкости зависит от интегрина. Дж. Биол. Хим. 1998;273:30544–30549. [PubMed] [Google Scholar]
10. Брокман Дж. А., Шерер Д. С., МакКинзи Т. А., Холл С. М., Ци X, Ли В. И., Баллард Д. В. Связывание домена сигнального ответа в IκBα с несколькими путями активации NF-κB. Мол Селл Биол. 1995; 15: 2809–2818. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
11. Браун К., Герстбергер С., Карлсон Л.
, Францозо Г., Зибенлист У. Контроль протеолиза IκBα с помощью сайт-специфического сигнал-индуцированного фосфорилирования. Наука. 1995; 267:1485–1491. [PubMed] [Академия Google]
12. Чен З., Хаглер Дж., Паломбелла В. Дж., Меландри Ф., Шерер Д., Баллард Д., Маниатис Т. Сигнально-индуцированное сайт-специфическое фосфорилирование нацеливает IκB на убиквитин-протеасомный путь. Гены Дев. 1995; 9: 1586–1597. [PubMed] [Google Scholar]
13. Chen Z J, Parent L, Maniatis T. Сайт-специфическое фосфорилирование IκBα с помощью новой убиквитин-зависимой протеинкиназы. Клетка. 1996; 84: 853–862. [PubMed] [Google Scholar]
14. Чу З.Л., ДиДонато Дж.А., Хавигер Дж., Баллард Д.В. Таксовый онкопротеин вируса Т-клеточного лейкоза человека типа 1 связывается с киназами IκB, содержащими IKKα и IKKβ, и постоянно активирует их. J Biol Chem . 1998;273:15891–15894. [PubMed] [Google Scholar]
15. Cohen L, Henzel W J, Baeuerle PA. IKAP представляет собой каркасный белок киназного комплекса IκB.
Природа. 1998; 395: 292–296. [PubMed] [Google Scholar]
16. Connelly M A, Marcu K B. CHUK, новый член семейства взаимодействующих белков спираль-петля-спираль и лейциновая молния, содержит домен серин-треонинкиназы. Cell Мол Биол Res. 1995; 41: 537–549. [PubMed] [Google Scholar]
17. Delhase M, Hayakawa M, Chen Y, Karin M. Положительная и отрицательная регуляция активности киназы IκB посредством фосфорилирования субъединицы IKKβ. Наука. 1999;284:309–313. [PubMed] [Google Scholar]
18. DiDonato J, Mercurio F, Rosette C, Wu-Li J, Suyang H, Ghosh S, Karin M. Картирование индуцируемых сайтов фосфорилирования IκB, которые сигнализируют о его убиквитинировании и деградации. Мол Селл Биол. 1996; 16: 1295–1304. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
19. ДиДонато Дж. А., Хаякава М., Ротварф Д. М., Занди Э., Карин М. Цитокин-чувствительная киназа IκB, которая активирует фактор транскрипции NF-κB. Природа. 1997; 388: 548–554. [PubMed] [Академия Google]
20.
DiDonato J A, Mercurio F, Karin M. Фосфорилирование IκBα предшествует, но недостаточно для его диссоциации от NF-κB. Мол Селл Биол. 1995; 15:1302–1311. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
21. Doi TS, Marino MW, Takahashi T, Yoshida T, Sakakura T, Old LJ, Obata Y. Отсутствие фактора некроза опухоли спасает RelA-дефицитных мышей от эмбриональной гибели . Proc Natl Acad Sci USA. 1999; 96: 2994–2999. [Статья бесплатно PMC] [PubMed] [Google Scholar]
22. Hibi M, Lin A N, Smeal T, Minden A, Karin M. Идентификация протеинкиназы, чувствительной к онкопротеину и ультрафиолетовому излучению, которая связывает и потенцирует c- Домен активации июнь. Гены Дев. 1993;7:2135–2148. [PubMed] [Google Scholar]
23. Hu Y, Baus V, Delhase M, Zhang P, Johnson R, Karin M. Аномальный морфогенез, но интактная активация IKK у мышей, лишенных субъединицы IKKα киназы IκB. Наука. 1999; 284:318–320. [PubMed] [Google Scholar]
24. Karin M., Delhase M. JNK или IKK, AP-1 или NF-κB, которые являются мишенями для действия киназы 1 MEK? Proc Natl Acad Sci USA.
1998; 95: 9067–9069. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
25. Ли Ф.С., Хаглер Дж., Чен З.Дж., Маниатис Т. Активация киназного комплекса IκBα с помощью MEKK1, киназы пути JNK. Клетка. 1997;88:213–222. [PubMed] [Google Scholar]
26. Lee F S, Peters RT, Dang LC, Maniatis T. MEKK1 активирует киназу IκB α и киназу IκB β Proc Natl Acad Sci USA. 1998;95:9319–9324. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
27. Li N, Karin M. Ионизирующее излучение и коротковолновое ультрафиолетовое излучение активируют NF-κB посредством двух различных механизмов. Proc Natl Acad Sci USA. 1998; 95:13012–13017. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
28. Li Q, Van Antwerp D, Mercurio F, Lee K-F, Verma I M. Тяжелая дегенерация печени у мышей, у которых отсутствует ген киназы 2 IκB. Наука. 1999;284:321–325. [PubMed] [Google Scholar]
28a. Ли, З. и др. Неопубликованные данные.
29. Liu ZG, Hsu HL, Goeddel DV, Karin M.
Рассечение эффекторных функций TNF-рецептора 1 — активация Jnk не связана с апоптозом, в то время как активация NF-κB предотвращает гибель клеток. Клетка. 1996; 87: 565–576. [PubMed] [Google Scholar]
30. Малинин Н.Л., Болдин М.П., Коваленко А.В., Уоллах Д. MAP3K-родственная киназа, участвующая в индукции NF-kB под действием TNF, CD95 и IL-1. Природа. 1997; 385: 540–544. [PubMed] [Академия Google]
31. Меркурио Ф., Чжу Х., Мюррей Б.В., Шевченко А., Беннетт Б.Л., Ли Дж., Янг Д.Б., Барбоза М., Манн М., Мэннинг А., Рао А. IKK-1 и IKK-2: цитокин-активируемые киназы IκB необходим для активации NF-κB. Наука. 1997; 278:860–866. [PubMed] [Google Scholar]
32. Regnier CH, Yeong Song H, Gao X, Goeddel DV, Cao Z, Rothe M. Идентификация и характеристика киназы IκB. Клетка. 1997; 90: 373–383. [PubMed] [Google Scholar]
33. Rothwarf DM, Zandi E, Natoli G, Karin M. IKK-γ является важной регуляторной субъединицей киназного комплекса IκB. Природа. 1998;395:297–300. [PubMed] [Google Scholar]
33a.
Такэда К., Такеучи О., Цудзимура Т., Итами С., Адачи О., Каваи Т., Санджо Х., Йошикава К., Терада Н., Акира С. Аномалии конечностей и кожи у мышей, не имеющих IKKα Science. 1999; 284:313–316. [PubMed] [Google Scholar]
34. Traenckner EBM, Pahl HL, Henkel T, Schmidt KN, Wilk S, Baeuerle PA. Фосфорилирование человеческого IκBα на серинах 32 и 36 контролирует протеолиз IκBα и активацию NF-κB в ответ на разнообразные раздражители. EMBO J. 1995; 14: 2876–2883. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
35. Uhlik M, Good L, Xiao G, Harhaj E W, Zandi E, Karin M, Sun S C. Киназа, индуцирующая NF-κB, и киназа IκB участвуют в вирусе Т-клеточного лейкоза I человека, опосредованном NF-κB активация. Дж. Биол. Хим. 1998; 273:21132–21136. [PubMed] [Google Scholar]
36. Ван Антверпен Д. Дж., Мартин С. Дж., Кафри Т., Грин Д. Р., Верма И. М. Подавление апоптоза, индуцированного TNF-α, с помощью NF-κB. Наука. 1996; 274: 787–789. [PubMed] [Google Scholar]
37. Верма И.
М., Стивенсон Дж. К., Шварц Э. М., Ван Антверпен Д., Миямото С. Семья Rel/NF-κB/IκB: интимные рассказы об ассоциации и разобщении. Гены Дев. 1995;9:2723–2735. [PubMed] [Google Scholar]
38. Wang C.Y., Mayo M.W., Baldwin A.S. Апоптоз, индуцированный TNF и противораковой терапией – потенцирование путем ингибирования NF-κB. Наука. 1996; 274: 784–787. [PubMed] [Google Scholar]
39. Wang C Y, Mayo M W, Korneluk R G, Goeddel DV, Baldwin A S., Jr Антиапоптоз NF-κB: индукция TRAF1 и TRAF2 и c-IAP1 и c-IAP2 для подавления каспазы -8 активация. Наука. 1998; 281:1680–1683. [PubMed] [Google Scholar]
40. Whiteside S T, Ernst MK, LeBail O, Laurent-Winter C, Rice N, Israël A. N- и C-концевые последовательности контролируют деградацию MAD3/IκBα в ответ на индукторы NF. -kB активность. Мол Селл Биол. 1995;15:5339–5345. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
41. Woronicz J D, Gao X, Cao Z, Rothe M, Goeddel DV. Киназа IκB-β: активация NF-κB и образование комплекса с киназой IκB-α и НИК.
Наука. 1997; 278: 866–869. [PubMed] [Google Scholar]
42. Wu MX, Ao Z, Prasad KV, Wu R, Schlossman SF. IEX-1L, ингибитор апоптоза, участвующий в выживании клеток, опосредованном NF-κB. Наука. 1998; 281:998–1001. [PubMed] [Google Scholar]
43. Wulczyn FG, Krappmann D, Scheidereit C. Семейства генов NF-κB/Rel и IκB: медиаторы иммунного ответа и воспаления. Дж. Мол Мед. 1996;74:749–769. [PubMed] [Google Scholar]
44. Yamaoka S, Courtois G, Bessia C, Whiteside S T, Weil R, Agou F, Kirk H E, Kay R J, Israel A. Комплементарное клонирование NEMO, компонента киназного комплекса IκB необходим для активации NF-κB. Клетка. 1998;93:1231–1240. [PubMed] [Google Scholar]
45. Yin M J, Christerson L B, Yamamoto Y, Kwak Y T, Xu S, Mercurio F, Barbosa M, Cobb M H, Gaynor RB. Таксовый белок HTLV-1 связывается с MEKK1 для стимуляции IκB. активность киназы и активация NF-κB. Клетка. 1998;93:875–884. [PubMed] [Google Scholar]
46. Zandi E, Chen Y, Karin M. Прямое фосфорилирование IκB с помощью IKKα и IKKβ: различение свободного и связанного с NF-κB субстрата.
Наука. 1998; 281:1360–1363. [PubMed] [Google Scholar]
47. Zandi E, Rothwarf DM, Delhase M, Hayakawa M, Karin M. Киназный комплекс IκB (IKK) содержит две субъединицы киназы, IKKα и IKKβ, необходимые для фосфорилирования IκB и NF-κB. активация. Клетка. 1997; 91: 243–252. [PubMed] [Академия Google]
48. Занди Э. и М. Карин. Неопубликованные данные.
Фосфо-IKK альфа (Ser176, Ser180) Поликлональное антитело (44-714)
Щелчок по изображениям или ссылкам перенаправит вас на веб-сайт, размещенный BenchSci, который предоставляет сторонние научное содержание. Ни содержание, ни технологии и процессы BenchSci для выбор был оценен нами; мы предоставляем их как есть и без каких-либо гарантий, в том числе для использования или применения представленных продуктов Thermo Fisher Scientific.
Инвитроген
Расширенная проверка Это антитело было подтверждено обработкой клеток, чтобы гарантировать, что антитело связывается с указанным антигеном.
1 ссылка
Посмотреть все (36) IKK альфа-антитела
В этом эксперименте использовали следующий продукт: поликлональные антитела Phospho-IKK alpha (Ser176, Ser180) от Thermo Fisher Scientific, № по каталогу 44-714, RRID AB_2533730.
Галерея изображений продукта
Иммунофлуоресцентный анализ Phospho-IKK альфа (Ser176, Ser180) проводили на 70% конфлюэнтных клетках HeLa с логарифмической фазой. Клетки обрабатывали в течение 20 минут 50 нг/мл TNF-альфа и фиксировали 4% параформальдегидом в течение 15 минут, пермеабилизировали 0,25% Triton™ X-100 в течение 10 минут и блокировали 5% BSA в течение 1 часа при комнатной температуре. температура. Клетки метили кроличьим поликлональным антителом Phospho-IKK альфа (Ser176, Ser180) (продукт № 44-714) в разведении 1:250 в 0,1% BSA и инкубировали в течение 3 часов при комнатной температуре, а затем метили козьим анти-кроличьим IgG. (H+L) Вторичное антитело Superclonal™, конъюгат Alexa Fluor® 488 (продукт № A27034) в разведении 1:2000 в течение 45 минут при комнатной температуре (панель a: зеленый).
Ядра (панель b: синий) окрашивали SlowFade® Gold Antifade Mountant с DAPI (продукт № S369).38). F-актин (панель с: красный) окрашивали родамином фаллоидином (продукт № R415, 1:300). Панель d представляет собой объединенное изображение, показывающее ядерную локализацию. Панель e представляет собой первичный контроль без антител. Изображения были сняты с 60-кратным увеличением.Конкуренция и индукция пептидов, иммунопреципитаты, приготовленные из лизатов клеток Jurkat, стимулированных 80 нг/мл TNF-альфа в течение 5 минут при 37°C (1-4, 6) или оставленных нестимулированными (5), разделяли с помощью SDS-PAGE на 10% полиакриламидном гель и перенесены на PVDF. Мембраны блокировали 5% буфером BSA-TBST в течение ночи при 4°C и инкубировали с антителом Phospho-IKK alpha (Ser176, Ser180) в разведении 1:500 в течение двух часов при комнатной температуре в 3% буфере BSA-TBST, после чего предварительная инкубация с: отсутствием пептида (1, 5, 6), нефосфопептидом, соответствующим иммуногену (2), общим фосфосеринсодержащим пептидом (3) или фосфопептидным иммуногеном (4).
Анализ ChIP-qPCR IKK-альфа pSer176/pSer180 проводили с 10 мкл кроличьего поликлонального антитела Phospho IKK-альфа pSer176/pSer180 (продукт № 44-714) на срезанном хроматине из 2 миллионов клеток HeLa, обработанных 50 нг/мл TNF Alpha в течение одного часа с использованием системы иммунопреципитации хроматина MAGnify™ (номер продукта 49-2024). Нормальный кроличий IgG использовали в качестве отрицательного IP-контроля. Очищенную ДНК из каждого образца ChIP анализировали с помощью системы ПЦР в реальном времени StepOnePlus™ (продукт № 4376600) с праймерами для промотора активного гена IL-8, используемого в качестве мишени положительного контроля, и SAT2, используемого в качестве мишени отрицательного контроля.
Данные представлены как кратное обогащение сигнала антитела по сравнению с отрицательным контролем IgG с использованием сравнительного метода КТ.Измененная экспрессия белков при обработке клеток демонстрирует специфичность антител. Вестерн-блот Phospho-IKK альфа (Ser176, Ser180) с использованием поликлонального антитела Phospho-IKK альфа (Ser176, Ser180) (продукт № 44-714) показывает повышенную экспрессию Phospho-IKK альфа (Ser176, Ser180) в клетках Jurkat после обработки. с ФНО-Альфа. {ТМ}
Подробная информация о продукте
44-714
Только для исследовательских целей. Не для использования в диагностических процедурах. Не для перепродажи без специального разрешения.
Каталожные номера продуктов
Аутофагическая деградация IKKα, опосредованная обратной связью, требует CHK1- и p300/CBP-зависимого ацетилирования p53.
Journal of Cell Science
Xu X, Zhang C, Xu H, Wu L, Hu M, Song L
44-714 использовали в вестерн-блоттинге, чтобы сделать вывод о том, что как IKKα-, так и CHK1-зависимое фосфорилирование и ацетилирование р53 способствуют опосредование селективной обратной аутофагической деградации IKKα во время индуцированных арсенитом проапоптотических ответов.